董海偉

卡式微柱凝膠試驗在臨床輸血檢驗中的應用

董海偉

目的分析卡式微柱凝膠試驗在臨床輸血檢驗中的價值。方法選取本院收治的1288例住院患者進行抽血檢查，對血液樣品同時進行傳統(tǒng)方法與卡式微柱凝膠法檢驗血型。結(jié)果在1288例患者血液中用卡式微柱凝集法檢測到一次性正確率正定型為100.00%，反定型為99.84%。用鹽水法檢測出一次性正確率正定型為99.38%，反定型為98.76%。RhD型共10例，占0.78%。結(jié)論卡式微柱凝膠試驗加強臨床輸血安全保障。

卡式微柱凝膠；臨床輸血；檢驗

輸血工作的關(guān)鍵在于快速安全，但傳統(tǒng)血液配對方法卻不能滿足現(xiàn)代醫(yī)學的要求，所以許多學者對于臨床輸血檢驗進行探索試驗，發(fā)現(xiàn)卡式微柱凝膠試驗用于臨床輸血檢驗可以完全滿足現(xiàn)代醫(yī)學對于臨床輸血的要求。卡式微柱凝膠是一種免疫檢測血型血清的方法，其可以準確快速進行血液配對，而且污染率小，所需樣品劑量小[1]?？ㄊ轿⒅z試驗已經(jīng)逐漸取代傳統(tǒng)血型血清檢測方法應用于臨床輸血檢驗中，現(xiàn)將筆者對本院患者進行血液檢驗資料總結(jié)匯報如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取自2011年9月到2012年10月本院收治的住院患者共1288例，其中男685例，女603例，年齡13～72歲，平均年齡(32.1±14.2)歲。1288例患者均取肘靜脈血3 ml，加入肝素抗凝。

1.2檢測原理 血液中指示性紅細胞上包被中有抗人IgG抗體，抗體的Fc段可以與指示性細胞反應結(jié)合，如果待測血清中有抗血小板抗體就可以與這段結(jié)合形成復合物，加入交聯(lián)試劑后就可以聚通過合成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)?？ㄊ轿⒅z系統(tǒng)柱子具有一定離心力，起到分析篩選作用，網(wǎng)狀復合物可以與凝膠表面結(jié)合，就可分離紅細胞與復合物，而且凝膠與不同網(wǎng)狀復合物的結(jié)合程度不同，產(chǎn)生的陽性凝集陽性不同，進一步鑒別復合物。

1.3檢測方法 按照規(guī)范要求用鹽水在試管內(nèi)對正向定型與反向定型進行檢驗。取卡式凝膠管并做好標記，將生理鹽水將配制成0.05%的紅細胞懸液，在A、B管中加入取50ul的5%紅細胞懸液、抗A、抗B血清20ul與待測血清50ul加入標記好的凝膠管中，在D管中加入待檢血清50ul與抗D血清20 ul。在A1、B1管中分別加入A、B型0.5%的紅細胞懸液50 ul與待測血清50ul。設置溫度為37℃，進行孵育10 min，在向凝膠管中加入50 ul的O型血混合血小板，再進行900～1000轉(zhuǎn)/min離心3 min，取出觀察結(jié)果。

1.4判斷標準 管中紅細胞全部沉淀于柱底為陰性，部分甚至全部與柱內(nèi)凝膠結(jié)合為陽性。

2 結(jié)果

在1288例患者血液中用卡式微柱凝集法檢測到一次性正確率正定型為100.00%，反定型為99.84%。用鹽水法檢測出一次性正確率正定型為99.38%，反定型為98.76%。RhD型共10例，占0.78%。針對26例不符合者血清，再采用生理鹽水清洗后再進行鑒定，發(fā)現(xiàn)有4例患者紅細胞數(shù)量異常，7例患者血清蛋白中含有纖維蛋白，4例血液樣品因保存時間太久導致不能使用。剩余的11例患者血液進行進一步檢查發(fā)現(xiàn)有5例有腫瘤因子，4例有產(chǎn)生自身凝集，2例有自身凝集障礙。兩種方法檢驗結(jié)果見表1。

表1 兩種方法檢驗結(jié)果比較(例，%)

3 討論

輸血在醫(yī)學中的地位是無可替代的，傳統(tǒng)的輸血方法有鹽水法、酶法、聚凝胺法等，這些方法的最低檢測限高、操作過程繁瑣，自動化程度低，不容易被標準化，人為影響因素較多。眾所周知，對于輸血患者應是危重患者，若不及時給予輸血治療可能會致殘，甚至是死亡，但是如果血型血清不匹配可能會形成抗凝現(xiàn)象，出現(xiàn)血管內(nèi)栓塞，最后誘發(fā)心血管疾病引起殘疾或者死亡，后果也十分嚴重，所以輸血前需要快速、準確的配對。臨床上運用傳統(tǒng)方法進行血型配對、血清配對出現(xiàn)的醫(yī)療事故較多，對患者以及醫(yī)院都造成不可抹滅的陰影，是激發(fā)廣大學者對血型配對的探究。卡式微柱凝膠試驗是近年來發(fā)展起來的一種新型快速進行血型血清配對的檢驗方法，可以通過細小的凝膠顆粒組成的濾網(wǎng)，配合系統(tǒng)調(diào)控的離心速率下，快速將凝結(jié)的紅細胞與非凝結(jié)的紅細胞分離，在電腦顯示屏幕上可以反應出不同的圖譜，再根據(jù)標準的解讀法解讀圖譜，做到標準化[2]。克服傳統(tǒng)配對方法的缺點，可以快速、準確進行血液配對，保障臨床輸血快速、安全?？ㄊ轿⒅z試驗分別與傳統(tǒng)血型檢驗方法進行比較，發(fā)現(xiàn)卡式微柱凝膠試驗準確率、操作步驟、安全性、靈敏度等均優(yōu)于傳統(tǒng)試驗方法，從實踐證明卡式微柱凝膠實驗的優(yōu)越性。

血小板抗體在臨床輸血中有重要意義，快速檢測血小板自身抗體可以有效預防患者免疫性血小板減少性疾病[3]。尤其是多次接受輸血的患者容易產(chǎn)生血小板抗體，但是目前臨床上對于血液中血小板抗體的檢測方法不多，增加多次輸血患者接受輸血的危險性。史恩祥等人將卡式微柱凝膠試驗方法用于血小板抗體的檢測，發(fā)現(xiàn)卡式微柱凝膠試驗檢測血小板抗體的靈敏度以及準確度都非常高，經(jīng)過卡式微柱凝集試驗后可以準確有效的選取合適患者的血小板樣品進行輸入，減少患者不良反應的產(chǎn)生。

本次資料中有發(fā)現(xiàn)某些患者因自身疾病會影響卡式微柱凝膠試驗的準確性，比如對于患有自身凝血功能障礙、免疫性溶血性貧血等疾病時就會影響鑒定結(jié)果，且對于癌癥患者(產(chǎn)生腫瘤)也不適合進行卡式微柱凝膠試驗，也會影響鑒定結(jié)果，所以在進行卡式微柱凝膠試驗前應對患者自身疾病進行判斷[4]。按照規(guī)范的標準對血液進行保存處理后再進行有關(guān)血型血清的檢查是非常重要的，本次資料中發(fā)現(xiàn)有4例因血液樣品保存太久，導致不能檢測，當卡式微柱凝膠柱用時間過長以后，這些因素就可能造成檢查反應的假陽性或者假陰性，誤導醫(yī)護人員。當然對于靈敏度高的卡式凝集微柱有影響，對于傳統(tǒng)檢驗方法影響更為嚴重，所以在進行血型血清檢查前做好預處理是十分重要的工作。但總的來說，卡式微柱凝膠試驗符合現(xiàn)代醫(yī)學追求的快速、高效、安全的理念，隨著科學技術(shù)的發(fā)展，傳統(tǒng)經(jīng)典方法只能成為過去，新型科學性方法必將代替?zhèn)鹘y(tǒng)方法?？ㄊ轿⒅z試驗不僅僅可以有效挽救患者生命，也避免醫(yī)護人員因接觸血液樣品，減少醫(yī)護人員對血液樣品的污染，造成血液樣品檢驗不準確，也避免血液樣品中可能存在的病菌侵襲醫(yī)護人員，對醫(yī)護人員的生命安全也是一種保障。

[1] 林燕.微柱凝膠卡式配血法的臨床應用.實驗與檢驗,2011,29(4):381-382.

[2] 史恩祥.卡式微柱凝膠法檢測血小板抗體的應用.臨床輸血與檢驗,2007,9(1):70-71.

[3] 袁碧和.卡式微柱凝膠方法在血型鑒定中的應用及價值.檢驗醫(yī)學與臨床,2012,9(15):1838.

[4] 賴科.全自動血型儀在血型檢測中的應用.臨床血液學雜志,2009,2(4):207-208.

461000 河南省許昌市人民醫(yī)院輸血科