李 毅

（四川省達州市通川區(qū)動物疫病預防控制中心，四川 達州 635000）

動物群體免疫抗體水平監(jiān)測是動物防疫工作體系中的一個重要組成部分，可以有效評價動物群體免疫效果、提高免疫質(zhì)量、建立免疫抗體屏障、消除疫情隱患。目前很多中小規(guī)模養(yǎng)殖場在開展抗體監(jiān)測及分析時，對結果分析只停留在動物群體合格率是否達到70%的層次上，單用免疫抗體合格率這一個指標來考量規(guī)模養(yǎng)殖場的抗體水平存在一定的片面性，無法跟上產(chǎn)業(yè)發(fā)展形勢。因此，用免疫抗體滴度平均值分析技術評價規(guī)模養(yǎng)殖場的免疫質(zhì)量、監(jiān)測抗體水平，更具科學性和指導性。

1 材料與方法

1.1 材料 為了評估本地某中型規(guī)模豬場豬瘟疫苗的免疫效果，我們在2012年5月和10月分別采集了2批血清樣品，根據(jù)農(nóng)業(yè)部2007年印發(fā)的《豬瘟防治技術規(guī)范》，用正向間接血凝試驗進行抗體水平檢測，結果以1∶2、1∶4、1∶8、1∶x 滴度表示。如表 1、表 2 所示。

1.2 方法

1.2.1 抗體滴度平均值及區(qū)間估計 本文計算采用編碼滴度法。通常情況下，血清抗體滴度成偏態(tài)分布，只有在經(jīng)過對數(shù)轉換后才能按正態(tài)分布的統(tǒng)計學方法進行檢驗。所以計算時可以轉換為以2為底的對數(shù)值（編碼滴度），然后以此計算幾何平均值。所用公式如下：

編碼滴度算術平均數(shù)：μa=∑fx/∑f

表1 某規(guī)模場5月采集的血清樣品

表2 某規(guī)模場10月采集的血清樣品

對數(shù)幾何平均數(shù)滴度：μb=μa×log2

幾何平均滴度：[GMT（X）]=lg-1μb×C

編碼滴度方差：S2=（∑fx2-（∑fx）2/n）/（n-1）

幾何平均滴度標準誤：Sx′=lg-1（Sx×log2）

幾何平均滴度 95%可信限：（（μb-1.96×Sx）×C，（μb+1.96×Sx）×C），C 表示稀釋倍數(shù)。

1.2.2 兩批樣本群抗體滴度比較 隨機抽取的兩批血清樣本，比較抗體差別時常用t檢驗或x2檢驗。本文采用t檢驗。計算公式如下：

合并標準差：Sc2=∑fx2-（∑fx）2/∑f

其中，S（μ1-μ2）表示兩個樣本平均數(shù)差異的標準誤，μ表示編碼滴度算術平均數(shù)，n表示樣本容量。

2 結果與分析

2.1 計算結果 計算結果如表3所示。

2.2 分析 經(jīng)t檢驗計算，t值為1.125 4，自由度為162，查表得出P>0.05。表明兩批血清樣本的抗體滴度幾何平均值無顯著性差異。兩批血清樣品的編碼滴度變異系數(shù)分別為21.66%和22.22%，說明兩批血清樣品的抗體滴度值的離散程度相近。

根據(jù)《豬瘟防治技術規(guī)范》，豬瘟抗體正向間接血凝試驗效價大于或等于1∶32時判定為合格，該豬場兩批血清的抗體合格率分別為80.3%和74.7%。從百分率上看10月份有所下降，但結合抗體滴度幾何平均值分析，在抽樣設計科學合理的前提下，二者并無顯著性差異。

表3 兩批血清樣品的計算結果

3 討論

3.1 目前規(guī)模養(yǎng)殖場對豬瘟、O型口蹄疫、高致病性禽流感等重大動物疫病疫苗免疫抗體效果的監(jiān)測，主要是以農(nóng)業(yè)部2007年頒布的相關防治技術規(guī)范為依據(jù)，正向間接血凝試驗和血凝抑制試驗的檢測結果均是以1∶x的抗體滴度表示。監(jiān)測指標主要是免疫抗體合格率，以其是否達到70%為評判標準。在此基礎上，本文計算了規(guī)模養(yǎng)殖場動物群體免疫抗體滴度的幾何平均值，并進行了95%置信度區(qū)間估計及兩獨立樣本群的t檢驗，多方面分析了該場的群體抗體水平。

3.2 通過抗體滴度幾何平均值計算及比較，能幫助分析抗體水平隨時間、空間變化的消長趨勢，評價免疫程序科學性，規(guī)范免疫操作，研究飼養(yǎng)管理等外部條件對免疫效果的影響等。通過對某一動物群體不同時刻或不同群體同一時刻的血清抗體水平進行比較，能夠減少單一評判指標對分析結果的不利影響，有利于開展疫苗免疫查漏補缺工作，制訂出更加科學合理的免疫程序。

3.3 如果對規(guī)模養(yǎng)殖場動物群體長期開展血清抗體監(jiān)測，記錄其抗體滴度幾何平均值，一段時間以后，就可以確定一個規(guī)模場或地區(qū)的“正常”或預期抗體水平，從而初步確立一條抗體水平監(jiān)測基線。長期有規(guī)律地監(jiān)測并分析檢測數(shù)據(jù)的變化趨勢，有助于提高規(guī)模養(yǎng)殖場的管理水平和生物安全水平，不斷改進防疫工作措施。

3.4 當然，免疫監(jiān)測工作的高質(zhì)量與科學合理的抽樣設計是分不開的，抗體滴度幾何平均值能夠真實反映動物群體抗體水平的前提是樣品具有真實性、代表性。因此，確保抽樣設計的科學合理是統(tǒng)計分析成功的先決條件。綜上所述，規(guī)模場開展動物群體抗體滴度幾何平均值分析，對于動物疫病監(jiān)測和流行病學調(diào)查，提高規(guī)模場管理水平等具有積極的意義。

[1]黃保續(xù).獸醫(yī)流行病學[M].1版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2010：249-252.

[2]范書才，李 虹，史大慶，等.鴨瘟滅活疫苗效力試驗和安全試驗[J].中國預防獸醫(yī)學報，2009，31（7）：553-556.