林敬州，姜 聰，汪自強(qiáng)，王國榮，樓兵干

(1.浙江大學(xué) 生物技術(shù)研究所，浙江杭州 310058;2.浙江出入境檢驗檢疫局，浙江 杭州 310006;3.浙江大學(xué)作物科學(xué)研究所，浙江 杭州 310058;4.杭州市蕭山區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，浙江 杭州 311203)

由平頭炭疽菌 (Colletotrichum truncatum)引起的大豆豆莢炭疽病是大豆產(chǎn)區(qū)的主要病害，嚴(yán)重影響大豆的產(chǎn)量和品質(zhì)，限制了鮮食大豆產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，給種植戶、出口創(chuàng)匯企業(yè)造成了極大的經(jīng)濟(jì)損失［1-2］。選育和利用抗病品種是防治該病最經(jīng)濟(jì)有效的措施。但抗性品種通常連續(xù)種植3～5年后，抗性會喪失，引起病害暴發(fā)流行。為避免因主栽大豆品種的抗源遺傳同質(zhì)性過于集中，遺傳變異過于狹窄，深入發(fā)掘、研究和利用優(yōu)良種質(zhì)資源選育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病性強(qiáng)、適應(yīng)性廣的新品種 (組合)是大豆育種的主要目標(biāo)。研究組于2011年對76份大豆品種 (品系)的大豆豆莢炭疽病抗性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究和評價，以期為大豆抗病改良育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試品種

選用76份中國大豆種質(zhì)資源作為供試品種(品系)(由浙江大學(xué)作物科學(xué)研究所汪自強(qiáng)教授提供)。

1.2 供試菌株與接種體制備

供試菌株為平頭炭疽菌XST01，由浙江大學(xué)大豆炭疽病課題組提供。

接種體制備:將菌株XST01先在PDA平板上培養(yǎng)約10 d，待菌落上長出大量黑色分孢子盤后，在PDA平板上倒入無菌水稀釋分生孢子，使之濃度達(dá)到1×107mL-1，供抗性測定噴霧接種用。

1.3 抗性測定

對大豆豆莢炭疽病的抗性測定在浙江大學(xué)華家池校區(qū)農(nóng)場試驗基地進(jìn)行。在大豆豆莢鼓粒初期對豆莢進(jìn)行噴霧接種，每個品種 (品系)設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)接種2株，約80個健康豆莢。接種后，套袋保濕24 h。接后7～10 d，待感病品種發(fā)病至5級時，按以下大豆豆莢炭疽病0～5級制調(diào)查記載病情，計算病情指數(shù)，利用唐啟義等編寫的DPS V12.50軟件采用Tukey方法對病情指數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。

大豆豆莢炭疽病嚴(yán)重度分級標(biāo)準(zhǔn)為 (以豆莢為單位):0級為無病斑;1級為能見細(xì)小病斑;2級為有明顯病斑，但病斑未超過4個;3級為病斑4個以上或有較大塊病斑，病斑面積占總豆莢面積1/3以下;4級為病斑面積占豆莢表面積1/3以上，1/2以下;5級為病斑面積占豆莢表面積1/2以上［2-3］。

病情指數(shù) = ［(∑各級病莢數(shù)×各級嚴(yán)重度)/(調(diào)查總莢數(shù)×5)］ ×100。

2 結(jié)果與分析

當(dāng)感病品種發(fā)病至5級時，對供試76份大豆材料進(jìn)行豆莢發(fā)病率和嚴(yán)重度的調(diào)查，結(jié)果 (表1)發(fā)現(xiàn)有的大豆材料的豆莢發(fā)病率與病情指數(shù)都較低，如 K25、S952單 2、B28、B6、H18烏青-

表1 不同品種 (品系)大豆豆莢的致病性

圖1 部分高抗、中抗、中感和高感材料的豆莢炭疽病田間發(fā)病癥狀

根據(jù)病情指數(shù)的顯著性差異分析，結(jié)合田間癥狀的表現(xiàn)，將供試的76份大豆材料對豆莢炭疽病的抗性分為5級:免疫、高抗、中抗、中感和感病。其中，免疫的材料為0份;高抗的材料為13份，分別為 K25、S952單 2、B33綠、B4、B5、001黃16、H18烏青-①、新 001綠 5、B6、B28、K13、T2、S954-35黑豆;中抗的材料為16份，分別為甜黑1、S951高桿、B29、黑001、B18、B20-青①、S954-29、大青豆、H18-15、KS、新 001黃1-①、B21(不育混)、001 黑 2、B39、E994-14、S952-7;中感的材料24份，分別為日本茶豆、KS3、E994-10、有毛黑豆、K11、小黑豆、日本黃豆長莢②、E994-1、浙3、張豆、五月拔、HKO、B16、S952黑豆單、無毛 3、有眼黃豆、甜黑 0、無毛遲、001黃19、黑豆、S951-4、B28綠、T1、001無毛;高感的材料23份，分別為浙1、E994-11、小亮黑豆、高 pro6、GD1617黃、H18-5(長莢)、鮮豆 5號、不育①、S952單 0、KS3綠、K1、B34單 2、S952-27單青、寬單白毛、S954-35、臺75、寬莢、喬六、日本黃豆長莢①、S954-2、新001黃1-②、新001黃2、B36。

3 小結(jié)

大豆育種資源是抗病的根本，篩選抗病性較強(qiáng)的種質(zhì)資源，為大豆育種親本的選擇提供了依據(jù)。通過對76份大豆種質(zhì)資源進(jìn)行抗病性的測定和田間調(diào)查觀察，篩選出高抗大豆豆莢炭疽病的材料13份，此結(jié)果為大豆育種選擇親本提供參考依據(jù)。在田間調(diào)查時發(fā)現(xiàn)，抗病材料豆莢上的絨毛較多，感病材料豆莢表面比較光，可以采用光譜技術(shù)對大豆豆莢炭疽病進(jìn)行早期檢測與鑒別［4-5］。炭疽病鑒定結(jié)果的因素較多。除菌源因素外，還受溫度、濕度等環(huán)境條件的影響。本項研究是在人工接種條件下進(jìn)行的，雖然有充足的菌源量，但往往會由于所用菌株的代表性，或由于鑒定時間、地點和鑒定人的不同，使人工接種鑒定結(jié)果與自然發(fā)病有一定的差異。更為有效的辦法是將兩者結(jié)合起來，綜合考察品種的抗病性，以便更好的指導(dǎo)生產(chǎn)。

［1］ 陳吳健，樓兵干，王國榮，等.12種殺菌劑對大豆豆莢炭疽病病原菌的室內(nèi)藥劑試驗 ［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007(6):707-709.

［2］ 樓兵干，陳吳健，林釵，等.一種新大豆豆莢炭疽病癥狀類型及其病原鑒定 ［J］.植物保護(hù)學(xué)報，2009，36(3):229-233.

［3］ 王國榮，孫志峰，陳吳健，等.大豆豆莢炭疽病有效殺菌劑的篩選與防治適期研究 ［J］.浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報，2012，24(2):258-262.

［4］ 馮雷，陳雙雙，馮斌，等.大豆豆莢炭疽病嚴(yán)重度的光譜檢測 ［J］.農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報，2012，43(8):175-179.

［5］ 馮雷，陳雙雙，馮斌，等.基于光譜技術(shù)的大豆豆莢炭疽病早期鑒別方法 ［J］.農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2012，28(1):139-144.