林愛琴，程 森，壽記新#，馬 林，巫慶榮

1)鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學(xué)院護(hù)理學(xué)院 鄭州 450052 2)鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院神經(jīng)外科 鄭州 450052 3)鄭州大學(xué)醫(yī)院 鄭州 450052

膠質(zhì)瘤亦稱神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤，起源于神經(jīng)上皮細(xì)胞，是一種常見的顱內(nèi)惡性腫瘤,具有高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率、高死亡率及低治愈率的“三高一低”的特點(diǎn)。核干細(xì)胞因子(nucleostemin，NS)是一個(gè)細(xì)胞核內(nèi)的鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白，定位于干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核，參與干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖調(diào)控[1-3]。目前已有研究[4-5]顯示，在多種癌組織中均有NS的高表達(dá)。作者觀察了NS蛋白在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況，報(bào)道如下。

1 材料、方法與結(jié)果

1.1材料取鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院2009年6月至2011年6月手術(shù)切除的部分膠質(zhì)瘤存檔蠟塊35例，其中男19例，女16例；年齡7～79歲，中位年齡42歲。按WHO 2000年分類和分級標(biāo)準(zhǔn)[3]：Ⅰ期3例，Ⅱ期9例，Ⅲ期19例，Ⅳ期4例。另取該院神經(jīng)外科顱腦外傷行內(nèi)減壓術(shù)的11例患者的正常腦組織作對照，其中男6例，女5例；年齡12～68歲，中位年齡39歲。

1.2NS檢測標(biāo)本組織經(jīng)生理鹽水沖洗、固定、脫水處理，二甲苯透明，石蠟包埋，4～6 μm厚度連續(xù)切片。采用免疫組化染色方法檢測NS蛋白。鼠抗羊IgG購自上海恒斐生物科技有限公司，即用型SABC免疫組化染色試劑盒購自上海聯(lián)碩生物科技有限公司，操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。一抗按100倍稀釋。DAB顯色，蘇木素復(fù)染，中性樹膠封片，晾干后鏡檢。以PBS代替一抗作為陰性對照，以已知NS蛋白陽性的結(jié)腸癌組織切片為陽性對照。

1.3結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)NS蛋白陽性信號表現(xiàn)為胞核或胞質(zhì)內(nèi)棕黃色顆粒狀著色。選取5個(gè)以上高倍(×400)視野，計(jì)數(shù)不少于200個(gè)細(xì)胞，根據(jù)染色程度及陽性細(xì)胞百分率進(jìn)行評分。①按染色程度進(jìn)行評分：無染色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。②按陽性細(xì)胞百分率進(jìn)行評分：<30%為1分，30%～70%為2分，>70%為3分。取兩項(xiàng)評分的乘積為最終評分，≤1分記為陰性，>1分記為陽性。

1.4 2組NS蛋白表達(dá)的比較見圖1。正常腦組織及膠質(zhì)瘤組織中NS蛋白陽性表達(dá)率分別為9.1%(1/11)、57.1%(20/35)，腦膠質(zhì)瘤組織中NS蛋白陽性表達(dá)率高于正常腦組織(χ2=7.789，P=0.005)。

圖1 NS蛋白的表達(dá)(SABC,×400)

1.5NS蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤臨床病理分期的關(guān)系

Ⅰ、Ⅱ期腦膠質(zhì)瘤組織中NS蛋白陽性表達(dá)率為25.0%(3/12)，Ⅲ、Ⅳ期為73.9%(17/23)，Ⅲ、Ⅳ期腦膠質(zhì)瘤組織中NS蛋白陽性表達(dá)率高于Ⅰ、Ⅱ期(χ2=7.704，P=0.006)。

2 討論

NS是一個(gè)細(xì)胞核內(nèi)的鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白，以三磷酸鳥苷(guanosine triphosphate,GTP)依賴的形式穿梭于核仁和核質(zhì)之間，這一動(dòng)力學(xué)的穿梭過程調(diào)控細(xì)胞增殖[1-3]。 研究[6]表明干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞之間存在著許多相似的生物學(xué)特性。維持干細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的關(guān)鍵是協(xié)調(diào)控制自我更新和保證分化，如果這種平衡被打破就易導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。目前已有研究[7]顯示NS蛋白可能充當(dāng)調(diào)控正常干細(xì)胞和癌細(xì)胞增殖的雙面角色，腫瘤細(xì)胞和腫瘤組織中NS基因的高表達(dá)普遍存在。該研究證實(shí)：腦膠質(zhì)瘤組織中NS蛋白的表達(dá)明顯高于正常腦組織，且臨床病理分期Ⅰ、Ⅱ期腦膠質(zhì)瘤組織中NS蛋白的表達(dá)明顯低于Ⅲ、Ⅳ期，提示NS不僅與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生有關(guān)，還與其惡性程度(臨床分期)密切相關(guān)。

總之，NS蛋白的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤臨床分期之間的相關(guān)性使其有可能成為腦膠質(zhì)瘤的又一個(gè)靶向治療基因，這為腦膠質(zhì)瘤的臨床治療提供了一個(gè)新的研究方向。

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