馬宗斌，劉桂珍，嚴根土 ，鄧士政，黃 群，李伶俐，朱 偉

(1.河南農業(yè)大學農學院，鄭州 450002;2.河南省種子管理站，鄭州 450046;3.中國農業(yè)科學院棉花研究所/棉花生物學國家重點實驗室，安陽 455000)

根據(jù)國際農業(yè)生物技術應用服務組織(ISAAA)發(fā)布的最新報道，2011年，全球轉基因抗蟲棉花總面積2500×104hm2，占全球棉花播種面積的69.4%;中國轉Bt基因棉花面積達到390×104hm2，占中國棉花種植面積的71.5%［1］。轉Bt基因棉花已在世界范圍內商業(yè)化種植，通過有效控制棉鈴蟲種群數(shù)量，而顯著減少了化學農藥的用量［2-3］。棉田捕食性天敵種群數(shù)量上升，有效抑制了蚜蟲的發(fā)生和危害，天敵進入大豆、花生、玉米等相鄰作物大田，顯著提升了整個農業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的生物防治功能［4］。

今年以來，永濟市在城市基層黨建工作中，樹立“全域黨建”“開放黨建”工作理念，將城區(qū)新建的4座城市驛站，打造成黨群服務“微”陣地，整合各領域資源，發(fā)揮“八大”陣地功能，打通黨員聯(lián)系服務群眾“最后一公里”，引領各領域黨建“大融合”，城市基層治理走向共治共享“大格局”。

施氮可以有效地調節(jié)棉花氮素生理代謝及生長發(fā)育［5-6］。對轉Bt基因抗蟲棉而言，氮素既是核酸和蛋白質等生命物質的組成部分，也是殺蟲晶體蛋白的主要構成物質。因此，氮素運籌可能是調節(jié)抗蟲棉Bt蛋白代謝的有效途徑。同時，棉花品種中導入Bt基因對其氮代謝也有重要影響［7-8］。在種植轉基因棉花過程中，如何通過氮素運籌在生育前中期提高器官中Bt蛋白的含量，改善其抗蟲性能，在生育后期降低器官的Bt蛋白的含量，減少對生態(tài)環(huán)境和人畜健康的潛在風險值得進一步研究。目前，已有研究表明，施氮量對棉花器官Bt蛋白的表達有顯著調控作用［9-10］，但施氮方式對抗蟲棉Bt蛋白含量的影響鮮見報道。為此，研究了施氮方式對抗蟲棉Bt蛋白含量的影響，以期為抗蟲棉合理施氮提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗主要環(huán)境條件及農藝管理措施

試驗于2009—2010年在河南農業(yè)大學科教園區(qū)(鄭州)進行，試驗地為春白地，土壤為沙壤土，肥力中等。土壤有機質 9.26 g/kg，全氮 1.03 g/kg，堿解氮 83.50 mg/kg，速效磷 18.36 mg/kg，速效鉀 96.56 mg/kg。2009年，從棉花播種至7月下旬，光、溫條件較好，雨量適中，棉花出苗較好，生長發(fā)育較快;進入8月后直至9月中上旬，雨量偏多，光、溫條件較差;9月下旬后，天氣正常，雨水較少，陽光充足，有利于棉花正常成熟。2010年，在棉花苗期，雨量較多，地溫回升較慢，棉苗發(fā)育略晚;6月中旬至8月中旬，氣溫正常，但陰天較多;8月中旬至9月下旬，雨量偏多，氣溫較常年略低，吐絮期推遲;9月下旬后，降雨較少，日照充足，積溫較常年偏高，對棉鈴吐絮較為有利。

老陳雖然當過偵察兵，但他還是被暗算了。如果我不告訴他那輛肇事車的車牌號，老陳哪會打電話舉報那個家伙，他不舉報也就不會被撞傷住院了。我覺得我應該去醫(yī)院看看老陳，不然我內心會感到愧疚的。在去醫(yī)院的路上，我買了一籃雞蛋，一掛香蕉。到了醫(yī)院，老陳見到我后，說你看你，破費干什么啊。老陳躺在床上，一條腿打了石膏。我問他沒什么事吧。他自我解嘲地笑了笑，說想不到這次馬失前蹄了。他們要是明著和我干，還真不是我的對手呢。

棉田磷肥和鉀肥全部基施，每年整地時，施入過磷酸鈣600 kg/hm2和氯化鉀225 kg/hm2。全生育期分別在初花期和盛花期噴施縮節(jié)安化控兩次，用量分別是37.5 g/hm2和60.0 g/hm2。2009年，全生育期未澆水;2010年在6月、7月各澆水1次。除處理措施外，各小區(qū)田間管理完全一致。

1.2 試驗設計

2.4.1 不同施氮方式下棉花幼嫩器官Bt蛋白含量的比較

經統(tǒng)計結果顯示,研究組冠心病患者的血清總膽紅素、直接膽紅素與間接膽紅素三項指標均低于對照組健康體檢者水平,P<0.05,;研究組的血清尿酸水平高于對照組,P<0.05,兩組間膽紅素與尿酸水平比較均存在統(tǒng)計學意義,見表1所示。

1.3 測定項目與方法

1.3.1 Bt蛋白含量

于2010年7月15日選定棉花當天新生的同一節(jié)位主莖葉片掛牌標記，在葉齡10、35、60、85 d(脫落為止)時取樣，分別代表展開期、功能期、衰老期和脫落期的棉花葉片;8月1日選定同一果枝和節(jié)位3 mm的蕾掛牌標記，在現(xiàn)蕾后5、15、25 d取樣，分別代表幼蕾、中蕾和大蕾;8月1日選定同一果枝和節(jié)位當天開放的花朵掛牌標記，在花后20、40、65 d取樣，分別代表膨大期、充實期和吐絮期的棉鈴。樣品從田間取樣后，在低溫條件下快速帶回實驗室，立即稱量1.0 g鮮樣，放入自封袋。先用液氮快速冷凍30 min，后轉入－40℃的超低溫冰箱凍存，待測Bt蛋白含量。在葉片取樣時避開葉脈，蕾用整個測定，鈴分成鈴殼、棉纖維和種子3部分。

Bt蛋白的測定采用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)［11］，藥盒由中國農業(yè)大學提供。

1.3.2 棉花測產

每小區(qū)選定中間2行，調查成鈴數(shù)。收獲10株絮鈴，測定鈴重和衣分，測算產量。

1.4 數(shù)據(jù)分析

2.3.2 施氮方式對棉纖維中Bt蛋白含量的影響

2 結果與分析

2.1 施氮方式對抗蟲棉葉片中Bt蛋白含量的影響

河南洛陽是中國著名歷史名城，被譽為“千年帝都、牡丹花城”洛陽，不但牡丹文明天下，洛陽偃師的葡萄種植也享譽大江南北。

圖1 施氮方式對抗蟲棉葉片Bt蛋白含量的影響Fig.1 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in leaves of transgenic cotton

2.2 施氮方式對棉蕾中Bt蛋白含量的影響

幼蕾是棉鈴蟲的主要為害對象之一，且棉蕾有較高的脫落率，其中的Bt蛋白也隨之進入土壤環(huán)境。圖2表明，隨著棉蕾的生長發(fā)育，其Bt蛋白的含量呈快速上升的趨勢。施氮方式對棉蕾中Bt蛋白含量有明顯的影響。隨著氮肥前移，棉蕾Bt蛋白含量有升高趨勢(大蕾期T2除外)。方差分析表明，在幼蕾期和大蕾期，T4處理的Bt蛋白含量與其余3個處理的差異達到極顯著水平;在中蕾期，T4處理極顯著高于T2和T1處理。

圖2 施氮方式對轉基因抗蟲棉棉蕾Bt蛋白含量的影響Fig.2 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in bud of transgenic cotton

2.3 施氮方式對抗蟲棉棉鈴不同器官中Bt蛋白含量的影響

沒有思想解放就沒有改革開放，一次大的思想解放，將會達成進一步改革的方向性的共識，因此思想解放永遠在路上。

形成期的棉子是棉鈴蟲取食的器官之一，其中的Bt蛋白含量代表其抗蟲性能;而棉子成熟期的Bt蛋白則成為殘留物。由圖5可以看出，在棉子的形成期，Bt蛋白含量極低，充實期迅速增加，至成熟期Bt蛋白含量增加更快。例如，T3處理的棉子Bt蛋白含量在充實期比形成期增加13.08倍，成熟期比形成期提高43.17倍。施氮方式對棉子中Bt蛋白含量的影響在不同生育階段有所不同，總體表現(xiàn)為在前中期，氮肥施用相對均衡的T2和T3處理，棉子中Bt蛋白含量較高，氮肥前移或后移的T4和T1處理棉子中Bt蛋白含量則較低;至棉子成熟期，隨著氮肥前移，棉子中Bt蛋白含量呈明顯下降的趨勢。例如，在成熟期，T2、T3和T4處理比T1處理的棉子Bt蛋白含量分別降低18.14%、27.69%和36.33%。方差分析表明，在棉子形成期和充實期，T2、T3處理的棉子Bt蛋白含量極顯著高于T4和T1處理;在成熟期，不同處理Bt蛋白含量差異均達極顯著水平。

棉鈴蟲主要取食膨大期棉鈴的鈴殼，此期Bt蛋白的含量對抗蟲較為關鍵;而棉鈴成熟期，鈴殼也是Bt蛋白殘留的主要器官之一。從圖3可以看出，隨著棉鈴的生長發(fā)育，鈴殼中Bt蛋白的含量呈先上升后下降的趨勢。施氮方式對鈴殼中Bt蛋白含量的影響在不同生育階段有所不同。隨著氮肥前移，膨大期和充實期鈴殼中Bt蛋白含量呈上升趨勢(T4處理除外);而到吐絮期，鈴殼中Bt蛋白含量呈下降趨勢。在膨大期，T2、T3和T4比T1處理的鈴殼Bt蛋白含量分別增加79.73%、156.53%和37.16%。在吐絮期，T1、T2和 T3比T4處理的鈴殼Bt蛋白含量分別增加89.50%、77.01%和76.37%。方差分析表明，在膨大期，T3處理鈴殼中Bt蛋白含量極顯著高于T1和T4處理;在充實期，T2和T3處理鈴殼中Bt蛋白含量極顯著高于T4和T1處理;至吐絮期，T4處理的Bt蛋白含量極顯著低于其余3個處理。

圖3 施氮方式對棉鈴鈴殼Bt蛋白含量的影響Fig.3 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in boll hull of transgenic cotton

2009—2010年試驗結果趨勢一致，本文采用了2010年數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)采用DPS 6.55進行平均值和標準差運算，所有數(shù)據(jù)均為3次重復平均值，并采用最小顯著差異法(LSD)進行差異顯著性檢驗。

伸長期的棉纖維是棉鈴蟲主要取食對象，此期Bt蛋白的含量對抗蟲性有一定影響;而成熟期的棉纖維中Bt蛋白成為殘留物。從圖4可以看出，隨著棉纖維的生長發(fā)育，其中的Bt蛋白含量總體呈下降的趨勢，至成熟期，Bt蛋白的含量極低。施氮方式對棉纖維中Bt蛋白含量的影響在不同生育階段有所不同。隨著氮肥前移，棉纖維伸長期的Bt蛋白含量呈上升趨勢，至成熟期時，Bt蛋白含量呈下降的趨勢。在伸長期，T2、T3和T4比T1處理的棉纖維Bt蛋白含量分別增加87.53%、96.96%和109.84%;至吐絮期，T2、T3和T4比T1處理的棉纖維Bt蛋白含量分別下降23.94%、26.85%和52.51%。方差分析表明，在伸長期，T1處理纖維中Bt蛋白表達量極顯著低于其余3個處理;在加厚期，T3處理纖維中Bt蛋白含量極顯著高于T4和T1處理;在成熟期，T1處理Bt蛋白的含量極顯著高于T4處理。

幼葉是棉鈴蟲主要取食對象之一，其中的Bt蛋白含量與抗蟲性能關系密切;而脫落老葉是Bt蛋白主要殘留器官之一。由圖1可見，隨著棉花葉片的生長發(fā)育，Bt蛋白的含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，在功能期時達到高峰，在衰老期和脫落期均呈現(xiàn)下降趨勢。施氮方式對葉片中Bt蛋白含量有明顯的影響。隨著氮肥前移，展開期的葉片Bt蛋白含量有升高趨勢，而衰老期和脫落期葉片Bt蛋白含量有降低的趨勢。在展開期，T2、T3和T4比T1處理的葉片Bt蛋白含量分別增加339.18%、375.71%和651.42%。在脫落期，T2、T3和T4比T1處理的葉片Bt蛋白含量分別減少32.25%、56.14%和58.22%。方差分析表明，在葉片展開期，T4處理的Bt蛋白含量與其余3個處理的差異達到極顯著水平;在葉片脫落期，T1處理的Bt蛋白殘留量與其余3個處理的差異達到極顯著水平。因此說，氮肥前移可以達到增加幼葉中Bt蛋白含量，減少老葉中Bt蛋白含量的目的。

圖4 施氮方式對轉基因抗蟲棉棉纖維Bt蛋白含量的影響Fig.4 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in fiber of transgenic cotton

2.3.3 施氮方式對抗蟲棉棉子Bt蛋白含量的影響

成本管理是一門花錢的藝術，如何將每一分錢花得恰到好處、將企業(yè)每一種資源用到最需要它的地方，是企業(yè)在新的商業(yè)時代共同面臨的難題。麥肯錫曾這樣評價中國企業(yè)：成本優(yōu)勢的巨人，卻是成本管理上的侏儒。企業(yè)尚且如此，更何況中國的公立醫(yī)院，不少院長甚至連財務報表都看不懂，何談成本管理？

圖5 施氮方式對轉基因抗蟲棉棉子Bt蛋白含量的影響Fig.5 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in seed of transgenic cotton

2.4 不同施氮方式下棉花Bt蛋白含量的比較

設置 4 個施氮方式(基肥:花鈴肥:蓋頂肥)處理，分別是:T1(0∶0.4∶0.6)，T2(0.2∶0.4∶0.4)，T3(0.4∶0.4∶0.2)，T4(0.6∶0.4∶0)。氮肥采用尿素，施氮總量為300 kg/hm2。隨機區(qū)組設計，重復3次。每小區(qū)為7行，行寬1.2 m，行長9.0 m，小區(qū)面積為75.6 m2。供試品種為中棉所72，為轉Bt+CpTI基因的抗蟲雜交棉，由中國農業(yè)科學院棉花研究所提供。兩年均在4月20日地膜覆蓋直播，密度37500株/hm2。

棉鈴蟲主要取食棉花幼嫩器官，這些器官中Bt蛋白含量與抗蟲性能關系密切。從表1可以看出，不同施氮方式對棉花幼嫩器官中Bt蛋白含量有明顯影響。隨著氮肥前移，幼嫩器官中Bt蛋白含量呈明顯增加的趨勢(T4處理的鈴殼和棉子除外)。例如，T2比T1處理的葉片、棉蕾和鈴殼、棉纖維、棉子中Bt蛋白含量分別增加 4.49、1.19、1.80、1.88、1.70 倍。不同施氮方式對葉片 Bt蛋白含量的影響更為明顯，T2、T3、T4 分別比 T1處理增加4.49、4.76和7.51倍。說明氮素適度的前移有利于提高抗蟲棉各器官的抗蟲性能，尤其是葉片。

表1 不同施氮方式下棉花幼嫩器官中Bt蛋白含量的比值Table 1 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in young cotton organs under different nitrogen fertilizer methods

2.4.2 不同施氮方式下棉花老熟器官Bt蛋白含量的比較

2.3.1 施氮方式對棉鈴鈴殼中Bt蛋白含量的影響

創(chuàng)造性叛逆指的是變異文學的一種變異形式，在文學作品翻譯中的創(chuàng)造性翻譯，不僅包括不同的語言形式以及句式結構的多重變化，也包括在文化層面的信息量的多樣變化。在文學作品的翻譯過程中，創(chuàng)造性叛逆不僅包括減詞法、增詞法、省略等，還包括闡釋法，而翻譯本身就具有闡釋特性，是一種跨文化闡釋的交際行為，既有語言轉換功能，也有著跨文化意義上的闡釋功能，這一特點更適合于對文學作品與理論著作的翻譯。然而，闡釋法并不是萬能的，在運用闡釋法所譯出的譯文也會有不準確的情況出現(xiàn)。因此，在翻譯《孟子》的過程中必須要合理使用創(chuàng)造性叛逆闡釋論，保證翻譯文本的準確性。

Bt蛋白主要殘留在棉花的老熟器官中。從表2可以看出，施氮方式對棉花老熟器官中Bt蛋白含量有明顯影響。隨著氮肥前移，老熟器官中Bt蛋白含量呈明顯降低的趨勢。例如，T3比T1處理的葉片、鈴殼、棉纖維和棉子中Bt蛋白含量分別減少56%、7%、27%和28%。說明氮素適度的前移有利于減少棉花老熟器官的Bt蛋白含量。

表2 不同施氮方式下棉花老熟器官中Bt蛋白含量的比值Table 2 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in overripe cotton organs under different nitrogen fertilizer methods

2.5 施氮方式對棉花產量的影響

從表3可以看出，施氮方式對棉花產量有明顯影響。隨著施氮前移，棉花總成鈴數(shù)和鈴重以及籽棉和皮棉產量有先增加趨勢，T3處理達到最高，至T4處理又有所下降。其中，T2處理比T1處理的總成鈴數(shù)、鈴重和籽棉、皮棉產量分別增加4.72%、1.90%和6.80%、7.99%。T3處理比T1處理的總成鈴數(shù)、鈴重和籽棉、皮棉產量分別增加7.97%、2.94%和11.24%、12.01%。T4處理比 T1處理的總成鈴數(shù)、鈴重和籽棉、皮棉產量分別增加2.90%、2.42%和5.47%、6.02%。方差分析表明，T3處理的總成鈴數(shù)和籽棉產量顯著的高于其它3個處理，其鈴重顯著高于T1處理，皮棉產量顯著高于T1和T4處理。說明從產量上看，氮肥前移或后移均不利于提高產量，底肥∶花鈴肥∶蓋頂肥為 0.4∶0.4∶0.2 有利于棉花高產。

表3 施氮方式對對抗蟲棉產量及產量構成的影響Table 3 Effects of nitrogen fertilizer methods on yield and its components of transgenic cotton

3 結論與討論

3.1 棉花不同器官Bt蛋白含量的比較

眾多研究表明，抗蟲棉不同器官中的Bt毒蛋白含量存在著明顯的差異。王保民等［12］和沈平等［13］報道，葉片中的Bt毒蛋白含量遠遠高于蕾、花、鈴。張永軍等［14］報道，不同器官殺蟲蛋白表達量順序為葉＞鈴、花心、花萼、蕾＞花瓣＞苞葉。本研究著重比較了抗蟲棉幼嫩器官中Bt毒蛋白含量，結果表明，幼嫩器官的Bt蛋白含量總體表現(xiàn)為棉纖維＞葉片＞棉殼、蕾＞棉子(表4)，與前人研究結果基本一致。在棉鈴膨大期，纖維的Bt蛋白含量最高，這對毒殺蛀食棉鈴的棉鈴蟲較為有利;幼葉中Bt蛋白含量較高，也有利于棉鈴蟲的防治。

他家有一塊地在對面的山巔之上。那里有著整條溝最深厚的黑土，光照時間充足，狗娃的父親和兵子之前在那片地里種過黃豆和芝麻，收成很不錯。但是，上山的路崎嶇而陡峭，爬到山巔要耽誤個把時辰的工夫。狗娃和兵子每次上山之前，都要帶上一天的干糧和水，一直在地里勞作到太陽西下才下山回家。

表4 棉花不同幼嫩器官中Bt蛋白含量的比值Table 4 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in different young cotton organs

抗蟲棉葉片、脫落的蕾鈴以及收獲的絮鈴是Bt蛋白的主要殘留器官，它們一部分在生育期間直接掉落土壤，其中殘留的Bt蛋白對環(huán)境可能形成污染，一部分作為收獲產品，其中殘留的Bt蛋白對人畜健康可能存在潛在風險。目前，對抗蟲棉老熟器官的Bt蛋白含量研究較少。張順等［7］研究了施氮量對棉花老熟器官Bt蛋白含量的影響，結果表明，棉子中Bt蛋白含量最大。本研究表明，棉花老熟器官中Bt蛋白的含量表現(xiàn)為棉子＞葉片＞鈴殼＞棉纖維。不同施氮方式處理下棉花成熟棉子中Bt蛋白含量達737.67—1158.66 ng/g(圖5)，是老熟葉片的 15.90—22.35 倍，是成熟鈴殼的 30.50—47.48 倍，是成熟棉纖維的 48.49—68.37 倍(表 5)。盡管目前研究表明，棉子中Bt蛋白對食品生產無明顯影響［15-17］，但仍缺少長期研究結果。因此，應進一步加強對抗蟲棉棉子用于食品生產的安全性研究，以消除消費者的疑慮。本研究還表明，棉纖維中Bt蛋白殘留量僅有10.79—22.72 ng/g(圖 4)，對人類衣著較為安全。

表5 棉花不同老熟器官中Bt蛋白含量的比值Table 5 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in different overripe cotton organs

3.2 施氮方式與棉花器官Bt蛋白含量

目前，施氮方式對抗蟲棉器官Bt蛋白表達和殘留的影響鮮有報道。本研究表明，施氮方式對棉花幼嫩和老熟器官中Bt蛋白含量均有明顯影響。總體表現(xiàn)為隨著氮肥前移，幼嫩器官中Bt蛋白含量呈明顯增加的趨勢，尤其是對葉片Bt蛋白含量影響更為明顯。隨著氮肥前移，棉花老熟器官中Bt蛋白含量則呈明顯降低的趨勢。說明氮肥適度前移有利于減少棉花老熟器官的Bt蛋白含量。本研究還表明，施氮方式對幼嫩器官中Bt蛋白含量的影響大于對老熟器官中Bt蛋白含量的影響。因此說，種植抗蟲棉時，可通過氮肥適度前移，一方面，增加幼嫩器官中Bt蛋白含量，提高棉花的抗蟲性能;另一方面，降低老熟器官中的Bt蛋白含量，減少對生態(tài)環(huán)境和人畜健康的潛在風險，緩解消費者對轉基因產品安全性的擔憂。

3.3 施氮方式與棉花產量

氮素運籌是調控作物生長發(fā)育的重要途徑［18］。馬宗斌等［19］在黃河流域進行棉花盆栽試驗，設3個氮肥基施和追施比例(分別是2∶1、1∶1和 1∶2)。結果表明，基追比為 1∶2處理的皮棉產量分別比 1∶1和 2∶1處理增加3.66%和7.33%。Yang等［20］在長江流域試驗將常規(guī)的施氮方法(氮肥300 kg/hm2，基肥∶開花期∶盛花期為30%∶40%∶30%)改變?yōu)槭┑?25 kg/hm2，基肥∶開花期∶盛花期為0%∶40%∶60%。結果表明，后者可提高棉花生物量、收獲指數(shù)和產量。本研究表明，棉花施氮量為300 kg/hm2，采用基肥∶花鈴肥∶蓋頂肥為0.4∶0.4∶0.2的施氮方式可獲得最高產量，比其余3種施氮方式的籽棉產量和皮棉產量分別增加4.15%—11.24%和3.73%—12.01%。這一結果與馬宗斌等［19］在黃河流域的試驗結果接近，但與Yang等［20］在長江流域的試驗結果不同，可能原因是長江流域較黃河流域生育期長，棉花生長期間溫度高、雨量大，氮肥適當后移有利于提高產量，而在黃河流域棉區(qū)，氮肥后移可能會造成棉花減產，同時，還有可能減少幼嫩器官中Bt蛋白含量，降低棉花的抗蟲性能，另一方面，提高老熟器官中Bt蛋白含量，增加對生態(tài)環(huán)境和人畜健康的風險。

［1］James C.Global status of commercialized biotech/GM crops:2011.ISAAA Brief No.43.ISAAA:Ithaca，NY，USA，2011.

［2］Wu K M，Lu Y H，F(xiàn)eng H Q，Jiang Y Y，Zhao J Z.Suppression of cotton bollworm in multiple crops in China in areas with Bt toxin-containing cotton.Science，2008，321(5896):1676-1678.

［3］Liu C X，Li Y H，Gao Y L，Ning CM，Wu K M.Cotton bollworm resistance to Bt transgenic cotton:a case analysis.Science China:Life Science，2010，53(8):934-941.

［4］Lu Y H，Wu K M，Jiang Y Y，Guo Y Y，Nicolas D.Widespread adoption of Bt cotton and insecticide decrease promotes biocontrol services.Nature，2012，487(7407):362-365.

［5］Xue X P，Wang J G，Guo WQ，Chen B L，You J，Zhou Z G.Effect of nitrogen applied levels on the dynamics of biomass，nitrogen accumulation and nitrogen fertilization recovery rate of cotton after initial flowering.Acta Ecologica Sinica，2006，26(11):3631-3640.

［6］Dong H Z，Li W J，Eneji A E，Zhang D M.Nitrogen rate and plant density effects on yield and late-season leaf senescence of cotton raised on a saline field.Field Crops Research，2012，126:137-144.

［7］Zhang X，Zhang L，Ye GY，Wang Y H，Chen Y，Chen D H.The impact of introducing the Bacillusthuringiensis gene into cotton on boll nitrogen metabolism.Environmental and Experimental Botany，2007，61(2):175-180.

［8］Chen D H，Ye GY，Yang CQ，Chen Y，Wu Y K.Effect of introducing Bacillusthuringiensis gene on nitrogen metabolism in cotton.Field Crops Research，2005，92(1):1-9.

［9］Zhang S，Chen G，F(xiàn)ang WP，Ma Z B，Xie D Y，Li L L，Zhu W.Effects of nitrogen fertilizer rates on expression and degradation of Bt-protein in transgenic cotton.Acta Agriculturae Boreali-Sinica，2011，26(6):148-153.

［10］Dai J L，Dong H Z，Duan L S，Li Z H，Lu H Q.Effects of nitrogen fertilizer on Bt cotton growth and Bt protein concentration in leaves under salinity stress.Cotton Science，2012，24(4):303-311.

［11］He Z P.Experimental Guide on Chemical Control in Crops.Beijing:Beijing Agricultural University Press，1993:60-68.

［12］Wang B M，Li Z H，Li B，Tian X L，Duan L S，Zhai Z X，He Z P.Content and expression of Bacillus thuringiensis insecticidal protein in transgenic cotton.Journal of Agricultural Biotechnology，2002，10(3):215-219.

［13］Shen P，Lin K J，Zhang Y J，Wu K M，Guo Y Y.Seasonal expression of Bacillus thuringiensis insecticidal protein and the control to cotton bollworm in different varieties of transgenic cotton.Cotton Science，2010，22(5):393-397.

［14］Zhang Y J，Wu K M，Guo Y Y.On the spatio-temporal expression of the contents of Bt insecticidal protein and the resistance of Bt transgenic cotton to cotton bollworm.Acta Phytophylacica Sinica，2001，28(1):1-6.

［15］Shen F F，Han X L，F(xiàn)an SL.Changes in microbial flora and bacterial physiological group diversity in rhizosphere soil of transgenic Bt cotton.Acta Ecologica Sinica，2004，24(3):432-437.

［16］Li X G，Liu B，Cui J J，Liu D D，Ding S，Gilna B，Luo J Y，F(xiàn)ang Z X，Cao W，Han Z M.No evidence of persistent effects of continuously planted transgenic insect-resistant cotton on soil microorganisms.Plant and Soil，2011，339(1/2):247-257.

［17］Jiang L J，Tian X L，Duan L S，Li Z H.The fate of Cry1Ac Bt toxin during oyster mushroom(Pleurotus ostreatus)cultivation on transgenic Bt cottonseed hulls.Journal of the Science of Food and Agriculture，2008，88(2):214-217.

［18］Ma Z B，Xiong S P，He J G，Ma X M.Effects of nitrogen forms on rhizosphere microorganisms and soil enzyme activity under cultivation of contrasting wheat cultivars during booting and grain filling period.Acta Ecologica Sinica，2008，28(4):1544-1551.

［19］Ma Z B，F(xiàn)ang W P，Xie D Y，Li L L，Zhu W.Effects of different ratios of base and topdressing nitrogen fertilizer on the leaf senescence and yield of insect-resistant hybrid cotton.Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica，2008，28(10):2062-2066.

［20］Yang G Z，Tang H Y，Nie Y C，Zhang X L.Responses of cotton growth，yield，and biomass to nitrogen split application ratio.European Journal of Agronomy，2011，35(3):164-170.

參考文獻:

［3］劉晨曦，李云河，高玉林，寧長明，吳孔明.棉鈴蟲對轉Bt基因抗蟲棉花的抗性機制及治理.中國科學:生命科學，2010，40(10):920-928.

［5］薛曉萍，王建國，郭文琦，陳兵林，尤軍，周治國.氮素水平對初花后棉株生物量、氮素累積特征及氮素利用率動態(tài)變化的影響.生態(tài)學報，2006，26(11):3631-3640.

［9］張順，陳剛，房衛(wèi)平，馬宗斌，謝德意，李伶俐，朱偉.施氮量對抗蟲棉Bt蛋白表達和降解的影響.華北農學報，2011，26(6):148-153.

［10］代建龍，董合忠，段留生，李振懷，盧合全.施氮肥對鹽脅迫下Bt棉生長和葉片Bt蛋白含量的影響.棉花學報，2012，24(4):303-311.

［11］何鐘佩.農作物化學控制實驗指導.北京:北京農業(yè)大學出版社，1993:60-68.

［12］王保民，李召虎，李斌，田曉莉，段留生，翟志席，何鐘佩.轉Bt抗蟲棉各器官毒蛋白的含量及表達.農業(yè)生物技術學報，2002，10(3):215-219.

［13］沈平，林克劍，張永軍，吳孔明，郭予元.轉Bt基因棉不同品種殺蟲蛋白季節(jié)性表達及其對棉鈴蟲的控制作用.棉花學報，2010，22(5):393-397.

［14］張永軍，吳孔明，郭予元.轉Bt基因棉花殺蟲蛋白含量的時空表達及對棉鈴蟲的毒殺效果.植物保護學報，200l，28(1):1-6.

［15］沈法富，韓秀蘭，范術麗.轉Bt基因抗蟲棉根際微生物區(qū)系和細菌生理群多樣性的變化.生態(tài)學報，2004，24(3):432-437.

［18］馬宗斌，熊淑萍，何建國，馬新明.氮素形態(tài)對專用小麥中后期根際土壤微生物和酶活性的影響.生態(tài)學報，2008，28(4):1544-1551.

［19］馬宗斌，房衛(wèi)平，謝德意，李伶俐，朱偉.氮肥基追比對抗蟲雜交棉葉片衰老和產量的影響.西北植物學報，2008，28(10):2062-2066.