袁秀芝 潘細(xì)貴

1華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院，武漢 430077

2武漢大學(xué)人民醫(yī)院藥學(xué)部，武漢 430060

消炎抗菌膠囊與消炎抗菌片的黃芩苷體外溶出性比較研究

袁秀芝1潘細(xì)貴2

1華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院，武漢 430077

2武漢大學(xué)人民醫(yī)院藥學(xué)部，武漢 430060

目的探討消炎抗菌膠囊中黃芩苷的體外溶出度及溶出動(dòng)力學(xué)。方法分別采用槳法和轉(zhuǎn)籃法，以消炎抗菌片為參比制劑，用HPLC法測(cè)定消炎抗菌膠囊在pH 1.0、2.8、4.5、6.8溶液及水5種不同溶出介質(zhì)中黃芩苷的累積溶出度，并分別用零級(jí)釋放模型、單指數(shù)模型、對(duì)數(shù)正態(tài)分布模型及威布爾分布函數(shù)進(jìn)行溶出動(dòng)力學(xué)模擬。結(jié)果消炎抗菌膠囊中黃芩苷的溶出受pH值影響較大，在pH 6.8時(shí)溶出較完全，溶出過(guò)程以對(duì)數(shù)正態(tài)分布模型擬合最佳。與消炎抗菌片比較，消炎抗菌膠囊體外溶出速率較快，且能達(dá)到的最大溶出百分率。結(jié)論消炎抗菌膠囊中黃芩苷在pH 6.8時(shí)體外溶出動(dòng)力學(xué)符合對(duì)數(shù)正態(tài)分布模型，溶出比較完全。

消炎抗菌膠囊； 黃芩苷； 溶出度； 高效液相色譜

消炎抗菌膠囊是在消炎抗菌片[1]基礎(chǔ)上進(jìn)行劑型改革研制而成，該制劑是由石榴皮、地榆和黃芩三味中藥組成的復(fù)方制劑，具有消炎抗菌作用，臨床上用于治療上呼吸道感染、扁桃體感染、尿路感染及菌痢，療效顯著。由于消炎抗菌片在制備時(shí)使用了較多生藥原料，服用劑量大，且時(shí)常出現(xiàn)崩解度不合格的現(xiàn)象。本課題根據(jù)原處方改進(jìn)提純工藝，制成膠囊劑。黃芩苷是本方中黃芩的主要成分，它不僅有抗炎抗變態(tài)作用，而且有抗菌作用[2]。筆者采用HPLC法，以黃芩中的黃芩苷為指標(biāo)，對(duì)消炎抗菌膠囊與消炎抗菌片在不同溶出介質(zhì)中黃芩苷的溶出度及溶出動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究，為消炎抗菌膠囊的臨床合理用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并為進(jìn)一步臨床藥理研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 儀器與藥品

高效液相色譜儀、P680HPLC泵、UVD170U紫外檢測(cè)器、Chromeleon色譜工作站(美國(guó)DIONEX公司)；SK3200LH超聲清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)；ZRS-4智能溶出試驗(yàn)儀(天津大學(xué)無(wú)線電廠)；PHS-25型酸度計(jì)(上海分析儀器廠無(wú)錫分廠)；黃芩苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：714-200010)；甲醇(色譜純，美國(guó)TEDIA有限公司)；磷酸(分析純，武漢化學(xué)試劑廠)；消炎抗菌膠囊(武漢大學(xué)人民醫(yī)院藥學(xué)部)；消炎抗菌片(武漢大學(xué)人民醫(yī)院藥學(xué)部)。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)方案 采用槳法和轉(zhuǎn)籃法，分別用水、pH 1.0鹽酸溶液、pH 2.8鹽酸溶液、pH 4.5乙酸銨-乙酸溶液、pH 6.8磷酸緩沖溶液600 ml作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 rpm，溫度為(37.0±0.5) ℃，膠囊分別于10、15、20、30、40、60、80、120、150、180、210、240 min取出1 ml，片劑分別于30、60、90、120、150、180、240、300、360 min取出1 ml，并立即補(bǔ)充同溫度新鮮介質(zhì)1 ml，取出液濾過(guò)，續(xù)濾液照樣品測(cè)定的方法測(cè)定，計(jì)算黃芩苷的累積溶出百分率。

1.2.2 色譜條件 色譜柱：ASM-Kromasil-C18(4.6 mm×200.0 mm，5.0 μm)，流動(dòng)相：甲醇：0.2%磷酸溶液(50：50)，檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm，柱溫：25 ℃，流速：1.0 ml/min。

1.2.3 溶液的制備 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取黃芩苷對(duì)照品40 mg置于100 ml量瓶中，加入甲醇，超聲10 min使其溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。將此標(biāo)準(zhǔn)溶液依次制成0.200、0.625、1.250、5.000、10.000、20.000、40.000、80.000 μg/ml的黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)溶液。供試品溶液的制備：取消炎抗菌膠囊和消炎抗菌片在介質(zhì)中某時(shí)刻的渾濁液1 ml，經(jīng)0.45 μl微孔濾膜濾過(guò)后，取續(xù)濾液即得。

陰性對(duì)照溶液的制備：按處方除去黃芩后，照制備工藝制備陰性消炎抗菌膠囊，然后按“供試品溶液的制備”方法處理，即得。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取已制備的各濃度對(duì)照品溶液，依照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005版一部附錄VID)，注入高效液相色譜，各進(jìn)樣20 μl，測(cè)定峰面積，以黃芩苷的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸處理，黃芩苷的回歸方程：Y=1.766 2X-0.226 9(r=0.999 9)。

2 結(jié)果

2.1 線性關(guān)系

表明黃芩苷在0.20～80.00 μg/ml濃度范圍內(nèi)呈很好的線性關(guān)系。

2.2 精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取消炎抗菌膠囊的溶出液，進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，RSD為0.91%。取同一批號(hào)消炎抗菌膠囊，按溶出度測(cè)定方法重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算溶出量，RSD為1.28%。

2.3 回收率實(shí)驗(yàn)

將同一批號(hào)消炎抗菌膠囊，平分6份，測(cè)定峰面積，根據(jù)線性回歸方程計(jì)算含量，結(jié)果消炎抗菌膠囊的平均回收率為99.02%，RSD為1.21%。

2.4 樣品測(cè)定

取消炎抗菌膠囊的溶出液，經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過(guò)后，取續(xù)濾液，按照高效液相色譜條件測(cè)定，進(jìn)樣20 μl，得到峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出該樣品在該時(shí)刻的濃度，推算出黃芩苷的累積溶出百分率。見(jiàn)圖1。

A：黃芩苷對(duì)照品； B：消炎抗菌膠囊； C：陰性對(duì)照品

2.5 消炎抗菌膠囊與消炎抗菌片黃芩苷的體外溶出曲線

分別采用轉(zhuǎn)籃法與槳法檢測(cè)得出，消炎抗菌膠囊與消炎抗菌片在水和在pH為1.0、2.8、4.5、6.8的溶出介質(zhì)中的累積溶出百分率的溶出曲線。見(jiàn)圖2。

A：膠囊采用轉(zhuǎn)籃法；B：膠囊采用槳法；C：片劑采用轉(zhuǎn)籃法；D：片劑采用槳法

2.6 溶出動(dòng)力學(xué)模擬

運(yùn)用零級(jí)釋放模型、單指數(shù)模型、對(duì)數(shù)正態(tài)分布模型以及威布爾分布模型對(duì)消炎抗菌膠囊和消炎抗菌片的累積溶出度數(shù)據(jù)進(jìn)行了擬合。見(jiàn)表1-4。

3 討論

根據(jù)研究文獻(xiàn)[3-6]，本實(shí)驗(yàn)選擇水、pH 1.0鹽酸溶液、pH 2.8鹽酸溶液、pH 4.5乙酸銨-冰乙酸溶液、pH 6.8磷酸緩沖鹽溶液作為溶出介質(zhì)。消炎抗菌膠囊和消炎抗菌片中黃芩苷在酸性條件下，溶出的速度較慢，且隨著酸性的增強(qiáng)，在同一時(shí)刻有累積溶出百分率減小的趨勢(shì)。

表1 采用轉(zhuǎn)籃法消炎抗菌膠囊中黃芩苷的溶出度擬合結(jié)果

表3 采用轉(zhuǎn)籃法消炎抗菌片中黃芩苷的溶出度擬合結(jié)果

表4 采用槳法消炎抗菌片中黃芩苷的溶出度擬合結(jié)果

對(duì)于消炎抗菌膠囊，黃芩苷在各種介質(zhì)中累積溶出百分率由小到大依次為pH 1.0lt;pH 2.8lt;pH 4.5lt;水lt;pH 6.8；對(duì)于消炎抗菌片，黃芩苷在各種介質(zhì)中累積溶出百分率由小到大依次pH 1.0lt;pH 2.8≈水lt;pH 6.8lt;pH4.5。對(duì)于膠囊劑，pH的變化對(duì)于制劑中黃芩苷的溶出影響較大，240 min時(shí)最大值與最小值之差約為80%；而對(duì)于片劑，pH的變化對(duì)于制劑中黃芩苷的溶出影響較小，240 min時(shí)最大值與最小值之差約為40%。這可能由于片劑崩解緩慢，而崩解是黃芩苷溶出的首要限速過(guò)程。在1 h內(nèi)，只有消炎抗菌膠囊在pH 6.8的溶出介質(zhì)下，黃芩苷的累積溶出百分率超過(guò)了50%；而消炎抗菌片的數(shù)值均遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于50%，這表明制成膠囊劑比制成片劑好。

通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)籃法與槳法進(jìn)行比較，從整體上看，采用漿法優(yōu)于轉(zhuǎn)籃法。只有在溶出介質(zhì)為水的條件下，對(duì)于消炎抗菌膠囊，轉(zhuǎn)籃法優(yōu)于漿法，且在4 h時(shí)兩者的累積溶出百分率差別最大，達(dá)到13%，這是何種原因造成的，有待進(jìn)一步分析。采用轉(zhuǎn)籃法時(shí)，大量藥粉沉積于杯底，可能對(duì)黃芩苷的溶出造成一定影響。

本實(shí)驗(yàn)以零級(jí)釋放模型、單指數(shù)模型、對(duì)數(shù)正態(tài)分布模型及威布爾分布模型分別對(duì)消炎抗菌膠囊與消炎抗菌片的累積溶出度數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，在不同pH環(huán)境中相關(guān)系數(shù)r差異較大，結(jié)果表明，膠囊中黃芩苷在pH 6.8時(shí)，其體外溶出以對(duì)數(shù)正態(tài)分布模型擬合最佳；片劑中黃芩苷在pH 4.5時(shí)，其體外溶出以單指數(shù)模型擬合最佳。

為了控制工藝的穩(wěn)定性，對(duì)消炎抗菌膠囊的體外溶出度進(jìn)行考核時(shí)，溶出介質(zhì)采用pH 6.8磷酸緩沖液，溶出方式采用漿法，45 min黃芩苷的累積溶出量不低于標(biāo)示量的70%。本實(shí)驗(yàn)為消炎抗菌膠囊的臨床合理用藥和提高療效提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)進(jìn)一步的臨床藥理研究提供參考。

[1]楊克釗，何光明，蔡鴻生.醫(yī)院制劑與檢驗(yàn)[M].武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，1995：308-309.

[2]季宇彬.中藥有效成分藥理與應(yīng)用[M].哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1995：203.

[3]陳燕軍，趙小妹，臧琛，等.黃芩清肺分散片中黃芩苷的體外溶出度研究[J].中南藥學(xué)，2003，1(2)：86-88.

[4]雷敬衛(wèi)，董耀允.牛黃解毒片中黃芩苷的溶出度考察[J].河南中醫(yī)藥學(xué)刊，2002，17(4)：22-23.

[5]馬麗萍，徐朝暉，邱明豐，等.降糖益腎膠囊的溶出度研究[J].中國(guó)中藥雜志，2007，32(8)：754-756.

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ComparativeStudyonBaicalinDissolutionRatesinVitroofXiaoyankangjunCapsulesandXiaoyankangjunTablets

YUAN Xiuzhi1，PAN Xigui2

1LiyuanHospitalofTongjiMedicalCollegeofHuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430077，China

2DepartmentofPharmacy，ReminHospitalofWuhanUniversity，Wuhan430060，China

ObjectiveTo determine the in vitro dissolution rate of baicalin in Xiaoyankangjun capsules.MethodsA reversed-phase HPLC method was developed to determine the in vitro dissolution rate of baicalin.Xiaoyankangjun capsules was compared with Xiaoyankangjun tablets in the dissolution medium in the dissolution medium when the pH values were 1.0，2.8，4.5，6.8 and water by paddle method and rolling basket method.Zero-class model，single-index model，logarithm normal school model，and Weibull distributing model were used to imitate the dissolution curve.ResultsThe dissolution rate of Xiaoyankangjun capsules was affected greatly by the pH and dissolve completely when the pH was 6.8.The dissolution rate in vitro imitation in logarithm normal school model was the best.Xiaoyankangjun capsules had the faster dissolution speed and the higher dissolution rate in vitro than Xiaoyankangjun tablets.ConclusionThe in vitro dissolution rate of baicalin in Xiaoyankangjun capsules conforms to logarithm normal school model when the pH of the dissolution medium is 6.8.

Xiaoyankangjun capsules； baicalin； dissolution rate； HPLC

10.3969/j.issn.1674-4616.2013.04.005

2013-06-16