聶 健，詹素瓊，梁 歌，李金良，袁定勝，李旭廷

（四川省畜牧科學研究院獸藥研究所，四川 成都 610066）

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物 6周齡昆明小鼠80只，體重19~21g，雌性，購自成都某生物科技有限公司。

1.1.2 藥品 注射用環(huán)磷酰胺（Cy），規(guī)格：0.2g/支，通化某制藥有限公司生產，批號：100101；玉屏風口服液，規(guī)格：10 mL/支，廣州某藥業(yè)股份有限公司生產，批號：100302；黃芪多糖提取物，規(guī)格：95.5%黃芪多糖，由四川某動物藥業(yè)有限責任公司提供。

當歸補血湯制備：黃芪75g、當歸15g，采用傳統(tǒng)水煎法制備：蒸餾水預先浸泡1h，加熱煎煮2次，第一次保持微沸30min，濾出藥液；藥渣加溫水再煮沸，仍保持微沸30min，濾出藥液；合并2次濾液，小火濃縮至生藥含量為1g/mL。

1.2 方法

1.2.1 試驗小鼠的分組與處理 80只小鼠空腹稱重，隨機分為8組，每組10只。第1至4組為正常組，即第1組不作任何處理，作為空白對照組，第2至4組分別給予黃芪多糖（2組）、當歸補血湯（3組）和玉屏風（4組）；第5至8組為免疫抑制組，即第5組只注射Cy不給予藥物，作為環(huán)磷酰胺對照組，第6至8組在注射Cy的同時分別給予黃芪多糖（6組）、當歸補血湯（7組）和玉屏風（8組）進行處理。從試驗的第1d起，第6至8組小鼠以75mg/kg的劑量腹腔注射Cy，隔日一次，連續(xù)注射3次；第1至4組同時注射等量生理鹽水。然后對小鼠灌胃給藥，0.5mL/只，對照組給予等量的蒸餾水，連續(xù)10d。

1.2.2 樣品的采集與檢測 各組小鼠均于試驗的第11 d以頸部脫臼處死，快速采血，肝素抗凝，檢測血常規(guī)：白細胞計數(shù)（WBC）、紅細胞計數(shù)（RBC）、平均血紅蛋白含量（HGB）、血小板計數(shù)（PLT）。取脾臟和肝臟，觀察病理變化，計算肝、脾指數(shù)。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 所有試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進行分析處理，LSD比較差異顯著性，所有數(shù)據(jù)用“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果

2.1 藥物對小鼠精神狀態(tài)的影響 所有灌胃小鼠，包括灌生理鹽水的空白對照小鼠，在注射和灌藥開始的3 d內，飲水量和采食量均有減少，3d以后逐步恢復到正常水平。所有試驗組小鼠在整個試驗期內未見明顯的精神異常。

2.2 中藥對小鼠血液學指標的影響 各組小鼠的血常規(guī)結果見表1。從表1可看出，第1至4組的WBC、RBC、HGB、PLT 值差異不顯著（P＞0.05），表明正常小鼠服用黃芪多糖、當歸補血湯和玉屏風口服液對血液學指標沒有顯著影響。第6至8組小鼠腹腔注射Cy后，血液學指標WBC、RBC、HGB、PLT與空白對照組相比顯著下降，差異顯著（P＜0.05），表明 Cy注射后可導致 WBC、RBC、HGB、PLT指標顯著降低。第6組、8組的WBC、HGB指標與環(huán)磷酰胺對照組（第5組）相比，差異不顯著（P＞0.05），但對WBC指標有一定的提升。第7組的WBC、HGB 指標與第 5組相比升高顯著（P＜0.05），與第1組相比差異顯著（P＜0.05）。表明當歸補血湯對Cy注射小組的WBC和HGB指標有較好的恢復作用，但不能恢復到正常水平。第6、7、8組的RBC指標與第5組相比顯著升高（P＜0.05），PLT 指標差異不顯著（P＞0.05）。

表1 當歸補血湯對小鼠血液學指標的影響（n=10）

2.3 中藥方劑對小鼠體重及肝、脾指數(shù)的影響 由表2可知，黃芪多糖、當歸補血湯和玉屏風口服液對正常小鼠和免疫抑制小鼠均無明顯的促生長作用（P＞0.05），各免疫抑制組與各正常組相比，試驗末體重明顯降低，差異顯著（P＜0.05）。第6、7、8組與第5組的增重率相比差異顯著（P＜0.05）。表明黃芪多糖、當歸補血湯和玉屏風口服液對Cy造成的小鼠增重減少有較顯著的拮抗作用，但不能恢復到正常水平。各正常組與第5組的脾臟指數(shù)、肝臟指數(shù)相比差異顯著（P＜0.05），各正常組之間差異不顯著（P＞0.05），表明Cy可引起小鼠的肝、脾指數(shù)異常，而3個受試中藥對正常小鼠的肝、脾指數(shù)無明顯影響。6、8組的脾臟指數(shù)與5組相比，差異不顯著（P＞0.05），7組與5組相比，差異顯著（P＜0.05），與1組比較差異不顯著（P＞0.05）。表明當歸補血湯可使Cy造成的小鼠脾臟萎縮恢復到正常水平。6、7、8組的肝臟指數(shù)與5組相比，差異不顯著（P＞0.05），表明3個受試中藥對Cy造成的小鼠肝臟腫大無恢復作用。

表2 當歸補血湯對試驗小鼠體重和肝、脾指數(shù)的影響（n=10）

3 結論

3.1 黃芪多糖、當歸補血湯和玉屏風口服液對正常小鼠的血液學指標（WBC、RBC、HGB、PLT）及肝、脾指數(shù)沒有顯著影響，但對環(huán)磷酰胺造模小鼠的血液學指標有一定程度的恢復作用，其中當歸補血湯效果優(yōu)于黃芪多糖和玉屏風口服液，但均未能使WBC、RBC、HGB、PLT值回到正常水平。

3.2 黃芪多糖、當歸補血湯和玉屏風口服液對環(huán)磷酰胺造成的小鼠增重減少和脾臟萎縮有明顯的拮抗作用；當歸補血湯可將脾臟的損傷恢復到正常水平，但黃芪多糖、當歸補血湯和玉屏風口服液均不能將體重的增加恢復到正常水平，且對肝臟腫大無明顯的拮抗作用。

3.3 當歸補血湯作為傳統(tǒng)治療“氣血兩虛”的經典中藥方劑，在臨床中有著豐富的應用成果。給予當歸補血湯處理后，可明顯提高造模小鼠的白細胞、紅細胞生成，提高血紅蛋白含量，與當歸補血湯在其他實驗動物體內的研究結果相同。對生長性能的影響方面，當歸補血湯對環(huán)磷酰胺所致小鼠的增重率與環(huán)磷酰胺空白對照組相比，有顯著的提高（P＜0.05），但不能恢復到正常水平，符合我們之前報道的在家兔方面的研究結果。

4.3 中獸醫(yī)學認為，脾為“后天之本”，是機體氣血生化之源，肝藏血主疏泄，二者均是水谷消化吸收的主要器官。病理損傷必然會造成水谷得不到充分的消化吸收和運輸，血液化生沒有來源，就會出現(xiàn)精神短少、貧血，影響發(fā)育。本試驗觀察到當歸補血湯對免疫抑制小鼠的脾臟損害有較好的恢復作用，從病理的角度印證了中醫(yī)學的這一理論。

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