王小元 ， 宋鴻軍

（1.食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實驗室 江南大學(xué)，江蘇 無錫 214122；2.食品安全與營養(yǎng)協(xié)同創(chuàng)新中心 江南大學(xué)，江蘇 無錫214122；3.廊坊衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院，河北 廊坊 065001）

細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞外膜的主要組分，又名脂多糖 （LPS），主要由Kdo2-類脂A（Kdo2-lipid A）、 核心糖 （Core）和 O-抗原 （O-antigen）重復(fù)單元3部分組成，其中Kdo2-lipid A基團(tuán)是內(nèi)毒素的主要活性成分[1]。革蘭氏陰性菌侵入宿主后會釋放其表層的內(nèi)毒素[2]。這些內(nèi)毒素可被免疫細(xì)胞表面的TLR4/MD2受體識別，在細(xì)胞內(nèi)引發(fā)一系列生化反應(yīng)，產(chǎn)生多種細(xì)胞因子[3]。這些細(xì)胞因子的種類和數(shù)量取決于內(nèi)毒素分子的精細(xì)結(jié)構(gòu)。有些細(xì)胞因子的過量積累能夠引起嚴(yán)重的內(nèi)毒素休克；而有些細(xì)胞因子的適量產(chǎn)生可以加強(qiáng)宿主的先天性免疫能力。所以，研究內(nèi)毒素的生物合成途徑及其結(jié)構(gòu)多樣性有助于開發(fā)新型的細(xì)菌疫苗和疫苗佐劑。

1 內(nèi)毒素分子最保守基團(tuán)Kdo2-lipid A的合成

內(nèi)毒素的主要活性成分Kdo2-lipid A基團(tuán)也是LPS分子的最保守部分。在革蘭氏陰性細(xì)菌的模式菌株大腸桿菌中，Kdo2-lipid A含有2個Kdo、2個氨基葡萄糖、2個磷酸基團(tuán)和6條脂肪酸鏈（圖1）。大腸桿菌Kdo2-lipid A的合成主要發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)膜內(nèi)層，先后涉及9個酶催化的9步反應(yīng)（圖1）。這9個酶存在于大多數(shù)變形桿菌中，具有較高的保守性[4]。Kdo2-lipid A的合成是從小分子UDP-氨基葡萄糖乙酸酐（UDP-GlcAc）開始的。前3步反應(yīng)分別由可溶性蛋白酶LpxA、LpxC和LpxD催化，在UDP-GlcAc分子上加了2條脂肪酸鏈。LpxA和LpxD存在45%的序列相似性，有類似的三聚體結(jié)構(gòu)，但存在不同的四級結(jié)構(gòu)和活性位點(diǎn)[5-6]。因為LpxA催化的第1步反應(yīng)是可逆反應(yīng)，所以LpxC催化的第2步反應(yīng)成為Kdo2-lipid A合成的第一個關(guān)鍵步驟，決定著內(nèi)毒素分子的合成效率。第4步反應(yīng)由膜外周蛋白酶LpxH將UDP-GlcAc的UDP分解，形成Lipid X分子。第5步反應(yīng)由膜外周蛋白酶LpxB將Lipid X及其前體分子聚合；接著磷酸激酶LpxK在4′位上添加1個磷酸基團(tuán)，形成Lipid IVA分子。第7步反應(yīng)由膜蛋白KdtA在Lipid IVA分子的6′位上連續(xù)加2個Kdo基團(tuán)；最后膜蛋白LpxL和LpxM先后在2′和3′位上分別加上1個二級脂肪酸鏈，形成Kdo2-lipid A分子（圖1）。

在Kdo2-lipid A的合成過程中，各種酶的疏水性與其所催化反應(yīng)的底物分子結(jié)構(gòu)相吻合。最初反應(yīng)底物是水溶性的UDP-GlcNAc，所以用到的酶LpxA、LpxC和LpxD均為水溶性蛋白。隨著反應(yīng)的進(jìn)行，底物分子中的脂肪酸鏈越來越多，逐漸變成兼性分子，所以反應(yīng)也轉(zhuǎn)移到膜上進(jìn)行，催化這些反應(yīng)的酶LpxK、KdtA、LpxL和LpxM等也均為膜蛋白。參與Kdo2-lipid A合成的酶專一性都很強(qiáng)，參加反應(yīng)順序也很嚴(yán)格。比如，LpxA和LpxD雖然都能催化?；磻?yīng)，卻不能互換使用；?；窵pxL和LpxM必須等KdtA加完兩個Kdo之后，才能分別將第5和第6個脂肪酸鏈添加上去。Kdo2-lipid A的合成效率受到膜蛋白降解酶FtsH的調(diào)控[7]。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)Kdo2-lipid A過量時，F(xiàn)tsH通過降解關(guān)鍵酶LpxC和KdtA來降低其合成速度[8]。

2 內(nèi)毒素分子跨越細(xì)胞的內(nèi)膜和外膜

當(dāng)Kdo2-lipid A的合成在內(nèi)膜內(nèi)層完成后，約10個左右的酶依次將一些單糖基團(tuán)連接上去，形成Core-lipid A（圖2）。接著，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白MsbA將Corelipid A從內(nèi)膜的內(nèi)側(cè)轉(zhuǎn)運(yùn)到內(nèi)膜的外側(cè)[9]。O-antigen也是在內(nèi)膜的內(nèi)側(cè)合成、被連接到細(xì)菌萜醇上，并通過轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Wzx翻轉(zhuǎn)到內(nèi)膜的外側(cè)[10]。

在周質(zhì)空間中，聚合酶Wzy和Wzz首先將O-antigen聚合，然后連接酶WaaL將O-antigen重復(fù)單元連接到Core-lipid A上，組裝成完整的LPS[15]。接下來，LPS運(yùn)輸系統(tǒng)（Lpt）負(fù)責(zé)將LPS從內(nèi)膜外層轉(zhuǎn)運(yùn)到外膜外層[11]。Lpt系統(tǒng)由7個蛋白質(zhì)（LptA、LptB、LptC、LptD、LptE、LptF 和 LptG）組成，有的分布在內(nèi)膜，有的分布在周質(zhì)空間，有的分布在外膜。LptB、LptC、LptF和LptG以復(fù)合體LptBCFG的形式存在，其中LptC的作用就像是周質(zhì)蛋白LptA的錨。LptA可以結(jié)合LPS，并將其從內(nèi)膜外層轉(zhuǎn)運(yùn)給位于外膜內(nèi)層的膜蛋白LptD。LptD與脂蛋白LptE一起將LPS從外膜內(nèi)層轉(zhuǎn)運(yùn)到外膜外層。Lpt系統(tǒng)中的7個蛋白質(zhì)可能以一個從內(nèi)膜到外膜橫跨周質(zhì)空間的復(fù)合體存在，協(xié)調(diào)一致地轉(zhuǎn)運(yùn)LPS[12]。

3 內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)多樣性

為適應(yīng)不斷變化的外界環(huán)境，一些革蘭氏陰性細(xì)菌進(jìn)化出改變內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)的機(jī)制。由于內(nèi)毒素的主要活性成分是Kdo2-lipid A基團(tuán)，所以有關(guān)Kdo2-lipid A分子結(jié)構(gòu)多樣性的研究比較集中。許多革蘭氏陰性菌的基因組中都存在像大腸桿菌一樣編碼合成Kdo2-lipid A的9個酶的基因，所以內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)的改變主要由其它基因編碼的酶引起。這些能改變內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)的酶多數(shù)位于內(nèi)膜，但也有位于外膜的。

不同細(xì)菌內(nèi)毒素分子脂肪酸鏈的數(shù)目和長度會有差異。固氮菌內(nèi)毒素分子的2′位上有1條含有32個碳的超長次級脂肪酸，有利于其生存在豆科植物根部[13]。低溫條件下，大腸桿菌中的LpxP[14]取代LpxL在 Kdo2-lipid A的 2′位上加了 1條不飽和C16次級脂肪酸，而弗朗西斯菌中的LpxD2[15]取代LpxD1在內(nèi)毒素分子的2和2′位上加了1條較短的3-OH脂肪酸。有氧條件下，沙門氏菌細(xì)胞內(nèi)膜上的酶LpxO以Fe2+和α-酮戊二酸為輔助因子在3?位的次級脂肪酸鏈上引入1個羥基[16]。存在高濃度Ca2+的情況下，沙門氏菌和幽門螺旋桿菌中存在LpxR可以去除內(nèi)毒素分子 3′位上的脂肪酸鏈[17]。

圖2 大腸桿菌內(nèi)毒素分子的合成及跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)示意圖Fig.2 Biosynthesis and transport of endotoxin molecules in E.coli.

不同細(xì)菌內(nèi)毒素分子上的磷酸基團(tuán)會被修飾。弗朗西斯菌、根瘤菌和幽門螺旋桿菌的LpxE能特異性地去除內(nèi)毒素分子1位上的磷酸基團(tuán)[18]。有氧條件下，根瘤菌外膜蛋白LpxQ可以在LpxE脫1位磷酸的基礎(chǔ)上將氨基葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)?-氨基葡萄糖酸[19]。Kdo2-lipid A分子4′位的磷酸基團(tuán)可以被在弗朗西斯菌發(fā)現(xiàn)的磷酸酶LpxF特異性地去除[20]。LpxF缺失突變的弗朗西斯菌不再具有侵染小鼠的能力，說明內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)的修飾與細(xì)菌的致病能力密切相關(guān)[21]。LpxT利用十一異戊烯醇焦磷酸為供體在Kdo2-lipid A基團(tuán) 1位磷酸基團(tuán)上添加第二個磷酸基團(tuán)形成焦磷酸結(jié)構(gòu)[22]。鉤端螺旋體中LmtA可以將S-腺苷甲硫氨酸的甲基轉(zhuǎn)移至Kdo2-lipid A的1位磷酸基團(tuán)上[23]。沙門氏菌EptA在Kdo2-lipid A基團(tuán)的1位磷酸基團(tuán)上添加磷酸乙醇胺[24]，其表達(dá)受PmrA-PmrB二元系統(tǒng)調(diào)控[25]。PmrB是位于細(xì)胞膜上的感受蛋白，而PmrA是位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的響應(yīng)蛋白。PmrB可以感受環(huán)境中高濃度的Fe3+和低pH，并通過PmrA激活特定基因的轉(zhuǎn)錄。幽門螺旋桿菌EptA在Kdo2-lipid A分子的1位上用磷酸乙醇胺取代了原來的磷酸基團(tuán)[26]。幽門螺旋桿菌中還存在一個具有雙重功能的EptC，它不僅在Kdo2-lipid A分子的1位或4′上加磷酸乙醇胺，而且在鞭毛蛋白FlgG也能添加磷酸乙醇胺[27]。ArnT將L-Ara4N從特定供體轉(zhuǎn)移至內(nèi)毒素分子1位或4′位的磷酸基團(tuán)上[28]。弗朗西斯菌的1位磷酸基團(tuán)被半乳糖胺基團(tuán)用同樣的機(jī)制所修飾，ArnT的同源蛋白FlmK催化完成半乳糖胺基團(tuán)的轉(zhuǎn)移[29]。

內(nèi)毒素分子的Kdo基團(tuán)也可以被修飾。固氮菌中RgtA和RgtB可以分別在Kdo2-lipid A分子上的外Kdo基團(tuán)上加上一個半乳糖醛酸（GalA）[30]；大腸桿菌中EptB也可以在Kdo′-lipid A分子上的外Kdo基團(tuán)上加上一個磷酸乙醇胺[31]。

位于細(xì)胞外膜可以改變內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)的酶主要有PagP和PagL。沙門氏菌中位于細(xì)胞外膜的?；D(zhuǎn)移酶PagP可以將磷脂的C16碳脂肪酸鏈轉(zhuǎn)移到內(nèi)毒素分子的2位脂肪酸鏈上，形成1條次級脂肪酸鏈。PagP產(chǎn)生的含有7條脂肪酸鏈的內(nèi)毒素可以干擾TLR4的識別，使細(xì)菌對陽離子抗菌肽產(chǎn)生抗性[32]。PagP的活性位點(diǎn)朝向細(xì)胞外膜外側(cè)[33]，通常情況下PagP在細(xì)胞膜中表達(dá)水平低且沒有活性。當(dāng)外膜外層結(jié)構(gòu)遭到破壞而外膜滲透性增加時，外膜內(nèi)層的磷脂會向外膜外側(cè)轉(zhuǎn)運(yùn)，為PagP提供脂肪酸供體，同時PagP被迅速激活，修飾內(nèi)毒素分子的結(jié)構(gòu)來快速修復(fù)外膜滲透性。PagP的轉(zhuǎn)錄水平受PhoP-PhoQ調(diào)控[34]。PhoQ是位于細(xì)胞膜上的感受蛋白，而PhoP是位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的響應(yīng)蛋白。PhoQ可以感受環(huán)境中陽離子抗菌肽、低pH和低濃度的二價陽離子等。PagL是細(xì)胞外膜上的一種脫?；?，能特異性地水解去除內(nèi)毒素分子3位上的脂肪酸鏈，使其不被TLR4識別，有利于細(xì)菌躲避宿主免疫系統(tǒng)的攻擊[35]。PagL的蛋白結(jié)構(gòu)與PagP類似，也受PhoP-PhoQ二元系統(tǒng)和細(xì)菌外膜滲透性的調(diào)控。沙門氏菌Kdo2-lipid A分子上L-Ara4N的存在可以抑制PagL的活性[36]。PagL細(xì)胞外側(cè)一些特定的氨基酸序列可以識別L-Ara4N修飾的Kdo2-lipid A，而活性位點(diǎn)之間相互結(jié)合形成二聚體可能是PagL失活的原因[37]。

4 內(nèi)毒素研究的應(yīng)用前景

內(nèi)毒素分子能夠通過TLR4/MD2刺激宿主先天性免疫系統(tǒng)，因此內(nèi)毒素結(jié)構(gòu)修飾的研究可為細(xì)菌疫苗和疫苗佐劑的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。一方面可以通過優(yōu)化其結(jié)構(gòu)開發(fā)疫苗佐劑[38]，另一方面可以將一些革蘭氏陰性病原菌的內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)優(yōu)化來開發(fā)減毒疫苗[39]。由于內(nèi)毒素分子位于細(xì)胞表層，它在維持革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞外膜滲透性和完整性中起主要作用。所以，通過定向改造內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)，可以改善革蘭氏陰性工業(yè)生產(chǎn)菌的細(xì)胞膜通透性，提高其生產(chǎn)效率。由于內(nèi)毒素分子通過影響細(xì)菌細(xì)胞外膜的完整性來決定細(xì)菌的存亡，其合成和轉(zhuǎn)運(yùn)過程中所涉及到的各種關(guān)鍵蛋白可以被作為靶點(diǎn)來開發(fā)新型抗菌素[40]。

[1]WANG X，Quinn P J.Lipopolysaccharide：Biosynthetic pathway and structure modification[J].Progress in Lipid Research，2010，49：97-107.

[2]Ellis T N，Kuehn M J.Virulence and immunomodulatory roles of bacterial outer membrane vesicles[J].Microbiology Molecular Biology Review，2010，74：81-94.

[3]Maeshima N，F(xiàn)ernandez R C.Recognition of lipid A variants by the TLR4-MD-2 receptor complex[J].Frontiers in Cellular and Infection Microbiology，2013；3：3.

[4]Opiyo S O，Pardy R L，Moriyama H.Evolution of the Kdo2-lipid A biosynthesis in bacteria[J].BMC Evolution Biology，2010，10：362-375.

[5]Williams A H，Raetz C R.Structural basis for the acyl chain selectivity and mechanism of UDP-N-acetylglucosamine acyltransferase[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2007，104：13543-13550.

[6]Bartling C M，Raetz C R.Crystal structure and acyl chain selectivity of Escherichia coli LpxD，the N-acyltransferase of lipid A biosynthesis[J].Biochemistry，2009，48：8672-8683.

[7]Langklotz S，Baumann U，Narberhaus F.Structure and function of the bacterial AAA protease FtsH[J].Biochimica et Biophysica Acta，2012，1823：40-48.

[8]Langklotz S，Schakermann M，Narberhaus F.Control of lipopolysaccharide biosynthesis by FtsH-mediated proteolysis of LpxC is conserved in enterobacteria but not in all gram-negative bacteria[J].Journal of Bacteriology，2011，193：1090-1097.

[9]Doshi R，Ali A，Shi W，et al.Molecular disruption of the power stroke in the ATP-binding cassette transport protein MsbA[J].The Journal of Biological Chemistry，2013，288：6801-6813.

[10]Islam S T，Eckford P D，Jones M L，et al.Proton-dependent gating and proton uptake by wzx support o-antigen-subunit antiport across the bacterial inner membrane[J].MBio，2013，4（5）.doi：pii：e00678-13.10.1128/mBio.00678-13.

[11]Villa R，Martorana AM，Okuda S，et al.The Escherichia coli Lpt transenvelope protein complex for lipopolysaccharide export is assembled via conserved structurally homologous domains[J].Journal of Bacteriology，2013，195：1100-1108.

[12]Okuda S，F(xiàn)reinkman E，Kahne D.Cytoplasmic ATP hydrolysis powers transport of lipopolysaccharide across the periplasm in E.coli[J].Science，2012，338：1214-1217.

[13]Haag A F，Wehmeier S，Muszyński A，et al.Biochemical characterization of Sinorhizobium meliloti mutants reveals gene products involved in the biosynthesis of the unusual lipid A very long-chain fatty acid[J].Journal of Biological Chemistry，2011，286：17455-17466.

[14]Vorachek-Warren M K，CartyS M，Lin S，etal.An Escherichiacolimutantlackingthecold shock-induced palmitoleoyltransferase of lipid A biosynthesis：absence of unsaturated acyl chains and antibiotic hypersensitivity at 12 degrees C[J].Journal of Biological Chemistry，2002，277：14186-14193.

[15]Li Y，Powell D A，Shaffer S A，et al.LPS remodeling is an evolved survival strategy for bacteria[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2012，109：8716-8721.

[16]Gibbons H S，Reynolds C M，Guan Z，et al.An inner membrane dioxygenase that generates the 2-hydroxymyristate moiety of Salmonella lipid A[J].Biochemistry，2008，47：2814-2825.

[17]Rutten L，Mannie J P，Stead C M，et al.Active-site architecture and catalytic mechanism of the lipid A deacylase LpxR of Salmonella typhimurium[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2009，106：1960-1964.

[18]Wang X，Karbarz M J，McGrath S C，et al.MsbA transporter-dependent lipid A 1-dephosphorylation on the periplasmic surface of the inner membrane：topography of Francisella novicida LpxE expressed in Escherichia coli[J].Journal of Biological Chemistry，2004，279：49470-49478.

[19]Que-Gewirth N L S，Karbarz M J，Kalb S R，et al.Origin of the 2-amino-2-deoxy-gluconate unit in Rhizobium leguminosarum lipid A.Expression cloning of the outer membrane oxidase LpxQ[J].Journal of Biological Chemistry，2003，278：12120-12129.

[20]Wang X，McGrath S C，Cotter R J，et al.Expression cloning and periplasmic orientation of the Francisella novicida lipid A 4'-phosphatase LpxF[J].Journal of Biological Chemistry，2006，281：9321-9330.

[21]Wang X，Ribeiro A A，Guan Z，et al.Attenuated virulence of a Francisella mutant lacking the lipid A 4'-phosphatase[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2007，104：4136-4141.

[22]Herrera C M，Hankins J V，Trent M S.Activation of PmrA inhibits LpxT-dependent phosphorylation of lipid A promoting resistance to antimicrobial peptides[J].Molecular Microbiology，2010，76：1444-1460.

[23]Boon Hinckley M，Reynolds C M，Ribeiro A A，et al.A Leptospira interrogans enzyme with similarity to yeast Ste14p that methylates the 1-phosphate group of lipid A[J].Journal of Biological Chemistry，2005，280：30214-30224.

[24]Lee H，Hsu FF，Turk J.The PmrA-regulated pmrC gene mediates phosphoethanolamine modification of lipid A and polymyxin resistance in Salmonella enterica[J].Journal of Bacteriology,2004，186：4124-4133.

[25]Winfield M D，Groisman E A.Phenotypic differences between Salmonella and Escherichia coli resulting from the disparate regulation of homologous genes[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2004，101：17162-17167.

[26]Tran A X，Whittimore J D，Wyrick P B，et al.The lipid A 1-phosphatase of Helicobacter pylori is required for resistance to the antimicrobial peptide polymyxin[J].Journal of Bacteriology，2006，188：4531-4541.

[27]Cullen T W，Trent M S.A link between the assembly of flagella and lipooligosaccharide of the Gram-negative bacterium Campylobacter jejuni[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2010，107：5160-5165.

[28]Yan A，Guan Z，Raetz C R.An undecaprenyl phosphate-aminoarabinose flippase required for polymyxin resistance in Escherichia coli[J].Journal of Biological Chemistry，2007，282：36077-36089.

[29]Wang X，Ribeiro A A，Guan Z，et al.Identification of undecaprenyl phosphate-beta-D-galactosamine in Francisella novicida and its function in lipid A modification[J].Biochemistry，2009，48：1162-1172.

[30]Kanjilal-Kolar S，Basu S S，Kanipes M I，et al.Expression cloning of three Rhizobium leguminosarum lipopolysaccharide core galacturonosyltransferases[J].Journal of Biological Chemistry，2006，281：12865-12878.

[31]Reynolds C M，Kalb S R，Cotter R J，et al.A phosphoethanolamine transferase specific for the outer 3-deoxy-D-mannooctulosonic acid residue of Escherichia coli lipopolysaccharide.Identification of the eptB gene and Ca2+hypersensitivity of an eptB deletion mutant[J].Journal of Biological Chemistry，2005，280：21202-21211.

[32]Bishop R E，Gibbons H S，Guina T，et al.Transfer of palmitate from phospholipids to lipid A in outer membranes of gramnegative bacteria[J].EMBO Journal，2000，19：5071-5080.

[33]Hwang P M，Choy W Y，Lo E I，et al.Solution structure and dynamics of the outer membrane enzyme PagP by NMR[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2002，99：13560-13565.

[34]Guo L，Lim K B，Gunn J S，et al.Regulation of lipid A modifications by Salmonella typhimurium virulence genes phoP-phoQ[J].Science，1997，276：250-253.

[35]Kawasaki K，Ernst R K，Miller S I.3-O-deacylation of lipid A by PagL，a PhoP/PhoQ-regulated deacylase of Salmonella typhimurium，modulates signaling through Toll-like receptor 4[J].Journal of Biological Chemistry，2004，279：20044-20048.

[36]Kawasaki K，China K，Nishijima M.Release of the lipopolysaccharide deacylase PagL from latency compensates for a lack of lipopolysaccharide aminoarabinose modification-dependent resistance to the antimicrobial peptide polymyxin B in Salmonella enterica[J].Journal of Bacteriology，2007，189：4911-4919.

[37]Rutten L，Geurtsen J，Lambert W，et al.Crystal structure and catalytic mechanism of the LPS 3-O-deacylase PagL from Pseudomonas aeruginosa[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of USA，2006，103：7071-7076.

[38]Han Y，Li Y，Chen J，et al.Construction of monophosphoryl lipid A producing Escherichia coli mutants and comparison of immuno-stimulatory activities of their lipopolysaccharides[J].Marine Drugs，2013，11：363-376.

[39]Kong Q，Six D A，Roland K L，et al.Salmonella synthesizing 1-monophosphorylated lipopolysaccharide exhibits low endotoxic activity while retaining its immunogenicity[J].Journal of Immunology，2011，187：412-423.

[40]Zhang J，Zhang L，Li X，et al.UDP-3-O-（R-3-hydroxymyristoyl）-N-acetylglucosamine deacetylase （LpxC）inhibitors：a new class of antibacterial agents[J].Current Medicinal Chemistry，2012；19（13）：2038-50.