張小康 ，熊秋芳 ，陳玉霞 ，張雪清 ，李徳超 ，李世升

（1.武漢市蔬菜科學研究所，430345；2.湖北省農(nóng)科院農(nóng)產(chǎn)品加工與核農(nóng)技術研究所）

輻射誘變育種是獲得新種質(zhì)資源和選育新品種的有效途徑之一，其具有突變率高、突變譜寬、后代性狀穩(wěn)定快、育種周期短等優(yōu)點，且方法簡便，可在短時間內(nèi)改變植物的某一性狀。選擇合適的輻照劑量是輻射誘變育種的關鍵[1，2]。蘿卜（Raphanus sativusL.）是我國第二大蔬菜種植作物，年播種面積120余萬hm2，輻射育種在蘿卜中的應用國內(nèi)外報道甚少，本研究以6個常規(guī)蘿卜品種為試材，以60Co-γ射線為照射源，材料用不同劑量射線照射后在實驗室培養(yǎng)24～144 h，并統(tǒng)計發(fā)芽率，并用SPSS（Statistical package for the social science）19.0 軟件進行概率單位加權回歸法（Bliss法）計算蘿卜種子輻射誘變LD50[3]，最后通過田間種植比較試驗進行數(shù)據(jù)對比驗證。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗在武漢市蔬菜科學研究所十字花科研究室實驗室進行。6個蘿卜品種均為本研究室的高代自交系，品種名稱及特征特性見表1。

1.2 試驗方法

將蘿卜種子裝入牛皮紙袋內(nèi)，于2012年9月在湖北省農(nóng)科院農(nóng)產(chǎn)品加工與核農(nóng)技術研究所輻照中心進行輻射處理，輻射劑量共設18個處理，處理1（CK），0 Gy；處理 2，900 Gy；處理 3，1 100 Gy；處理4，1 300 Gy；處理 5，1 500 Gy；處理 6，1 700 Gy；處理7，1 900 Gy；處理 8，2 500 Gy；處理 9，3 000 Gy；處理10，3 500 Gy；處理 11，4 000 Gy；處理 12，5 000 Gy；處 理 13，6 000 Gy； 處 理 14，7 000 Gy； 處 理 15，8 000 Gy；處理 16，9 000 Gy；處理 17，10 000 Gy；處理18，20 000 Gy。將輻射處理及對照種子播于10 cm×10 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，以一層濾紙為發(fā)芽床，置于25℃的恒溫恒濕培養(yǎng)箱內(nèi)，每天通氣并注意保濕，每個品種每個劑量處理種子100粒，重復3次，于發(fā)芽24 h統(tǒng)計發(fā)芽率。

表1 各品種特征特性

表2 不同處理劑量下各品種24 h的發(fā)芽率

為進行數(shù)據(jù)對比，田間以C品種為樣本，將該蘿卜品種各誘變劑量及對照于2012年12月25日播種于日光溫室，按常規(guī)方法進行管理，觀察并統(tǒng)計各劑量下的發(fā)芽率、成苗率和畸形率。

2 結(jié)果與分析

2.1 統(tǒng)計過程

輸入表2數(shù)據(jù)的過程如下。運行SPSS 19.0軟件，進入SPSS數(shù)據(jù)編輯器后，首先激活變量表定義變量，在變量名下輸入“劑量”、“種子數(shù)”和“發(fā)芽率”，并將“劑量”的小數(shù)點位數(shù)設為“3”，“種子數(shù)”和“發(fā)芽率”的小數(shù)點位數(shù)設為“1”。然后進入數(shù)據(jù)表，根據(jù)表頭提示，依次輸入各組數(shù)據(jù)。在數(shù)據(jù)表主菜單中，選擇分析→回歸→Probit，調(diào)出Probit Analyze對話框，只需將“劑量”選入“協(xié)變量”欄中，“種子數(shù)”選入“總數(shù)”欄中，“發(fā)芽率”選入“響應頻率”欄中，在“轉(zhuǎn)換”欄中，選擇“以10為底的對數(shù)轉(zhuǎn)換”，其他保持默認選項。然后單擊“OK”鈕即可完成整個操作過程。

2.2 統(tǒng)計結(jié)果分析

通過SPSS回歸軟件分析會自動顯示全部分析結(jié)果，其中包括回歸方程參數(shù)表、不同劑量的試驗值和預期值概率表、從0.01～0.99致死的劑量（包括0.50，即 LD50）(表3）及 95%可信區(qū)間表，以及對數(shù)單位與概率單位的關系曲線圖。

經(jīng)過 SPSS統(tǒng)計分析，791蘿卜的LD50為2 459.298 Gy，大青頭蘿卜的LD50為1 602.770 Gy，短葉13蘿卜的 LD50為1 494.662 Gy，黃州蘿卜的LD50為1 431.329 Gy，扇子白蘿卜的LD50為3 162.271 Gy，蘭花子蘿卜的 LD50為 1 693.110 Gy。6個蘿卜品種種子的抗輻射能力依次為扇子白＞791＞蘭花子＞大青頭＞短葉13＞黃州。

2.3 田間試驗驗證

田間試驗結(jié)果表明，C品種（短葉13）的LD50為1 300～1 500 Gy，與SPSS軟件分析的 LD50=1 494.662 Gy吻合；另外，該輻照劑量區(qū)間處理下C品種的發(fā)芽率為60%～68%，成苗率為30%～54%，真葉畸形率為90%～100%，表明此劑量區(qū)間為最適誘變劑量區(qū)間，其既可以保證品種有大量的變異產(chǎn)生，同時也可以保證有足夠的篩選群體，是進行蘿卜輻射誘變育種的適合劑量。

表3 各品種Probit回歸分析輸出結(jié)果

3 小結(jié)

作為國際上著名的軟件，SPSS統(tǒng)計軟件不但具有強大完善的統(tǒng)計分析功能，同時還擁有完備的數(shù)據(jù)訪問、數(shù)據(jù)管理和數(shù)據(jù)呈現(xiàn)功能，不僅寫論文可以直接利用其結(jié)果，還可以用于演示文稿等，為使用者帶來了極大的便利。利用SPSS計算蘿卜種子輻射誘變半致死劑量，可靠性高，為蘿卜輻射育種提供了參考。

[1]陳子元.從輻射育種的發(fā)展來展望航天育種的前景[J].核農(nóng)學報，2002，16（5）：261-263.

[2]溫賢芳.中國核農(nóng)學的現(xiàn)狀及發(fā)展建議[J].核農(nóng)學報，2004，18（3）：164-169.

[3]雷濤，吳宜艷，單小雙，等.SPSS 13.0計算茵陳湯加減小鼠急性毒理LD50試驗 [J].牡丹江醫(yī)學院學報，2008，29（6）：62-63.