肖 艷，肖振君

（1.山西省腫瘤醫(yī)院，山西 太原 030013；2.山西省中醫(yī)院，山西 太原 030012）

肺癌是目前世界上發(fā)病率和死亡率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。有研究報(bào)道，近年來肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，而且男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的第1 位。肺癌的病因至今尚不完全明確，有的研究證明，長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系，長期大量吸煙者患肺癌的概率是不吸煙者的10～20倍，而且吸煙開始的年齡越小，患肺癌的概率越高。在我國，隨著社會老齡化，在肺癌的發(fā)病群體中，每年約有30%70 歲以上的老人診斷為肺癌［1］，而老年患者體質(zhì)弱，內(nèi)科基礎(chǔ)疾病多，多合并重要臟器功能衰退，且免疫功能低下，不能耐受手術(shù)、放化療這些傳統(tǒng)治療方案，因此需要給予中藥抗腫瘤治療及最佳支持治療。消癌平注射液為烏骨藤提取物，是臨床常用的中藥抗腫瘤藥物，經(jīng)臨床研究證實(shí)療效確切。近年來DC-CIK 細(xì)胞療法經(jīng)過很多臨床研究被證實(shí)為新一代抗腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療的首選方案。經(jīng)臨床篩選，我們在部分老年晚期非小細(xì)胞肺癌患者中選擇DC-CIK 過繼細(xì)胞免疫聯(lián)合消癌平注射液抗腫瘤治療，以期起到更好的療效，現(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下。

1 臨床資料

82 例病例均為我院近年來經(jīng)病理組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查確診為晚期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者，隨機(jī)分為兩組。對照組40 例，其中男21 例，女19例；年齡66 歲～80 歲，中位年齡71.3 歲；病理類型：腺癌26 例，鱗癌11 例，腺鱗癌3 例；臨床分期：ⅢB期25 例，Ⅳ期15 例；腦轉(zhuǎn)移5 例，骨轉(zhuǎn)移4 例，惡性胸腔積液3 例，肺轉(zhuǎn)移3 例；KPS 評分：60 分12 例，70 分23 例，80 分以上5 例。治療組42 例，其中男24 例，女18 例；年齡65 歲～84 歲，中位年齡73.5歲；病理類型：腺癌30 例，鱗癌10 例，腺鱗癌2 例；臨床分期：ⅢB 期29 例，Ⅳ期13 例；腦轉(zhuǎn)移2 例，骨轉(zhuǎn)移4 例，惡性胸腔積液5 例；KPS 評分：60 分15例，70 分23 例，80 分以上4 例。兩組病例在性別、年齡、臨床分期等方面經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有病例均為初次治療，血常規(guī)及肝腎功能檢查正常，無嚴(yán)重心臟病，預(yù)計(jì)生存期>3 個(gè)月。

2 治療方法

兩組病例均給予消癌平注射液（南京圣和藥業(yè)公司，國藥準(zhǔn)字Z20025868，20mL/支）60 mL 加入5%葡萄糖液500 mL 中靜脈滴注，1 次/d，共治療14 d。治療組在上述治療同時(shí)聯(lián)合DC-CIK 過繼細(xì)胞免疫治療。①DC-CIK 細(xì)胞制備及質(zhì)控：血液成分用COBE Spectra 血液成分分離機(jī)（美國Gambro BCT公司）采集單個(gè)核細(xì)胞，數(shù)量約1×108～3×108，加30 mLGT-T551 培養(yǎng)液［寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京）有限公司］，CO2培養(yǎng)箱孵育2 h，將懸浮細(xì)胞移出（用作CIK 誘導(dǎo)），向培養(yǎng)瓶中加入含1 000 U/mL 的注射用重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子（GM-CSF，廈門特寶生物工程股份有限公司）和1 000 U/mL 的白細(xì)胞介素-4（IL-4，Peprotech 公司）誘導(dǎo)DC，每3 d 換液1 次并補(bǔ)充相關(guān)細(xì)胞因子，第6 天加入相關(guān)細(xì)胞因子的同時(shí)加入注射用重組人干擾素-γ（IFN-γ，上海凱茂生物醫(yī)藥有限公司），誘導(dǎo)DC 成熟；懸浮細(xì)胞置于GT-T601 培養(yǎng)袋中，加入含有1 000 U/mL IFN-γ的GT-T551 培養(yǎng)基培養(yǎng)，24 h 后加入50 ng/mLCD3單克隆抗體（古巴分子免疫學(xué)中心生產(chǎn)）和1 000 U/mL 的重組人白介素-2 注射液（rhIL-2，北京四環(huán)生物制藥有限公司），每隔3 d 換液1 次，補(bǔ)充rhIL-2；第7 天收獲成熟DC 并與CIK 細(xì)胞共培養(yǎng)7 d～8 d，收獲細(xì)胞回輸。細(xì)胞質(zhì)量控制：收獲后細(xì)胞數(shù)量應(yīng)達(dá)到1×1010以上；臺盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞活力應(yīng)在80%以上；采用流式細(xì)胞學(xué)方法對采集物和培養(yǎng)物細(xì)胞免疫表型檢測；進(jìn)行細(xì)菌、真菌、支原體和內(nèi)毒素檢測，無菌試驗(yàn)。②DC-CIK 細(xì)胞回輸：將制備好的CIK 細(xì)胞溶于含5×105U IL-2、0.5%人血白蛋白的0.9%NaCl 溶液中回輸入患者體內(nèi)，每次回輸CIK 細(xì)胞數(shù)應(yīng)在為1.0×1010以上，30 d 為1 個(gè)周期，2 周期后評價(jià)療效，每位患者治療不少于2 周期。兩組病例分別于治療前及治療2 w 后分別檢測NK、NKT 細(xì)胞以及T 細(xì)胞亞群及按照WHO 抗癌藥物急性及亞急性毒性反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)評價(jià)毒性反應(yīng)，分為0～Ⅳ度。研究數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，以獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)進(jìn)行分析；同組治療前后數(shù)據(jù)以配對t檢驗(yàn)進(jìn)行分析，率的比較采用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 療效標(biāo)準(zhǔn)

3.1.1 近期療效評定 按照WHO 1981 年制定的實(shí)體瘤統(tǒng)一評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，療效分為完全緩解（CR），部分緩解（PR），穩(wěn)定（SD），進(jìn)展（PD），有效率（RR）為CR+PR 之和占治療觀察例數(shù)的百分比。

3.1.2 生活質(zhì)量評定標(biāo)準(zhǔn) 依據(jù)KPS 評分［2］，治療前后計(jì)分增加≥10 分為提高，降低≥10 分為下降，變化在10 分以內(nèi)為穩(wěn)定。

3.1.3 體重變化 參照抗腫瘤藥物常見毒性分級標(biāo)準(zhǔn)［3］，除外體腔積液、浮腫等因素引起的體重變化。好轉(zhuǎn)：體重增加>2 kg，并維持4 w 以上；穩(wěn)定：體重增加或減少<2 kg；惡化：體重減少>2 kg，持續(xù)4 w以上。

3.2 療效觀察

3.2.1 兩組病例治療后近期療效比較 結(jié)果見表1。

表1 兩組病例治療后近期療效比較 （例）

由表1 可以看出，對照組治療后近期療效有效率為35.0%，治療組治療后近期療效有效率為52.4%，兩組病例治療后近期療效比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3.2.2 兩組病例治療后生活質(zhì)量比較 結(jié)果見表2。

表2 兩組病例治療后生活質(zhì)量比較 ［例（%）］

3.2.3 體重變化 治療組體重增加者14 例，穩(wěn)定者18 例，體重減少者10 例；對照組體重增加者12 例，穩(wěn)定者17 例，減少者11 例。兩組病例治療后體重變化比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3.2.4 兩組及兩組治療前后NK 細(xì)胞、T 細(xì)胞亞群變化 治療組治療后NK、NKT 及CD3+、CD8+T 細(xì)胞比例明顯高于治療前（P<0.05）；治療組治療后較對照組治療后NK、NKT 及CD3+、CD8+T 細(xì)胞比例明顯增高。結(jié)果見表3。

4 討論

肺癌是嚴(yán)重威脅人類生命的惡性腫瘤之一，是全世界目前發(fā)病率和死亡率最高的癌癥。其中非小細(xì)胞肺癌約占80%，5 年生存率僅為15%，預(yù)后較差。肺癌的臨床表現(xiàn)比較復(fù)雜，癥狀和體征的有無、輕重以及出現(xiàn)的早晚，取決于腫瘤發(fā)生部位、病理類型、有無轉(zhuǎn)移及有無并發(fā)癥，以及患者的反應(yīng)程度和耐受性的差異。肺癌早期癥狀常較輕微，甚至可無任何不適。中央型肺癌癥狀出現(xiàn)早且重，周圍型肺癌癥狀出現(xiàn)晚且較輕，甚至無癥狀，常在體檢時(shí)被發(fā)現(xiàn)。姑息性化療是晚期非小細(xì)胞肺癌的常用治療手段，但化療藥物對腫瘤細(xì)胞的選擇性不高，在殺滅腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，抑制了機(jī)體免疫功能，而且全身用藥毒副作用較大，最常見得有惡心、嘔吐、食欲不振、骨髓抑制等毒副反應(yīng)，這些因素使很多老年及一般狀況較差的患者不能耐受而終止化療。因此，近年來提高患者生活質(zhì)量、延長患者帶瘤生存期已成為中晚期肺癌臨床治療和研究的獨(dú)立評價(jià)指標(biāo)和治療目的［4］。在此背景下，尋求一種對于晚期肺癌患者可行的、有效的治療手段尤為重要。

表3 兩組病例外周血T 細(xì)胞亞群的變化比較 （%，±s）

表3 兩組病例外周血T 細(xì)胞亞群的變化比較 （%，±s）

注：與本組治療前比較，1）P＜0.05；與對照組治療后比較，2）P＜0.05

過繼性細(xì)胞免疫治療（ACI）主要有樹突狀細(xì)胞（DC），細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）及細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞（CTL）等，是通過注射免疫活性細(xì)胞激發(fā)或調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境的抗腫瘤免疫力，從而控制和殺傷腫瘤細(xì)胞。DC 細(xì)胞是目前已知功能最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞，成熟DC 細(xì)胞可有效的誘導(dǎo)抗原特異性T 細(xì)胞增殖和活化，激活NK 及自然殺傷T 細(xì)胞（NKT）。CIK 細(xì)胞是在多種細(xì)胞因子的刺激下，兼具T 淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和自然殺傷（NK）細(xì)胞的廣譜的殺瘤優(yōu)點(diǎn)，被認(rèn)為是新一代腫瘤過繼性細(xì)胞免疫治療的首選方案［5-8］。

消癌平為中藥烏骨藤的精提取物?，F(xiàn)代植化分析認(rèn)為，其主要成分為多糖、皂苷和生物堿［9］，有抗炎、平喘、利尿等作用。晚期肺癌患者可出現(xiàn)咳嗽、氣喘、消瘦、浮腫等癥狀，威脅到患者的生活質(zhì)量。消癌平注射液可以一定程度上緩解晚期肺癌的癥狀。近年來的臨床研究也表明，消癌平注射液單獨(dú)給藥或與其他療法并用，都顯示出明顯的抗腫瘤效果。據(jù)報(bào)道用消癌平注射液單藥治療晚期肺癌，臨床獲益率達(dá)77.8%，有效率17.6%，均明顯高于對照組［10］。

在臨床工作中，我們對晚期非小細(xì)胞肺癌患者病情進(jìn)行綜合評估后選擇個(gè)體化治療方案，本文總結(jié)了82 例用DC-CIK 過繼性細(xì)胞免疫治療聯(lián)合消癌平和單純用消癌平患者的病例資料，統(tǒng)計(jì)結(jié)果提示，生物治療聯(lián)合消癌平對老年肺癌晚期患者提高治療有效率、改善生活質(zhì)量及調(diào)節(jié)患者細(xì)胞免疫方面有較大優(yōu)勢。在臨床工作中我們會進(jìn)一步研究和總結(jié)，以放化療為基礎(chǔ)，不斷認(rèn)識并利用過繼性細(xì)胞免疫治療作為腫瘤內(nèi)科重要治療手段的優(yōu)越性，吸取中醫(yī)藥的精髓，為腫瘤患者尋求更佳的治療方案。

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