摘要：以三分三（Anisodus acutangulus C. Y. Wu et C. Chen）成熟種子為試驗材料，研究溫度、光照、浸種時間、層積及赤霉素處理對其萌發(fā)的影響。結(jié)果表明，三分三種子萌發(fā)的最適宜溫度為25 ℃，種子發(fā)芽率達（57.6±1.53）%；25 ℃恒溫浸種24 h能提高三分三種子的發(fā)芽率；三分三種子萌發(fā)需光，光照條件下種子發(fā)芽率顯著高于黑暗條件；濕沙層積后用赤霉素處理能顯著提高三分三種子的發(fā)芽率，種子發(fā)芽率高達（97.7±0.58）%。

關(guān)鍵詞：三分三（Anisodus acutangulus C. Y. Wu et C. Chen）；種子萌發(fā)；影響因素

中圖分類號：Q949.777.7；Q945.34 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）17-4142-03

Influence Factors Analysis on the Seed Germination of Anisodus acutangulus

YANG Xing-biao，LI Hai-feng

（College of Pharmacy and Chemistry， Dali University，Dali 671000， Yunnan， China）

Abstract： The experiment was carried out to investigate the effects of temperature， light， soaking time， stratification， and the gibberellic acid treatment on the mature seed germination of Anisodus acutangulus. The results showed that the seed germination rate of Anisodus acutangulus was the the highest at 25 ℃ for（57.6±1.53）%， and it could be improved if the seeds were soaked for 24 h. The seed germination of Anisodus acutangulus needed light， and the seed germination rate under light was significantly higher than in the darkness. Furthermore， when seeds were soaked with gibberellic acid after stratification， the seed germination rate of Anisodus acutangulus could be improved significantly， and could reach to （97.7±0.58）%.

Key words： Anisodus acutangulus； seed germination； infulence factor

收稿日期：2012-11-16

基金項目：云南省大理州科技項目（DLKJJ201109）；大理學(xué)院2011年中青年學(xué)術(shù)帶頭人培養(yǎng)項目（DLXYXS201106）；大理學(xué)院大學(xué)生科研基金

項目（DSSKY200904）

作者簡介：楊興彪（1988-），男，云南宣威人，初級藥師，主要從事藥用植物資源與生物技術(shù)等研究，（電話）13170764216（電子信箱）

lihfzh888@sina.com；通訊作者，李海峰（1971-），男（白族），云南大理人，副教授，碩士，從事藥用植物生物技術(shù)等研究，（電話）

0872-2251475（電子信箱）lifhzh888@sina.com。

三分三（Anisodus acutangulus C. Y. Wu et C. Chen）為茄科（Solanaceae）多年生草本植物，別名大搜山虎、山野煙、山茄子等，僅在云南省西北部有分布，為云南地區(qū)民間常用珍稀藥材，以根、莖、葉及種子入藥，有大毒，具有麻醉鎮(zhèn)痛、祛風(fēng)除濕，治骨折、跌打損傷、關(guān)節(jié)疼痛、胃痛、腸絞痛等功效[1]。研究發(fā)現(xiàn)，三分三根莖中含有莨菪堿、東莨菪堿、中莨菪堿、山莨菪堿、托品堿等多種托品烷類生物堿[2]，其中，莨菪堿、東莨菪堿是阻斷副交感神經(jīng)作用類藥物，臨床上主要作為鎮(zhèn)靜劑[3]。

三分三主要生長于滇西北2 700～3 600 m的高海拔地區(qū)[1]，生態(tài)環(huán)境惡劣，分布范圍狹窄，資源極其有限。野生挖掘是民間用藥的主要來源，經(jīng)過長期無序采掘，資源遭到嚴(yán)重破壞，野生種質(zhì)資源瀕臨滅絕。雖然鄭光植等[4-7]對三分三細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)莨菪堿和東莨菪堿進行了大量的研究工作，并進行了一些小試、中試的研究，潘夕春等[8]對三分三發(fā)根培養(yǎng)生產(chǎn)托品烷類生物堿進行了研究，但是研究成果離工業(yè)化生產(chǎn)還有很大的距離。因此，目前通過人工種植仍然是解決藥材資源緊缺的有效途徑。種子萌發(fā)是開展人工種植藥材的基礎(chǔ)，目前國內(nèi)未見對三分三種子發(fā)芽的研究報道，因此，本試驗利用植物種子發(fā)芽試驗方法，研究溫度、光照、浸種時間、層積及赤霉素（Gibberellic acid，GA3）處理對三分三種子萌發(fā)的影響，以期為三分三種子育苗、人工種植提供理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用三分三種子于2011年秋季采自云南省大理市喜洲鎮(zhèn)花甸藥材種植基地，采收后曬干、去除雜物，用布包裹于室內(nèi)通風(fēng)保存。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計 發(fā)芽溫度設(shè)置15、20、25和30 ℃ 4 個處理；光照試驗在25 ℃下設(shè)為光照1 500 lx與黑暗2個處理。浸種時間試驗以不浸種為對照，設(shè)25 ℃去離子水浸種12、24、48 、72 h 4個水平。層積及赤霉素處理試驗，在韓德良等[9]基礎(chǔ)上設(shè)5個處理，未層積及未赤霉素處理的設(shè)為對照；干沙層積，種子在4 ℃條件下干沙層積30 d；濕沙層積，種子在4 ℃條件下濕沙層積30 d；GA3浸種，種子用50 mg/L GA3浸種24 h；干沙層積+ GA3浸種，種子在4 ℃條件下干沙層積30 d，再用50 mg/L GA3浸種24 h；濕沙層積+ GA3浸種，種子在4 ℃條件下濕沙層積30 d ，再用50 mg/L GA3浸種24 h。

1.2.2 種子發(fā)芽方法 種子發(fā)芽方法參考宗憲春等[10]的方法，選擇直徑15 cm的培養(yǎng)皿作為種子發(fā)芽容器，培養(yǎng)皿內(nèi)放置3層濕潤的濾紙作為發(fā)芽床，濾紙上均勻放置100粒種子，設(shè)3次重復(fù)。培養(yǎng)過程中始終保持濾紙濕潤。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與處理 每天記錄種子發(fā)芽情況，以胚根長≥2 mm（或胚芽形成）作為種子發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)，種子發(fā)芽試驗結(jié)束后統(tǒng)計種子發(fā)芽啟動時間、發(fā)芽持續(xù)期、發(fā)芽率和發(fā)芽勢，統(tǒng)計方法主要參考李惠敏等[11]的方法。種子發(fā)芽啟動時間指從播種到第一粒種子發(fā)芽所需要的時間，發(fā)芽持續(xù)期指從播種后第一粒種子發(fā)芽到最后一粒種子發(fā)芽（連續(xù)3 d沒有種子發(fā)芽視為發(fā)芽終止）所持續(xù)的時間，發(fā)芽率為能夠形成胚根或胚芽的種子數(shù)占播種種子數(shù)的比例，發(fā)芽勢為發(fā)芽持續(xù)天數(shù)50%時能夠形成胚根或胚芽的種子數(shù)占播種種子數(shù)的比例。

所得數(shù)據(jù)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對三分三種子萌發(fā)的影響

溫度對三分三種子萌發(fā)的影響見表1。從表1可以看出，溫度對三分三種子發(fā)芽影響較大，25 ℃時三分三種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢顯著（P<0.05）高于其他處理，種子發(fā)芽率高達（57.6±1.53）%，發(fā)芽勢為（42.30±1.53）%；發(fā)芽持續(xù)期顯著（P<0.05）短于其他處理；15 ℃以下時種子不能發(fā)芽。

2.2 光照對三分三種子萌發(fā)的影響

光照對三分三種子萌發(fā)的影響見表2。從表2可以看出，在光照條件下三分三種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢顯著（P<0.05）高于黑暗條件，發(fā)芽啟動時間、發(fā)芽持續(xù)期顯著（P<0.05）短于黑暗條件，表明三分三是需光性種子，在光照條件下種子生活力較強，發(fā)芽速度較快。

2.3 浸種時間對三分三種子萌發(fā)的影響

去離子水浸種時間對三分三種子萌發(fā)的影響見表3。從表3可以看出，浸種時間對三分三種子萌發(fā)影響較大，浸種24～48 h時，種子發(fā)芽率顯著（P<0.05）高于對照，浸種24 h時發(fā)芽率高達（67.0±1.00）%；浸種72 h時，種子發(fā)芽率顯著（P<0.05）低于對照，說明無浸種或浸種時間過長都不利于三分三種子的萌發(fā)；浸種24 h時，種子的發(fā)芽勢顯著（P<0.05）高于對照和其他處理，為（51.7±2.08）%。浸種12～48 h時種子發(fā)芽啟動時間相比對照和浸種72 h顯著（P<0.05）縮短，浸種24～48 h時發(fā)芽持續(xù)期相比對照和其他處理顯著（P<0.05）縮短。因此，綜合考慮發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽啟動時間和發(fā)芽持續(xù)期，三分三種子經(jīng)過24 h浸種最適宜萌發(fā)。

2.4 層積及赤霉素處理對三分三種子萌發(fā)的影響

層積及赤霉素處理對三分三種子萌發(fā)的影響見表4。從表4可以看出，經(jīng)過層積、赤霉素處理、層積加上赤霉素處理的三分三種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢顯著高于對照；層積和赤霉素浸種均能不同程度地解除三分三種子的休眠，促進種子發(fā)芽，經(jīng)過赤霉素浸種種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢顯著高于層積處理；三分三種子經(jīng)過層積后再用赤霉素浸種發(fā)芽率、發(fā)芽勢顯著高于單獨經(jīng)過層積處理或赤霉素浸種的處理，其中濕沙層積+CA3浸種發(fā)芽率高達（97.7±0.58）%，種子發(fā)芽勢為（90.7±2.08）%。三分三種子經(jīng)過層積處理后再用赤霉素浸種能顯著縮短種子的發(fā)芽啟動時間、發(fā)芽持續(xù)期，種子發(fā)芽啟動時間為（2.7±0.6）～（3.0±1.0） d，種子發(fā)芽持續(xù)期為（3.7±0.6）～（4.3±0.6） d，濕沙層積效果優(yōu)于干沙層積。

3 小結(jié)與討論

三分三生長于滇西北高海拔地區(qū)，自然生態(tài)環(huán)境惡劣，在自然條件下種子難以萌發(fā)，找到種子最適發(fā)芽條件，使種子在最短時間內(nèi)有最高發(fā)芽率，對開展三分三種子育苗、人工栽培具有重要意義。試驗結(jié)果表明，三分三種子的最佳發(fā)芽條件為25 ℃去離子水浸種24 h、25 ℃光照條件下能顯著提高種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢，縮短種子發(fā)芽啟動時間和發(fā)芽持續(xù)期。

從層積及赤霉素處理試驗結(jié)果可知，三分三種子具有一定的休眠特性，三分三種子含有萌發(fā)抑制物質(zhì)，經(jīng)過層積或赤霉素浸種均能有效解除種子休眠，提高種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢，縮短種子發(fā)芽啟動時間和發(fā)芽持續(xù)期。三分三種子經(jīng)過層積處理，再用GA3浸種對種子發(fā)芽促進作用更加明顯，其中，以濕沙層積+GA3浸種處理種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢最高，發(fā)芽啟動時間和發(fā)芽持續(xù)期最短，是三分三種子最適宜的催芽處理措施。試驗中三分三種子催芽處理措施是在人工控制溫度及光照條件下得出的結(jié)果，在實際生產(chǎn)中能否提高三分三種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢，能否縮短三分三種子發(fā)芽啟動時間和發(fā)芽持續(xù)期還有待進一步的研究。

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（責(zé)任編輯 王曉芳）