翁善鋼
( 外高橋出入境檢驗(yàn)檢疫局,上海 200137)
豬傳染性胸膜肺炎的病原為胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus P1europeumoniae,APP)。因分離的年代和時(shí)間不同,曾被稱為副溶血嗜血桿菌(H.parahaemolyticus) 和胸膜肺炎嗜血桿菌(H. pleuropneumoniae)。
APP 已有15 個(gè)公認(rèn)的血清型,分別命名為APP-1 至APP-15,這15 種血清型的致病力大不相同。豬群內(nèi)不同血清型的流行情況在不同的國(guó)家也大不相同。這也使得不同國(guó)家采取的檢測(cè)以及診斷方法有所不同。有些國(guó)家主要檢測(cè)幾種毒力較強(qiáng)的血清型,還有些國(guó)家檢測(cè)所有血清型的APP。
影響APP 毒力的因素有多種,其中最為重要的是ApxI,ApxII 和ApxIII 3 個(gè)基因。這些基因使細(xì)菌產(chǎn)生的毒素,抑制豬的中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的產(chǎn)生,即抑制細(xì)胞的吞噬功能,損害急性感染豬機(jī)體的防御機(jī)制。某些血清型的APP 只含有一種Apx 基因,也有些血清型的APP 含有2 種Apx 基因,這使其具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性(見(jiàn)表1)。幾乎所有血清型的APP 都存在ApxIV基因,該基因的致病潛力還沒(méi)有被確定。但ApxIV 具有高度的種特異性,因此,近幾年發(fā)展起來(lái)的多種診斷方法都基于該基因。
表1 不同血清型APP 所含有的毒力基因
已有多種實(shí)驗(yàn)室方法用于診斷APP感染。采用何種診斷方法要注意結(jié)合臨床情況,同時(shí)也要考慮APP 的血清型以及毒力情況很復(fù)雜的實(shí)際情況。
1)采集肺部以及扁桃體的病變組織作細(xì)菌培養(yǎng),純培養(yǎng)物進(jìn)一步進(jìn)行血清型分型。
2)PCR 方法可直接用于檢測(cè)ApxIV 基因。病變的肺部組織,扁桃體拭子以及鼻拭子樣品或者來(lái)源于這些樣品的純培養(yǎng)物都可以采用PCR 方法鑒定出不同的血清型。
3)對(duì)APP 的純培養(yǎng)物采用PCR檢測(cè)ApxI、ApxII 和ApxIII 基因有助于了解APP 的毒力。
4)也可以采集新鮮的病變肺組織制作成壓片或者冰凍切片,利用免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肺組織中的APP 抗原。
1)現(xiàn)在已有檢測(cè)針對(duì)ApxIV 基因抗體的ELISA 方法。
2)檢測(cè)針對(duì)APP 的莢膜多糖的ELISA 方法,有助于鑒定出針對(duì)不同血清型的APP 的抗體。
3)檢測(cè)針對(duì)不同血清型APP 抗體的ELISA 方法也有很多報(bào)道。
盡管上文介紹了不少檢測(cè)抗原和抗體的方法,很多方法事實(shí)上并沒(méi)有廣泛應(yīng)用,每個(gè)國(guó)家的APP 感染流行現(xiàn)狀不同,科技水平也不同,這直接影響到具體檢測(cè)方法的使用。
在這種情況下,關(guān)鍵因素是及時(shí)確認(rèn)豬群是否存在APP 感染。最好的辦法是將死豬和發(fā)病豬送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行剖檢。采集典型的急性胸膜肺炎病變的樣本,采用恰當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)(見(jiàn)圖1)。純培養(yǎng)物可以進(jìn)一步用于血清分型。樣品保存好后也可以使用PCR,間接免疫熒光等方法進(jìn)行檢測(cè)。
病豬的扁桃體試子樣品可以采用PCR 方法檢測(cè)ApxIV 基因。
出現(xiàn)較為復(fù)雜的胸膜肺炎時(shí)很有可能存在多種病原共同感染。此時(shí),需要采集新鮮的肺組織進(jìn)行細(xì)菌學(xué)和病毒學(xué)檢查,采用PCR 的方法檢測(cè)是否還存在其他病原。在3 個(gè)不同的部位采集具有典型肺部病變的組織進(jìn)行病理組織學(xué)觀察有助于進(jìn)一步了解肺部病變的性質(zhì)。慢性病例中,APP 感染引起的病變逐漸皺縮,最終局限于斑點(diǎn)狀的病變(見(jiàn)圖2)。這種情況下,對(duì)肺組織進(jìn)行PCR 檢測(cè),或者對(duì)處于恢復(fù)期的豬檢測(cè)抗體有助于診斷。通常,APP 感染10~14 d 后就可以檢測(cè)到抗體。
疫苗是控制APP 感染的重要手段。目前市場(chǎng)上有亞單位苗和滅活苗出售,但各種疫苗都有其不足之處,不能抵抗所有血清型的攻擊,不能消除患病動(dòng)物的帶菌狀態(tài)。近來(lái)各國(guó)都在積極探索基因缺失弱毒苗對(duì)胸膜肺炎的保護(hù)效果,有望取代目前的滅活苗,因?yàn)榛蛉笔醵久绲慕徊姹Wo(hù)力更強(qiáng),初步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明可抵抗多數(shù)血清型的攻擊。
根據(jù)近來(lái)國(guó)內(nèi)外的用藥情況及相關(guān)報(bào)道顯示,APP 對(duì)頭孢噻夫、替米考星、氟甲砜霉素、先鋒霉素、環(huán)丙沙星、單諾沙星、恩諾沙星、四環(huán)素、慶大霉素、卡那霉素等較敏感。金霉素與泰樂(lè)菌素的聯(lián)合用藥在臨床上使用也較多。對(duì)有明顯臨床癥狀的發(fā)病豬,可用首選藥物進(jìn)行口服和注射同時(shí)給藥,具有良好的效果。對(duì)未發(fā)病豬群在飼料或飲水中添加給藥,先用治療劑量給藥數(shù)天后,改用預(yù)防量給藥數(shù)周或數(shù)月可控制此病的發(fā)生。
各種細(xì)菌都會(huì)產(chǎn)生抗藥性,且不同的菌株產(chǎn)生的耐藥性也不相同。因此,在本病的防治過(guò)程中,對(duì)用于預(yù)防的藥物應(yīng)有計(jì)劃地定期輪換使用,最好做藥敏實(shí)驗(yàn)。
很多豬場(chǎng)存在多種病原微生物的混合感染。偽狂犬病、豬瘟、PRRS、支原體肺炎、副豬嗜血桿菌感染等疾病或破壞豬的免疫系統(tǒng),或破壞豬肺臟的防御功能,很容易使豬只對(duì) APP 的易感性增加,因而一定要做好這些疾病的防控工作。豬舍及環(huán)境均定期消毒,減少病原微生物的生存。減少豬的應(yīng)激,改善和加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,采用全進(jìn)全出的飼養(yǎng)方式。