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        嬰幼兒喘息治療前后炎性因子與細(xì)胞因子水平變化及意義

        2013-11-22 02:27:46高素華應(yīng)延風(fēng)宋春函應(yīng)佩蓓胡國(guó)華王有成

        高素華 應(yīng)延風(fēng) 宋春函 應(yīng)佩蓓 胡國(guó)華 王有成

        嬰幼兒喘息是一種呼吸道變態(tài)反應(yīng)性疾病,其病理學(xué)特征之一是嗜酸粒細(xì)胞(EOS)增多,且主要是活化的[1]。血清嗜酸細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)是EOS活化后脫顆粒釋放的一種炎癥介質(zhì),在形成氣道炎癥的過(guò)程中起主要作用,也是反映氣道炎癥活動(dòng)的重要指標(biāo)物,又Thl/Th2細(xì)胞間的失衡是哮喘發(fā)病的關(guān)鍵機(jī)制[2]。測(cè)定血清ECP、EOS及Thl/Th2相關(guān)的IL-6和IFN-γ水平可反應(yīng)氣道炎癥的嚴(yán)重程度及臨床病情,以便指導(dǎo)哮喘的抗炎治療。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選自2010年9月~2012年9月浙江省金華市人民醫(yī)院呼吸門(mén)診或住院的喘息嬰幼兒60例,符合我國(guó)兒童哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3],隨機(jī)分為喘息急性發(fā)作期組30例,其中男性16例,女性14例,平均年齡(16.4±9.1)個(gè)月,平均病程(12.1±8.8)h;喘息緩解期組30例,其中男性18例,女性12例,平均年齡(17.1±8.8)個(gè)月;平均病程(3.2±1.0)周;另設(shè)健康查體者30人,男性17人,女性13人,平均年齡(16.8±9.8)個(gè)月,排除過(guò)敏性疾病和其他與變態(tài)反應(yīng)有關(guān)的慢性疾病、并除外神經(jīng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 細(xì)胞因子測(cè)定 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè) IL-6、IFN-γ,采靜脈血5 ml,在20 ~25℃室溫下凝血60 min,以3000 r/min離心 l0 min,分離血清,-20℃保存,待測(cè)定。試劑盒購(gòu)自深圳晶美生物有限公司,嚴(yán)格按試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)操作。

        1.2.2 炎性因子測(cè)定 采用Sysmex XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。瑞典Pharmacia公司的UniCAPl000熒光酶免疫分析儀及ECP測(cè)定試劑盒(法碼西亞公司),抽取靜脈血(同上),且嚴(yán)格按檢測(cè)要求操作。入院第2天清晨空腹抽取乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝靜脈血2~3 ml伊紅染色,顯微鏡下檢測(cè)EOS計(jì)數(shù)。

        1.3 觀察指標(biāo) 用藥前和緩解期(治療后2周病情好轉(zhuǎn))分別測(cè)定外周血嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、干擾素γ(IFN-γ)及血清嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,本組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(±s)表示,組間差異采用t檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        喘息發(fā)作期組 ECP、EOS與 IL-6明顯高于健康組及緩解期組(P<0.01)。即使緩解期,上述3項(xiàng)指標(biāo)仍不能達(dá)到健康組水平(P<0.01);IFN-γ喘息發(fā)作期組明顯低于健康組及緩解期組(P<0.01),即使緩解期有明顯上升,仍達(dá)不到健康組水平(P<0.01),見(jiàn)表1。

        表1 喘息嬰幼兒炎性因子與細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果(±s)

        表1 喘息嬰幼兒炎性因子與細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果(±s)

        注:與健康組比aP<0.01,與緩解期組比bP<0.01

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        3 討論

        近年來(lái)有關(guān)研究表明,哮喘發(fā)病的關(guān)鍵機(jī)制[4]是Thl/Th2細(xì)胞間的失衡,如代表Thl型細(xì)胞因子的IFN-γ減少,Th2分泌的前變應(yīng)細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-13等的增多。Yokoyama等[5]認(rèn)為哮喘發(fā)作期及無(wú)癥狀的IL-6均高于正常人,支氣管上皮細(xì)胞IL-6基因表達(dá)在癥狀性哮喘患者中可見(jiàn)增強(qiáng)。其培養(yǎng)上清液中的水平也明顯增高[6]。又有證明IL-6主要由氣道非纖毛上皮細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生,其水平在非過(guò)敏性哮喘患者支氣管肺泡灌洗液中明顯高于正常組,故認(rèn)為在哮喘炎癥反應(yīng)中IL-6起著至關(guān)重要的作用[7]。研究結(jié)果表明哮喘發(fā)作期IL-6含量顯著增高,INF-γ明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明患者Th2細(xì)胞處于活化狀態(tài),而Thl細(xì)胞活性較低。即存在Thl細(xì)胞表達(dá)抑制及Th2細(xì)胞過(guò)度表達(dá)[8]。隨著炎癥程度減輕達(dá)緩解期時(shí)IL-6降低,IFN-γ增高,但仍達(dá)不到健康組水平。

        喘息患兒下氣道的主要炎癥細(xì)胞是EOS,其病理組織學(xué)改變是氣道黏膜活化的EOS顯著增多,并與氣道高反應(yīng)(AHR)的嚴(yán)重程度和氣道上皮細(xì)胞損傷脫落密切相關(guān)。ECP是EOS活化標(biāo)志,EOS活化后釋放的強(qiáng)堿性顆粒蛋白主要有ECP,在氣道炎癥過(guò)程中,ECP能誘導(dǎo)肥大細(xì)胞釋放組胺,它具有極強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用,從而損傷氣道上皮和角質(zhì)細(xì)胞,ECP能反映哮喘患者氣道炎癥的發(fā)生、發(fā)展等的變化及提示氣道炎癥的嚴(yán)重程度[9-11]。

        本文研究結(jié)果顯示:喘息發(fā)作期組 ECP、EOS與 IL-6明顯高于健康組及緩解期組(P<0.01)。即使緩解期上述3項(xiàng)指標(biāo)明顯下降,但仍不能達(dá)到健康組水平(P<0.01);IFN-γ喘息發(fā)作期組明顯低于健康組及緩解期組(P<0.01),而緩解期組即使有明顯上升,仍達(dá)不到健康組水平(P<0.01)。提示ECP、EOS、IL-6、IFN-γ能夠敏感、準(zhǔn)確地反映喘息患兒的氣道炎癥變化。因此,測(cè)定血細(xì)胞與炎性因子(EOS、ECP、IL-6、IFN-γ)不但可提示喘息患兒氣道損害與炎癥的嚴(yán)重程度,還可反應(yīng)臨床病情的嚴(yán)重程度。對(duì)診斷、療效和預(yù)后判斷等有較大的臨床實(shí)用價(jià)值。

        [1]應(yīng)延風(fēng),胡野.前列腺素D2對(duì)支氣管哮喘免疫細(xì)胞功能調(diào)節(jié)作用.國(guó)際呼吸雜志,2007,27(11):837-842.

        [2]王西潔.布地奈德霧化吸入對(duì)輕中度支氣管哮喘患者Th1/Th2細(xì)胞因子平衡的影響.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2013:8(7):177-178

        [3]中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組.中國(guó)兒童哮喘診斷與防治指南.中華兒科雜志,2008,46(10):745-753.

        [4]李文益,陳述枚.兒科學(xué)新理論和新技術(shù).北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:446-455

        [5]Yokoyama A,Rohno N,F(xiàn)ujino S,et al.Circulating interleukin-6 levels in patients with bronchial asthma.Am J Respir Crit Care Med 1995 151(5):1354-1358.

        [6]Mavini M,Vitrou E,Hollembong J,et al.Expression of the Potent intlammatory cytomnes,anuloeyte-maerophagecolony stimulating factor and inlerleukin-6 and inledeukin-8 in bronchial epithelial cells of patientswithasthma.J Allergy Clin Immunol,1992,89(6):1001-1009.

        [7]Mattoh S,Mattoso VL,Soloperto M,et al.Cellular and biochemical characteristics of bronchoalveolar lavage fluid in symptomatic nonallergic asthma.J Allergy Clin Immumol,1991,87(4):794-802.

        [8]姜軍合,范學(xué)政.布地奈德對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者Th1/Th2細(xì)胞因子的影響.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2007,23(21):3357-3358.

        [9]匡玉寶,黃英河.嬰兒喘息支氣管哮喘患者治療前后ECP和EOS 對(duì)比分析.當(dāng)代醫(yī)學(xué),2010,16(28):98.

        [10]張方琪,楊學(xué)敏,唐元元,等.酸性粒細(xì)胞在哮喘發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展.中華肺部疾病雜志(電子版),2013,6(2):55-58.

        [11]應(yīng)延風(fēng),胡野,金耀建,等.大鼠哮喘模型中嗜酸性粒細(xì)胞上前列腺素D2受體改變研究.金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,8(2):5-7.

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