摘 要：制備熊果酸葡萄糖酯，對(duì)其降血脂作用進(jìn)行研究。采用ICR小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，建立高血脂動(dòng)物模型，然后飼喂熊果酸葡萄糖酯，探討熊果酸葡萄糖酯的降血脂作用。結(jié)果表明：熊果酸葡萄糖酯組小鼠的血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）和動(dòng)脈硬化指數(shù)（AI）均不同程度低于高脂模型組，而高密度脂蛋白（HDLC）卻非常顯著高于高脂模型組。熊果酸葡萄糖酯具有顯著的降血脂保健作用。

關(guān)鍵詞：熊果酸葡萄糖酯；高脂血癥；降血脂

中圖分類號(hào) R151.41 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2013）10-22-02

熊果酸（Ursolic acid）為五環(huán)三萜類化合物，又名烏索酸、烏蘇酸，在自然界分布廣泛，如山楂、熊果、烏梅、陸英、蘆筍、野薔薇果、車(chē)前草、女貞子等植物中均含有[1]。研究發(fā)現(xiàn)，熊果酸具有降血脂、降血壓、降血糖等多種功能作用[2-6]。但熊果酸不溶于水，限制了其使用，將熊果酸采用糖分子進(jìn)行修飾，可提高其溶解性。熊果酸葡萄糖酯是熊果酸采用葡萄糖分子進(jìn)行修飾所得到的一種修飾產(chǎn)物，為驗(yàn)證其降血脂作用，筆者采用脂肪酶催化合成了熊果酸葡萄糖酯，通過(guò)建立高血脂動(dòng)物模型，對(duì)其降血脂作用進(jìn)行了探討。

1 材料與方法

1.1 試劑及儀器 試劑：乙酸葡萄糖酯，熊果酸，購(gòu)于sigma公司；脂酶，來(lái)源于Candlda sp.，由華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供（酶活2 586.3U/g）；血清甘油三酯（TG）測(cè)定試劑盒、血清總膽固醇（TC）測(cè)定試劑盒、血清高密度脂蛋白（HDLC）測(cè)定試劑盒，由上海榮盛生物技術(shù)有限公司生生產(chǎn)。儀器：7200全自動(dòng)生化分析儀，日本島津；721分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠。

1.2 熊果酸葡萄糖酯的制備 取熊果酸0.020 28g加入在100mL的燒瓶中，加入丙酮，充分?jǐn)嚢柚寥芙?，加?.552 9g K2CO3，室溫?cái)嚢枞芤撼扇榘咨?，加?.16mLCH3CH2I，繼續(xù)攪拌，以TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程，減壓去丙酮，加水稀釋后，用乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮后經(jīng)制備TLC分離得到熊果酸乙酯。將熊果酸乙酯、乙酸葡萄糖酯、環(huán)己烷和脂酶在反應(yīng)器內(nèi)混合均勻，在50℃條件下保溫24h，同時(shí)，不斷以150r/min的速度進(jìn)行攪拌，反應(yīng)結(jié)束后，在反應(yīng)器中加入乙醇/丙酮（1∶1，V/V）終止反應(yīng)，將反應(yīng)物經(jīng)制備TLC分離得熊果酸葡萄糖酯。

1.3 降血脂實(shí)驗(yàn)

1.3.1 動(dòng)物和飼料 ICR雄性小鼠（體重23±3g）；高脂飼料的制備：將95%基礎(chǔ)飼料粉、4%膽固醇、1%2號(hào)膽鹽加水?dāng)噭?，加工成條形，曬干。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取50只ICR雄性6周齡小鼠，按體重均衡隨機(jī)平均分為5組：空白對(duì)照組（飼以基礎(chǔ)飼料）與高脂模型對(duì)照組（飼以高脂飼料）均供給蒸餾水，低、中、高3個(gè)熊果酸葡萄糖酯劑量實(shí)驗(yàn)組，均飼以高脂飼料，同時(shí)分別供給熊果酸葡萄糖酯10、20、40mg/kg.d。定期稱重，8周末眼球取血，按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟測(cè)定血脂各項(xiàng)指標(biāo)，其中動(dòng)脈硬化指數(shù)：AI=（TC-HDLC）/HDLC。

1.4 數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后用[x±s]表示，組間差異經(jīng)t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)小鼠血清甘油三酯（TG）和總膽固醇（TC）含量的影響 熊果酸葡萄糖酯對(duì)小鼠血清甘油三酯（TG）和總膽固醇（TC）含量的影響見(jiàn)表1。由表1可知，高脂模型組與空白對(duì)照組小鼠血清TG和TC含量有非常顯著差異（P<0.01），表明高脂血癥模型建立。3個(gè)熊果酸葡萄糖酯劑量組的TG均與高脂模型組有非常顯著的差異（P<0.01）；熊果酸葡萄糖酯低劑量組的TC與高脂模型組含量有顯著差異（P<0.05），而熊果酸葡萄糖酯中、高劑量組的TC與高脂模型組含量有非常顯著差異（P<0.01）。

2.2 對(duì)小鼠血清高密度脂蛋白（HDL-C）含量的影響 熊果酸葡萄糖酯對(duì)小鼠血清高密度脂蛋白（HDL-C）含量的影響見(jiàn)表2。從表2可以看出，3個(gè)熊果酸葡萄糖酯的HDLC均與高脂模型組有極其顯著的差異（P<0.01），表明熊果酸葡萄糖酯有極其顯著抑制高脂飼喂小鼠HDL-C降低的作用。

2.3 對(duì)小鼠動(dòng)脈硬化指數(shù)（AI）的影響 熊果酸葡萄糖酯對(duì)小鼠動(dòng)脈硬化指數(shù)（AI）的影響見(jiàn)表3。表3結(jié)果表明，高脂模型組與空白對(duì)照組之間動(dòng)脈硬化指數(shù)存在極其顯著差異（P<0.01），表明高脂血癥模型建立；3個(gè)熊果酸葡萄糖酯劑量組的小鼠動(dòng)脈硬化指數(shù)均與高脂模型組存在非常顯著差異（P<0.01），表明它們具有抑制高脂飼喂小鼠動(dòng)脈硬化指數(shù)升高的作用。

3 結(jié)論

血漿膽固醇升高是誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）及冠心?。–HD）的重要因素[7]。我國(guó)35歲以上人群的CHD發(fā)病率為3%～5%[8]。熊果酸葡萄糖酯組小鼠的血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）和動(dòng)脈硬化指數(shù)（AI）均不同程度低于高脂模型組，而高密度脂蛋白（HDLC）卻非常顯著高于高脂模型組，由此可見(jiàn)，熊果酸葡萄糖酯能有效地預(yù)防和治療高脂血癥，對(duì)AS的防治也具有重要意義。

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