廖矛川，熊姝穎，楊芳云，葛嵐嵐

(中南民族大學(xué) 藥學(xué)院，武漢430074)

皺皮木瓜為薔薇科木瓜屬植物貼梗海棠［Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai］的近成熟果實(shí)，為一種常用的中藥，含有糖類，揮發(fā)油類，黃酮類，萜類，有機(jī)酸類，氨基酸等成分［1-4］，具有舒肝和胃、祛風(fēng)順氣、祛濕止痛之功效，用于胸悶不適，風(fēng)濕筋骨疼痛，止吐，止瀉［5］.

目前木瓜的研究多從農(nóng)林業(yè)的角度研究其中的營養(yǎng)成分，藥用研究僅集中在有機(jī)酸、黃酮等少數(shù)幾種化學(xué)成分，研究的木瓜品種較混亂，易混淆.本實(shí)驗(yàn)的皺皮木瓜產(chǎn)自全國最早的木瓜GAP種植基地湖北長陽縣［6］，資丘木瓜已成為道地藥材.采用系統(tǒng)的提取分離方法，研究不同結(jié)構(gòu)種類的化學(xué)成分，從氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取部分共分離得到5個(gè)化合物，經(jīng)過鑒定確定了結(jié)構(gòu)，分別是齊墩果酸(化合物Ⅰ)，胡蘿卜苷(化合物Ⅱ)，β-谷甾醇(化合物Ⅲ)，咖啡酸(化合物Ⅳ)，咖啡酸正丁酯(化合物Ⅴ).其中化合物Ⅴ是首次從本種植物中發(fā)現(xiàn).

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

皺皮木瓜購買自湖北長陽土家族自治縣，經(jīng)中南民族大學(xué)藥學(xué)院萬定榮教授鑒定為Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的果實(shí).

核磁共振波譜儀(TMS內(nèi)標(biāo)，德國BrukerAM-400)，中壓柱層析系統(tǒng)(HEP-50A型，武漢金帝)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(RE-52型)，高效液相色譜儀(Ultimate-3000半制備型，美國Dionex公司)，電子天平(精度0.1mg，AR2140型，上海奧豪斯儀器有限公司)，提取罐、濃縮罐(武漢市江漢醫(yī)療制藥設(shè)備有限公司)，循環(huán)水真空泵(SHZ-Ⅲ型，上海亞榮生化儀器)，電熱鼓風(fēng)干燥箱(101-0AB型，天津市泰斯特)，實(shí)驗(yàn)試劑為分析純(天津博迪有限公司)，硅膠(柱層析用，200-300目，青島海洋化工廠分廠)，氘代氯仿、氘代甲醇(J ＆ K CHEMICAL LTD).

圖1 化合物Ⅰ-Ⅴ的結(jié)構(gòu)Fig.1 Structures of compound I～V

1.2 提取分離

皺皮木瓜干燥果實(shí)約20 kg，粉碎過篩，90%乙醇回流提取3次，每次3 h，得提取液.減壓濃縮回收乙醇，得浸膏6123 g.浸膏用等質(zhì)量的蒸餾水溶解分散得混懸液，分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取.將氯仿部分的萃取物過正相硅膠(200～300目)，環(huán)己烷-乙酸乙酯梯度洗脫(體積比分別為15︰1，9︰1，4︰1，7︰3，3︰2，1︰1，2︰3，1︰4)分離后的流分，經(jīng)離心沉淀得化合物I(1.32 g);將乙酸乙酯部分的萃取物用大孔樹脂D101，乙醇-水梯度洗脫(體積比分別為1︰9，3︰7，1︰1，7︰3，9︰1)，再經(jīng)過正相硅膠色譜，二氯甲烷-丙酮梯度洗脫(體積比分別為15︰1，12︰1，10︰1，8︰1，4︰1，2︰1，1︰1)分離，離心過濾后得化合物II(455.9 mg)和化合物 III(157.8 mg)，提取物經(jīng)半制備高效液相，甲醇-水梯度洗脫，分離得化合物IV(6.3 mg);將正丁醇部分經(jīng)大孔樹脂D101，乙醇-水梯度洗脫(體積比分別為1︰9，3︰7，1︰1，7︰3，9︰1)，經(jīng)過葡聚糖凝膠LH-20分離，再經(jīng)過高效液相色譜分離得化合物V(9.4 mg).

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 I:白色粉末(氯仿).EI-MS m/z:456［M］+.分子式 C30H48O3，分子量為 456.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ:5.27(1H，brs，H-12)，3.20(1H，dd，J=11.2，4.8Hz，H-3)，1.13(3H，s，H-27)，0.99(3H，s，H-25)，0.93(3H，s，H-30)，0.91(3H，s，H-29)，0.90(3H，s，H-24)，0.77(3H，s，H-23)，0.75(3H，s，H-26).13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:183.6(C-28)，143.6(C-13)，122.6(C-12)，79.0(C-3)，55.2(C-5)，47.6(C-9)，46.5(C-17)，45.9(C-19)，41.6(C-14)，40.9(C-18)，38.8(C-4)，39.3(C-8)，38.4(C-1)，33.8(C-21)，33.0(C-29)，32.4(C-7)，32.4(C-22)，30.9(C-20)，28.1(C-23)，27.7(C-15)，27.2(C-2)，25.9(C-27)，23.6(C-16)，23.3(C-11)，22.9(C-30)，18.3(C-6)，17.2(C-26)，15.5(C-24)，15.3(C-25)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7，8］報(bào)道數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為齊墩果酸.

化合物 II:白色粉末(吡啶).EI-MS m/z:414［M-Glc］+.分子式為 C35H60O6，分子量為 576.1HNMR(400MHz，C5D5N)δ:5.37(1H，d，J=3.5Hz，H-6)，5.01(1H，d，J=7.7Hz，glcH-1')，4.02(1H，m，H-3)，3.80～4.63(6H，m，glc H-2'～6')，1.07(3H，d，J=8.1Hz，H-21)，0.95(3H，s，H-19)，0.91(3H，t，J=7.7Hz，H-29)，0.89(3H，d，J=8.7Hz，H-27，26)，0.67(3H，s，H-18).13C NMR(100MHz，C5D5N)δ:142.5(C-5)，124.8(C-6)，103.9(glc C-1')，79.9(glc C-3')，79.8(C-3)，79.4(glc C-5')，76.7(C-2')，72.9(glc C-4')，64.1(glc C-6')，58.1(C-14)，57.6(C-17)，51.6(C-9)，47.3(C-24)，43.8(C-13)，38.8(C-12)，38.2(C-4)，37.7(C-10)，37.7(C-1)，35.5(C-20)，33.4(C-22)，33.3(C-25)，31.6(C-7)，30.7(C-8)，29.8(C-2)，27.7(C-16)，24.5(C-15)，26.4(C-23)，22.8(C-28)，21.3(C-11)，20.7(C-26)，20.5(C-27)，20.3(C-19)，20.3(C-21)，13.5(C-29)，13.3(C-18)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9，10］的數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為胡蘿卜苷.

化合物 III:白色粉末(氯仿).EI-MS m/z:414［M+］.分子式為 C29H50O，分子量為 414.1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ:5.35(1H，d，J=5.3Hz，H-6)，3.51(1H，m，H-3)，1.03(3H，s，H-19)，0.96(3H，d，J=8.1Hz，H-21)，0.88(3H t，J=7.8Hz，H-29)，0.83(3H，d，J=8.7Hz，H-27)，0.81(3H，d，J=8.7Hz，H-26)，0.67(3H，s，H-18).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:140.8(C-5)，121.7(C-6)，71.8(C-3)，56.8(C-14)，56.1(C-17)，50.1(C-9)，45.8(C-8)，42.3(C-4)，42.3(C-13)，39.8(C-12)，37.3(C-1)，36.5(C-10)，36.2(C-20)，33.9(C-24)，31.9(C-7)，31.9(C-29)，31.7(C-2)，29.1(C-28)，29.1(C-25)，28.3(C-16)，26.1(C-22)，24.3(C-15)，23.1(C-23)，21.9(C-11)，19.8(C-26)，19.4(C-27)，19.0(C-19)，18.7(C-21)，11.9(C-18)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］的數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為β-谷甾醇.

化合物IV:黃色結(jié)晶(丙酮).分子式為C9H8O4，分子量為 180.1H-NMR(400MHz，C3D6O)δ:7.52(1H，d，J=15.9Hz，H-7)，7.14(1H，d，J=2.0Hz，H-2)，7.02(1H，dd，J=8.2，1.9Hz，H-6)，6.85(1H，d，J=8.2Hz，H-5)，6.25(1H，d，J=15.9Hz，H-8).13C-NMR(100MHz，C3D6O)δ:67.1(C-9)，147.6(C-3)，145.3(C-4)，144.9(C-7)，126.8(C-1)，121.5(C-6)，115.4(C-8)，114.9(C-2)，114.2(C-5)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］的數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為咖啡酸.

化合物 V:棕褐色結(jié)晶(氯仿).分子式為C13H16O4，分子量為 236.1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ:7.56(1H，d，J=15.9Hz，H-7)，7.07(1H，d，J=1.9Hz，H-2)，6.98(1H，d，J=8.0Hz，H-5)，6.86(1H，dd，J=8.5，1.9Hz，H-6)，6.24(1H，d，J=15.9Hz，H-8)，4.16(2H，m，H-10)，1.67(2H，m，H-11)，1.39(2H，m，H-12)，0.93(3H，t，H-13).13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ:167.9(C-9)，146.3(C-3)，144.7(C-7)，143.8(C-4)，127.6(C-6)，122.3(C-1)，115.8(C-8)，115.5(C-2)，114.5(C-5)，64.6(C-10)，30.8(C-11)，19.1(C-12)，13.7(C-13)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］的數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為咖啡酸正丁酯.

3 結(jié)語

通過對長陽皺皮木瓜的系統(tǒng)分離，已初步得到了5個(gè)化合物，1個(gè)為三萜類化合物，2個(gè)為甾醇類化合物，2個(gè)為有機(jī)酸類化合物，分別為齊墩果酸、胡蘿卜苷、β-谷甾醇、咖啡酸和咖啡酸正丁酯.其中化合物V是首次從該種植物中分離得到，這些化合物的發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步研究該藥奠定了一定的基礎(chǔ).

［1］秦 巖，董 薇，葛 欣.木瓜中多糖和微量元素含量分析［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，2005，22(2):287-289.

［2］郭學(xué)敏，章玲，全山從，等.皺皮木瓜中三萜化合物的分離鑒定［J］.中國中藥雜志，1998，23(9):546-548.

［3］史亞歌，劉拉平.光皮木瓜揮發(fā)油成分的GC-MS分析［J］.西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2005，14(3):163-166.

［4］高誠偉，康 勇，雷澤模.皺皮木瓜中有機(jī)酸的研究［J］.云南大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，1999，21(4):319-321.

［5］江蘇省植物研究所.新華本草綱要:三部［M］.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，1990:95.

［6］何銀生，廖朝林，郭漢玖，等.皺皮木瓜前景美好［J］.中國現(xiàn)代中藥，2008，10(9):46-47.

［7］湯建平.金鈕扣的化學(xué)成分及紫外鑒別研究［D］.廣州:廣東藥學(xué)院，2010.

［8］張起輝，高慧媛，吳立軍，等.吳茱萸的化學(xué)成分［J］.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，22(1):12-14.

［9］王彩芳，潘成學(xué)，程 茜，等.離舌橐吾葉化學(xué)成分分析［J］.鄭州大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2007，42(6):1173-1174.

［10］張正付，邊寶林，楊 健，等.茉莉根化學(xué)成分的研究［J］.中國中藥雜志，2004，29(3):237-239.

［11］Graziose R，Rojas-Silva P，Rathinasabapathy T，et al.Antiparasitic compounds from Cornus florida L.with activities against Plasmodium falciparum and Leishmania tarentolae［J］.JEthnopharmacol，2012，142(2):456-461.

［12］Al-Musayeib N，Perveen S，F(xiàn)atima I，et al.Antioxidant，anti-glycation and anti-inflammatory Activies of phenolic constituents from Cordial Sinensis［J］.Molecules，2011，16(12):10214-10226.

［13］Calheiros R，Machado N F L，F(xiàn)iuza S M，et al.Antioxidant phenolic esters with potential anti-cancer activity:A Raman spectroscopy study［J］.J Raman Spectrosc，2008，39:95-107.