侯麗麗，晏永新，蔡美萍，方學(xué)鋒

(1.山西省獸藥監(jiān)察所，太原030027;2.江西新世紀(jì)民星動物保健品有限公司，南昌330096)

黨參為臨床常用的傳統(tǒng)補(bǔ)益中藥，味甘性平，具有健肺益脾、補(bǔ)中益氣、生津、促進(jìn)造血機(jī)能、調(diào)節(jié)血糖、降壓、耐疲勞、抗缺氧、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、調(diào)節(jié)胃收縮及抗?jié)兊榷喾N作用[1]。其主要活性成分之一黨參多糖具有增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、增強(qiáng)抗應(yīng)激能力及抗氧化[2]等多種藥理活性。試驗(yàn)通過使用黨參多糖口服液連續(xù)灌胃給藥，觀察藥物的耐缺氧、抗疲勞作用和抗炎作用，分析藥物對動物機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)能力和抗炎的影響。

1 材料

1.1 試驗(yàn)動物 昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22 g，由江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。

1.2 藥品、試劑及器材 黨參多糖口服液(100 mL/瓶，2 g生藥/mL)，江西新世紀(jì)民星動物保健品有限公司，批號:20100501，試驗(yàn)前適當(dāng)濃縮;人參口服液，吉林省通化博祥藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字Z20075112，批號:20091201;二甲苯。注射器、負(fù)重物(每個2 g)、缺氧瓶、電子天平。

2 方法與結(jié)果

2.1 黨參多糖口服液對小鼠應(yīng)激性的影響

2.1.1 動物分組和劑量設(shè)計 取上述規(guī)格小鼠200只，雌雄各半，按體重、性別隨機(jī)分成2個實(shí)驗(yàn)單位，每個實(shí)驗(yàn)單位分設(shè)5組，每組各20只。空白對照組，黨參多糖口服液低劑量組(5.0 g生藥/kg)、中劑量組(7.0 g生藥/kg)、高劑量組(9.0 g生藥/kg)，陽性藥物對照藥人參口服液組(5.0 g生藥/kg)。各給藥組連續(xù)灌胃給藥5 d，每天1次，每次0.2 mL/10 g，空白對照組灌胃等體積的生理鹽水(表1)。

表1 動物分組及劑量設(shè)計

2.1.2 黨參多糖對小鼠負(fù)重游泳時間的影響 參照文獻(xiàn)[3-4]方法，末次給藥60 min后，將尾部負(fù)重2 g鉛線的小鼠置于塑料桶(50 cm×30 cm)，水溫調(diào)節(jié)至(25±3)℃，進(jìn)行游泳試驗(yàn)，記錄小鼠自開始置入到頭部沉入水中10 s不能浮出水面的時間，即是小鼠負(fù)重游泳的時間。試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)均以(±s)表示，采用spss 16.0軟件t檢驗(yàn)法檢查組間差異。

由表2可見，黨參多糖口服液各劑量組和人參口服液組與空白對照組相比均能顯著延長小鼠的游泳時間(P＜0．01)。黨參多糖口服液中劑量組的效果即與人參口服液相當(dāng)，且小鼠游泳時間隨著黨參多糖口服液劑量的增加而延長。

2.1.3 黨參多糖口服液對小鼠常壓缺氧的影響于末次給藥60 min后，開始試驗(yàn)。逐個將小鼠放入底部盛有10 g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)，每瓶放小鼠1只，小鼠適應(yīng)后，蓋上涂有凡士林的瓶塞。記錄從密閉瓶口到小鼠停止呼吸的時間，作為常壓缺氧條件下小鼠的存活時間[3]。

由表3可見，與空白對照組相比，黨參多糖口服液高、中、低劑量組和人參口服液均能顯著延長小鼠的耐缺氧時間(P ＜0．01)。黨參多糖口服液中劑量組的效果即與人參口服液相當(dāng)，且小鼠存活時間隨著黨參多糖口服液劑量的增加而延長。

表2 黨參多糖口服液對小鼠游泳時間的影響(ˉ±s，n=20)

表2 黨參多糖口服液對小鼠游泳時間的影響(ˉ±s，n=20)

注:與空白組比較:*P ＜0．05，＊＊P ＜0.01，下表同。

負(fù)重游泳時間/min人參口服液 5.0 20 66.5±9.2組 別 劑量/(g生藥·kg-1)動物數(shù)/只＊＊黨參多糖口服液(低) 5.0 20 56.6±4.9＊＊黨參多糖口服液(中) 7.0 20 66.4±8.3＊＊黨參多糖口服液(高) 9.0 20 83.5±9.8＊＊空白對照 —20 35.9±7.0

表3 黨參多糖口服液對小鼠常壓缺氧的影響(±s，n=12)

表3 黨參多糖口服液對小鼠常壓缺氧的影響(±s，n=12)

存活時間/min人參口服液 5.0 20 30.8±3.4組 別 劑量/(g生藥·kg-1)動物數(shù)/只＊＊黨參多糖口服液(低) 5.0 20 27.9±3.4＊＊黨參多糖口服液(中) 7.0 20 31.3±3.6＊＊黨參多糖口服液(高) 9.0 20 36.9±3.5＊＊空白對照 —20 21.2±3.20

2.2 黨參多糖口服液對小鼠的抗炎作用 參考文獻(xiàn)[3]中的方法，取上述規(guī)格小鼠50只，雌雄各半，按體重、性別隨機(jī)分5組，每組10只?？瞻讓φ战M，陽性藥物對照組(人參口服液)，黨參多糖口服液各劑量組，各給藥組連續(xù)灌胃給藥5 d，每天1次，每次0.2 mL/10 g，空白對照組灌胃等體積的生理鹽水。于末次給藥30 min后，用二甲苯棉球接觸小鼠左耳約5 s，15 min后脫頸椎處死，以打孔器將小鼠雙耳相同部位等面積切下，用電子天平精確稱準(zhǔn)，以左耳重減右耳重為小鼠的耳腫脹度，并求出抑制率。

由表4可知，黨參多糖口服液不同劑量組和人參口服液組對小鼠耳廓腫脹的抑制顯著高于空白對照組(P＜0．01)，高劑量組抑制率最高，其次是中劑量組和低劑量組，最后是人參口服液組。試驗(yàn)表明黨參多糖口服液對小鼠耳廓腫脹有一定的抑制作用，且在一定濃度范圍內(nèi)其抑制作用隨著黨參多糖口服液使用劑量的增加而增強(qiáng)。

表4 黨參多糖口服液對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(±s，n=10)

表4 黨參多糖口服液對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(±s，n=10)

組 別 劑量/(g生藥·kg-1) 耳重/mg 抑制率23.63黨參多糖口服液 5.0 9.73±2.43＊＊ 23.70黨參多糖口服液 7.0 9.23±2.68＊＊ 23.91黨參多糖口服液 9.0 7.61±2.21＊＊ 37.10空白對照 —/%人參口服液 5.0 9.24±1.340＊＊12.89±2.84

3 討論與結(jié)論

動物在飼養(yǎng)過程中難免會受到各種因素造成的應(yīng)激作用，在一定程度上降低了生產(chǎn)性能，也給業(yè)主造成一定的經(jīng)濟(jì)損失[5]，黨參多糖是中藥黨參的主要有效成分之一，對中樞神經(jīng)具有明顯的抑制作用，對各種原因引起的缺氧動物有顯著的抗缺氧作用，同時也有顯著的抗應(yīng)激作用。李偉[6-7]等經(jīng)過試驗(yàn)證明黨參多糖能明顯延長小鼠在常壓缺氧下的存活時間，對小鼠遭受的高溫缺氧及疲勞等刺激也有明顯的抗應(yīng)激作用，并指出其抗應(yīng)激作用可能與興奮下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)有關(guān)。

試驗(yàn)采用強(qiáng)迫小鼠游泳試驗(yàn)及小鼠常壓缺氧試驗(yàn)來驗(yàn)證黨參多糖口服液的抗應(yīng)激作用，從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，黨參多糖口服液和空白對照組相比能顯著(P＜0．01)延長小鼠的游泳時間和常壓缺氧條件下的存活時間，中劑量組同陽性對照即人參口服液組效果相當(dāng)，說明黨參多糖口服液具有明顯的抗應(yīng)激作用。

抗炎作用研究的最常用模型之一就是皮膚毛細(xì)血管通透性增高模型[8]，該方法直觀、操作簡便、結(jié)果重現(xiàn)性好?；瘜W(xué)藥品二甲苯可引起急性炎癥，將它涂于小鼠耳部能誘導(dǎo)小鼠耳部腫脹，灌服具有抗炎作用的黨參多糖口服液，可以減弱腫脹，至于其抗炎機(jī)理還有待進(jìn)一步的研究。

結(jié)果表明，黨參多糖口服液具有明顯的抗應(yīng)激作用，同時具有抗炎作用，該試驗(yàn)可為黨參多糖口服液的臨床應(yīng)用提供參考。

[1]中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典二〇〇五年版一部[S].

[2]李貴榮，楊勝圓.黨參多糖的提取及其對活性氧自由基的清除作用[J].化學(xué)世界，2001，8:42.

[3]陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)(第二版)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:778，779，298.

[4]王傳功，王申廣，林麗文.枸杞山茱萸水煎液增強(qiáng)小鼠耐缺氧抗疲勞能力的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué)，2006，15(8):679-680.

[5]李紅軍，田夏清，徐美娟.動物應(yīng)激的研究進(jìn)展[J].飼料研究，2006，10:6-11.

[6]李 偉，陳穎莉，曲淑巖.黨參多糖的抗應(yīng)激作用[J].實(shí)驗(yàn)研究，1990(6):33.

[7]方 明，石云峰，焦炬焰.中藥黨參抗應(yīng)激作用的研究[J].遼寧藥物與臨床，2002，5(1):32-33.

[8]梁曉天.常用中藥基礎(chǔ)研究(第二卷)[M].北京:科學(xué)出版社，2004:296.