計仁華 丁士標(biāo) 李召東 杭州市紅十字會醫(yī)院檢驗科 杭州 310003

陰道分泌物檢查是婦科患者的必檢項目，常用于判斷女性生殖系統(tǒng)炎癥，如細菌性陰道?。˙V）、念珠菌性陰道炎和滴蟲性陰道炎。準(zhǔn)確、及時的陰道分泌物病原學(xué)檢查對臨床進行陰道炎病因確診具有十分的重要意義。近年來，隨著檢驗醫(yī)學(xué)的發(fā)展，檢測病原體的特有代謝活性及其代謝產(chǎn)物進行陰道炎的病因分類已應(yīng)用于臨床。筆者采用過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶陰道炎五聯(lián)檢測技術(shù)對臨床送檢的804 份陰道分泌物樣本進行陰道炎病因?qū)W分析，通過與常規(guī)顯微鏡下檢查對比，評價該項技術(shù)在陰道炎篩查、鑒別診斷的意義。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 本院婦產(chǎn)科門診2012 年1 月—2012 年2 月送檢的陰道分泌物標(biāo)本共804 例，患者年齡19～60 歲。所有標(biāo)本用無菌女性拭子收集患者陰道后穹窿分泌物2 份并立即送檢。

1.2 研究方法

1.2.1 常規(guī)鏡檢 直接將陰道分泌物涂濕片在顯微鏡下觀察，嚴(yán)格按照全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3版）要求進行乳酸桿菌、白細胞、線索細胞（＞20%）、滴蟲、真菌檢查，并對涂片進行革蘭染色確認。陰道分泌物pH 值測定采用上海試劑三廠生產(chǎn)的精密pH試紙進行測定。

1.2.2 婦科聯(lián)檢 過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶檢測，采用北京中生金域診斷技術(shù)有限公司的陰道炎五聯(lián)檢測試劑盒，操作步驟嚴(yán)格按說明書進行，結(jié)果判斷按相應(yīng)軟件進行。

1.3 其他試劑 法國梅里埃公司細菌革蘭染色液試劑盒。鄭州博賽生物技術(shù)有限公司科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

聯(lián)檢法通過氧化氫和白細胞酯酶檢測陰道分泌物乳酸桿菌、白細胞與常規(guī)鏡檢法比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；聯(lián)檢法通過唾液酸苷酶和脯氨酸氨基肽酶聯(lián)合檢測BV 與常規(guī)鏡檢結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；聯(lián)檢法通過pH 值和乙酰氨基葡萄糖苷酶聯(lián)合檢測念珠菌性陰道炎和滴蟲性陰道炎陽性率高于常規(guī)鏡檢法，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 陰道分泌物鏡檢法和聯(lián)檢法結(jié)果比較 例（%）

3 討論

正常陰道分泌物中乳酸桿菌占95%以上，其產(chǎn)生的過氧化氫（H2O2）不僅可以維持陰道內(nèi)酸性環(huán)境，而且可以阻止某些病原微生物和抑制寄居的條件致病菌，如陰道加德納菌、動彎桿菌、消化鏈球菌、普里沃菌、支原體、真菌等的生長[1]。陰道感染時陰道內(nèi)正常菌群平衡失調(diào)，乳酸桿菌減少，導(dǎo)致H2O2含量降低。白細胞酯酶是白細胞膜上的一種蛋白質(zhì)，陰道黏膜炎癥時大量白細胞特別是多形核白細胞浸潤并滲透到分泌物中。因此，通過對H2O2濃度及白細胞酯酶的檢測可直觀地判斷患者的陰道微生態(tài)是否異常，有效評估陰道壁黏膜有否受損和炎癥情況。本研究表明，聯(lián)檢試驗盒通過檢測H2O2濃度和白細胞酯酶的含量，間接指示乳酸桿菌和白細胞的數(shù)量，與常規(guī)鏡檢法比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

細菌性陰道?。˙V）是指陰道內(nèi)乳酸桿菌大量減少，厭氧菌群（陰道加德納菌、擬桿菌屬、動彎桿屬、普里沃菌屬等）大量增生導(dǎo)致的臨床癥候群[2]。研究表明，陰道環(huán)境中唾液酸苷酶活性與BV 密切相關(guān)，但在陰道微生態(tài)群中，普里沃菌屬和擬桿菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌，部分陰道加德納菌有此酶活性，動彎桿菌、消化球菌以及人型支原體中此酶活性不能檢出[3-4]。因此，單純檢測分泌物中唾液酸苷酶活性必然會漏檢此酶活性低的厭氧菌增多引起的BV。已有研究表明，脯氨酸氨基肽酶是陰道加德納菌和動彎桿菌所分泌的特異性標(biāo)志物[5]。因此，聯(lián)合檢測唾液酸苷酶和脯氨酸氨基肽酶活性可以最大限度地減少BV 的漏檢。本研究也表明，聯(lián)檢試劑利用唾液酸苷酶和脯氨酸氨基肽酶檢測BV 與常規(guī)檢查結(jié)果無顯著性差異（P＞0.05）。需要指出的是，唾液酸苷酶在腫瘤細胞中活性增強，生殖道腫瘤可導(dǎo)致假陽性；而一些念珠菌如白色念珠菌能產(chǎn)生脯氨酸氨基肽酶導(dǎo)致假陽性，但念珠菌可同時產(chǎn)生乙酰氨基葡萄糖苷酶，可由此加以鑒別[6]。

常規(guī)鏡檢在檢查念球菌和滴蟲時對技術(shù)、經(jīng)驗要求高且主觀性強，特別是氣溫低可直接影響滴蟲活動性而可能漏檢。研究表明，乙酰氨基葡萄糖苷酶是白色念珠菌和滴蟲分泌的特異性酶。因此，可通過此酶檢測念珠菌和滴蟲[7]。同時，也可以通過檢測陰道分泌物pH 值正確區(qū)分念珠菌和滴蟲：正常陰道分泌物pH 值為3.8～4.5，滴蟲感染時pH 值升高，可＞5.0～6.0，霉菌感染pH4.0～4.7，念球菌感染pH≤4.6，而滴蟲感染pH 值＞4.8；故可通過滴蟲和念球菌在陰道分泌物pH 值上的不同區(qū)分兩者[8]。

綜上所述，通過婦科聯(lián)檢試劑卡五個指標(biāo)同時檢測陰道炎癥情況，并通過指標(biāo)間的配合去除臨床的一些干擾，可提高準(zhǔn)確性和檢出率。該試劑卡操作簡單、快速、客觀，而且六項指標(biāo)的判斷可以包含白帶常規(guī)鏡檢的所有項目。因此，該試劑卡能滿足臨床檢測和診斷需要，有一定的推廣價值。

［1］焦瑞寶，翟婷，唐吉斌，等.600 例婦科門診患者陰道分泌物微生態(tài)分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22（1）：112-113.

［2］董雪珂，呂云桂.陰道分泌物常規(guī)檢查與細菌性陰道病試驗盒聯(lián)合檢測的臨床意義［J］.臨床合理用藥，2012，5（11B）：94-95.

［3］黃云平，黃妙兒，劉紫荊，等.唾液酸酶校正和區(qū)分細菌性陰道病病原菌形態(tài)研究［J］.中國感染控制雜志，2006，5（4）：309-311.

［4］Brisdden AM，Monda BJ，Stevens CE，et al.Sialidases (neuraminidases) in bacterial vaginosis and bacteria vagi nosisassociated microflora［J］.J Clin Microbiol，1992，30（3）：632-636.

［5］Schoonmaker JN，Lunt BD，Lawellin DW，et al.A new proline aminopep tidase assay for diagnosis of bacterial vaginosis［J］.Am J Obstet Gynecol，1991，165（3）：737-742.

［6］張彥霞.細菌性陰道病實驗室檢查的幾種方法［J］.中國健康月刊，2009，11：64-66.

［7］Loiseau PM，Bories C，Sanon A.The chitinase system from Trichomonas vaginalis as a potential target for antimi2 crobial therapy of urogenital trichomoniasis［J］.Biomedicine and Pharmacotherapy，2002，56（10）：503-510.

［8］王則宇，王山梅，楊紅云，等.陰道炎五聯(lián)檢在白帶常規(guī)檢測中的應(yīng)用研究［J］.中國皮膚性病學(xué)雜志，2010，24（1）：91-93.