張麗麗， 龐 慧， 呂敏麗， 張慧英△， 賈建桃， 王黎敏， 劉 燕， 李旭炯， 李寶紅， 張翠英， 趙中夫， 韓德五， JI Cheng

(長治醫(yī)學(xué)院 1病理生理學(xué)教研室， 2免疫學(xué)教研室， 4機(jī)能實(shí)驗(yàn)室， 5生理學(xué)教研室， 6肝病研究所，山西 長治 046000；山西醫(yī)科大學(xué) 3第二醫(yī)院ICU， 7肝病研究所，山西 太原 030001； 8美國南加州大學(xué)Keck醫(yī)學(xué)院肝病研究中心，加利福尼亞州 洛杉磯 90089)

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78促進(jìn)肝硬化大鼠心肌細(xì)胞凋亡及其機(jī)制*

張麗麗1， 龐 慧2， 呂敏麗3， 張慧英1△， 賈建桃1， 王黎敏4， 劉 燕5， 李旭炯5， 李寶紅1， 張翠英5， 趙中夫6， 韓德五7， JI Cheng8

(長治醫(yī)學(xué)院1病理生理學(xué)教研室，2免疫學(xué)教研室，4機(jī)能實(shí)驗(yàn)室，5生理學(xué)教研室，6肝病研究所，山西 長治 046000；山西醫(yī)科大學(xué)3第二醫(yī)院ICU，7肝病研究所，山西 太原 030001；8美國南加州大學(xué)Keck醫(yī)學(xué)院肝病研究中心，加利福尼亞州 洛杉磯 90089)

目的探討葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78/免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白(GRP78/BiP)是否促進(jìn)肝硬化大鼠心肌細(xì)胞凋亡及其發(fā)生機(jī)制。方法采用復(fù)合致病因素法建立肝硬化大鼠模型，在4周、6周和8周分別取材。實(shí)驗(yàn)1：取心臟稱重并測量左室壁厚度，計(jì)算左室壁厚度與心臟重量比值及心臟指數(shù)。實(shí)驗(yàn)2： TUNEL法觀察心肌細(xì)胞凋亡情況；免疫組化方法檢測心肌組織中GRP78/BiP蛋白以及凋亡相關(guān)蛋白CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白/生長停滯及DNA誘導(dǎo)蛋白153(CHOP/GADD153)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)、核轉(zhuǎn)錄因子κB p65(NF-κB p65)、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病蛋白2(Bcl-2)的表達(dá)。結(jié)果隨肝硬化病程進(jìn)展，左室壁厚度與心臟重量比值以及心臟指數(shù)逐漸增加，8周組增加顯著(P<0.05)；心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)、CHOP/GADD153和caspase-12陽性蛋白表達(dá)指數(shù)逐漸升高，8周組差異顯著(P<0.05)；NF-κB p65和Bcl-2陽性蛋白表達(dá)指數(shù)呈一致性變化，在4周組較其它組明顯增高(P<0.05)； GRP78/BiP蛋白陽性表達(dá)指數(shù)與心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)、CHOP/GADD153、caspase-12蛋白陽性表達(dá)指數(shù)呈顯著正相關(guān)，CHOP/GADD153與NF-κB p65、Bcl-2蛋白陽性表達(dá)指數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)。結(jié)論GRP78高表達(dá)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的肝硬化心肌病發(fā)病中可能發(fā)揮重要作用。

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78； 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激； 肝硬化心肌?。?細(xì)胞凋亡； 內(nèi)毒素類

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的凋亡是近年來發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞凋亡途徑之一。有關(guān)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在肝硬化心肌病發(fā)病中的作用國內(nèi)外鮮有報(bào)道。前期研究發(fā)現(xiàn)，肝硬化大鼠心肌收縮和舒張功能明顯降低，心肌細(xì)胞數(shù)量明顯減少，間質(zhì)纖維明顯增加，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激分子葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose-regulated protein 78，GRP78)/免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白(immunoglobulin heavy chain-binding protein,BiP)在其中可能起關(guān)鍵作用[1-2]。由于心肌細(xì)胞是終末分化細(xì)胞，而且是心肌收縮和舒張的最基本單位，因此其數(shù)量的減少勢必影響心臟功能，導(dǎo)致心力衰竭的發(fā)生和發(fā)展。本次研究我們首先對肝硬化大鼠心臟形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察，進(jìn)而對肝硬化心肌病發(fā)病過程中GRP78/BiP在心肌細(xì)胞數(shù)量減少中的作用及其機(jī)制進(jìn)行了探討，旨在探索肝硬化心肌病發(fā)病的新機(jī)制，為臨床防治提供理論和實(shí)踐基礎(chǔ)。

材 料 和 方 法

1材料

脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)細(xì)胞凋亡原位檢測試劑盒購自凱基生物公司；GRP78/BiPⅠ抗購自Sigma；兔抗鼠核轉(zhuǎn)錄因子κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病蛋白2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)及免疫組化染色試劑盒均購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白/生長停滯及DNA損傷誘導(dǎo)蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein/growth arrest and DNA damage-inducible protein 153,CHOP/GADD153)Ⅰ抗購自Santa Cruz。

2方法

2.1實(shí)驗(yàn)1

2.1.1模型建立 清潔級成年雄性Wistar大鼠，體重200～240 g。正常對照組動物飼以標(biāo)準(zhǔn)飼料和礦物質(zhì)水，采用復(fù)合致病因素法復(fù)制大鼠肝硬化模型[3]，于4周、6周、8周分別取材。

2.1.2大鼠左室壁厚度測量及計(jì)算 不同時點(diǎn)動物經(jīng)麻醉后摘取心臟，稱重，繼而于主動脈弓至心尖部下1/3處橫斷切開心臟，固定距離和條件進(jìn)行拍照。BI-2000顯微攝像系統(tǒng)下測量左室壁厚度(左室內(nèi)膜與外膜最大距離)，計(jì)算左室壁厚度與心臟重量比值和心臟指數(shù)[心臟重量(mg)/體重(g)]，分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2.2實(shí)驗(yàn)2

2.2.1模型建立及各取材時點(diǎn)同2.1.1。

2.2.2心肌細(xì)胞凋亡檢測 采用TUNEL檢測法，原理如下：心肌細(xì)胞凋亡時染色質(zhì)DNA發(fā)生斷裂，產(chǎn)生大量黏性3’-OH末端。在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶的介導(dǎo)下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA 3’-末端，借助生物素與親和素的特異結(jié)合，使過氧化物酶連接至DNA斷點(diǎn)，最后加入底物，通過DAB顯色，可在光鏡下觀察到細(xì)胞核呈棕褐色或棕黃色著色的凋亡細(xì)胞。檢測步驟按試劑盒操作說明書進(jìn)行。

2.2.3心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)的計(jì)算 應(yīng)用BI-2000醫(yī)學(xué)圖像分析軟件，每張切片隨機(jī)選取10個視野(×400)，凋亡指數(shù)(apoptotic index, AI)以每個視野中凋亡細(xì)胞數(shù)占所觀察心肌細(xì)胞總數(shù)的百分比表示[AI(%)=凋亡細(xì)胞數(shù)/總計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)×100%]，取平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2.2.4心肌組織GRP78/BiP、CHOP/GADD153、caspase-12、NF-κB p65和Bcl-2蛋白表達(dá)的檢測

① 免疫組化SABC法染色步驟 石蠟切片常規(guī)脫蠟水化，3%H2O2室溫下15 min滅活內(nèi)源性酶，蒸餾水沖洗后枸櫞酸緩沖液熱修復(fù)抗原，PBS沖洗3次，滴加血清封閉液室溫下封閉20 min，分別滴加兔源性抗CHOP/GADD153、抗caspase-12、抗NF-κB p65和抗Bcl-2Ⅰ抗，濕盒內(nèi)4℃過夜，PBS沖洗后滴加生物素化山羊抗兔IgG室溫下20 min，PBS沖洗，滴加鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物，室溫下放置20 min，PBS沖洗后以DAB顯色劑進(jìn)行顯色，蘇木素復(fù)染，脫水、透明、封片。

② 陽性表達(dá)指數(shù)(positive expression index,PEI)的計(jì)算 以上蛋白主要在胞漿中表達(dá)，胞質(zhì)著棕黃色者為陽性，胞漿無棕色或與背景色一致者為陰性細(xì)胞。應(yīng)用BI-2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)，每張切片隨機(jī)選取10個視野(×400)，計(jì)數(shù)每個視野中陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞總數(shù)，計(jì)算各種蛋白的PEI[PEI(%)=陽性染色細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%]，取平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)、組間LSD-t檢驗(yàn)和Pearson相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1肝硬化大鼠心臟形態(tài)結(jié)構(gòu)變化

肝硬化大鼠隨病程進(jìn)展左心室壁厚度與心臟重量比值及心臟指數(shù)均逐漸增加，以8周組增加最明顯，與同期對照組相比差異顯著，見表1。

表1 各組大鼠左室壁厚度與心臟重量比值及心臟指數(shù)

*P<0.05vscontrol.

2肝硬化大鼠心肌細(xì)胞凋亡

正常對照組的AI為(3.12±0.86)%，肝硬化4周組、6周組和8周組的AI分別為(5.82±1.27)%、(7.96±0.94)%和(16.52±1.46)%。8周組與其它3組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見圖1。

Figure 1. Apoptotic cells in rat myocardium (TUNEL, ×400). A： control; B： liver cirrhosis at 4 weeks； C： liver cirrhosis at 6 week； D： liver cirrhosis at 8 weeks.

圖1TUNEL法檢測各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡

3肝硬化大鼠心肌組織GRP78/BiP蛋白的表達(dá)

正常對照組心肌細(xì)胞胞漿可見少量淺棕色顆粒。隨病程進(jìn)展，模型組陽性顆粒明顯增多，染色加深。4周組、6周組和8周組的陽性表達(dá)指數(shù)分別為0.29±0.09、0.75±0.20和1.48±0.21，均顯著高于正常對照組(0.07±0.06；P<0.05),見圖2。

4凋亡相關(guān)分子CHOP/GADD153、caspase-12、NF-κBp65和Bcl-2蛋白的表達(dá)

CHOP/GADD153、caspase-12和NF-κB p65在正常心肌組織均呈低表達(dá)。在肝硬化發(fā)病過程中，CHOP/GADD153和caspase-12的變化規(guī)律基本一致，蛋白表達(dá)均隨病程進(jìn)展逐漸增加，8周增加顯著(P<0.05)；NF-κB p65蛋白在4周表達(dá)最高(P<0.05)，之后逐漸下降，但在8周仍高于正常對照水平；Bcl-2蛋白在4周表達(dá)最高，6周組和8周組依次降低，各組之間比較均有顯著差異(P<0.05)，見圖3、表2。

Figure 2. Expression of GRP78 protein in rat myocardium (immunohistochemical staining,×400). A: control； B: liver cirrhosis at 4 weeks； C: liver cirrhosis at 6 weeks； D: liver cirrhosis at 8 weeks.

圖2各組大鼠心肌GRP78蛋白表達(dá)

Figure 3. Expression of CHOP/GADD153,caspase-12,NF-κB p65 and Bcl-2 proteins in rat myocardium (immunohistochemical staining,×400).

圖3各組大鼠心肌CHOP/GADD153、caspase-12、NF-κBp65和Bcl-2蛋白的表達(dá)

表2 CHOP/GADD153、caspase-12、NF-κB p65和Bcl-2蛋白的PEI值

*P<0.05vscontrol；#P<0.05,##P<0.01vs4 weeks;△P<0.05vs6 weeks.

5相關(guān)性分析

GRP78/BiP蛋白表達(dá)與凋亡指數(shù)、CHOP/GADD153及caspase-12進(jìn)行相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)分別為0.769(P<0.01)、0.613及0.704(均P<0.05),呈顯著正相關(guān)。CHOP/GADD153與NF-κB p65和Bcl-2蛋白表達(dá)進(jìn)行相關(guān)分析，其相關(guān)系數(shù)分別為-0.628和-0.583(均P<0.05),呈顯著負(fù)相關(guān)。

討 論

CHOP/GADD153是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激促凋亡途徑中的重要信號分子[4],過度或持續(xù)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激會啟動細(xì)胞的凋亡程序。我們發(fā)現(xiàn)，CHOP/GADD153蛋白在正常心肌組織的表達(dá)微弱，而隨肝硬化病程進(jìn)展逐漸增強(qiáng)，8周組表達(dá)最顯著，與GRP78/BiP的變化規(guī)律基本一致，且二者之間的變化呈顯著正相關(guān)，說明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激促凋亡途徑中CHOP/GADD153的激活促進(jìn)了心肌細(xì)胞的凋亡。目前認(rèn)為CHOP/GADD153的促凋亡機(jī)制可能為：(1)直接激活下游的GADD34和TRB3，促進(jìn)細(xì)胞死亡；(2)促進(jìn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化酶1α活化，激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣通道，使Ca2+流入胞漿增加，啟動下游凋亡途徑；(3)通過調(diào)節(jié)Bcl-2蛋白家族發(fā)揮作用[4-6]。Bcl-2家族成員不僅存在于線粒體上，也定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和胞漿中；業(yè)已證實(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時CHOP/GADD153蛋白可以通過直接抑制Bcl-2表達(dá)從而削弱其抗凋亡功能[5]。我們發(fā)現(xiàn)，隨肝硬化病情進(jìn)展心肌組織中Bcl-2蛋白表達(dá)先增強(qiáng)后減弱，很可能與CHOP/GADD153蛋白表達(dá)增加有關(guān)。CHOP/GADD153還可誘導(dǎo)Bax和Bak構(gòu)象變化和寡聚化，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜完整性破壞、Ca2+外流，使胞漿內(nèi)Ca2+濃度增高。Ca2+除了參與激活caspase-12以外，還可誘導(dǎo)線粒體PTP孔開放、細(xì)胞色素C釋放、凋亡執(zhí)行蛋白caspase-3活化[5,7]，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，肝硬化大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)隨病程進(jìn)展逐漸增高，說明凋亡是引起心肌細(xì)胞數(shù)量減少的重要原因，也是肝硬化心肌病心臟形態(tài)和功能變化的基本機(jī)制；可見，在肝硬化發(fā)生發(fā)展過程中CHOP/GADD153是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激促凋亡途徑的重要信號分子，而GRP78/BiP是該事件發(fā)生的關(guān)鍵性調(diào)節(jié)蛋白。

具有免疫和抗凋亡作用的轉(zhuǎn)錄因子NF-κB在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引起凋亡中的作用不容忽視。我們觀察到在肝硬化病程進(jìn)展中NF-κB p65和Bcl-2表達(dá)在4周時最高，之后逐漸減弱，與CHOP/GADD153蛋白表達(dá)的變化方向相反。相關(guān)分析顯示，肝硬化8周時NF-κB p65和Bcl-2分別與CHOP/GADD153蛋白的高表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)。NF-κB的活化在病變早期可能起到了細(xì)胞保護(hù)作用，后期CHOP/GADD153表達(dá)增強(qiáng)，削弱了NF-κB的抗凋亡作用。文獻(xiàn)報(bào)道，早期的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)超負(fù)荷反應(yīng)(endoplasmic reticulum overload response,EOR)可激活NF-κB[8]，早期磷酸化的PERK也可促進(jìn)NF-κB的表達(dá)增加[9]，NF-κB可正向調(diào)節(jié)抗凋亡蛋白Bcl-2，從而激活細(xì)胞促生存途徑[9-10]，CHOP/GADD153可直接抑制Bcl-2的表達(dá)[5]。因而我們認(rèn)為，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生時先后激活了GRP78、NF-κB和CHOP/GADD153，NF-κB活化在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激早期可能有重要的細(xì)胞保護(hù)作用，而在過度或持續(xù)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時則通過促凋亡作用的加強(qiáng)和抗凋亡作用的減弱導(dǎo)致了心肌細(xì)胞凋亡。

Caspase-12是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激啟動凋亡的另一重要信號分子[11]。生理情況下caspase-12與GRP78/BiP形成復(fù)合體以無活性狀態(tài)定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)外膜，過度應(yīng)激時二者解離，形成有活性的caspase-12[11]。Caspase-12也可以無活性形式與TNF受體相關(guān)因子2(TNF receptor-associated factor 2,TRAF2)形成穩(wěn)定的復(fù)合物，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時游離的肌醇必需酶1與TRAF2形成復(fù)合物促進(jìn)了caspase-12的裂解、活化[12]，是TNF誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的重要機(jī)制[13]。Caspase-12一經(jīng)活化，將相繼激活caspase-9和caspase-3，導(dǎo)致凋亡發(fā)生。以上事實(shí)證明caspase-12的活化是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的又一關(guān)鍵因素。我們發(fā)現(xiàn)，隨肝硬化病程進(jìn)展心肌組織caspase-12蛋白表達(dá)逐漸增強(qiáng)，至8周組表達(dá)最顯著，而且與表達(dá)逐漸增高的GRP78/BiP蛋白呈顯著正相關(guān)，提示在大鼠肝硬化心肌病發(fā)病過程中，活化的caspase-12也是心肌細(xì)胞凋亡的重要調(diào)節(jié)分子。

心肌重構(gòu)是病理情況下機(jī)體調(diào)動各種抗損傷因素對損傷心肌進(jìn)行修復(fù)的結(jié)果，心肌細(xì)胞凋亡必然導(dǎo)致心肌的重構(gòu)。臨床上，肝硬化心肌病患者的心臟結(jié)構(gòu)改變通常發(fā)生在左心，表現(xiàn)為左心房壁變薄、腔增大和左室肥厚及腔增大[14]。本項(xiàng)研究中大鼠左室壁厚度與心臟重量比值增加以及心臟系數(shù)的增加，以及前期發(fā)現(xiàn)的心肌間質(zhì)纖維增加[2]均充分說明肝硬化大鼠發(fā)生了心肌的重構(gòu)。引起心肌重構(gòu)的機(jī)制比較復(fù)雜，本模型中腸源性內(nèi)毒素血癥及其誘導(dǎo)產(chǎn)生的以TNF-α為主的一系列因子以及GRP78/BiP高表達(dá)可能在心肌重構(gòu)中發(fā)揮重要作用[15]，其確切作用機(jī)制有待進(jìn)一步深入探討。

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Glucose-regulatedprotein78promotecardiomyocyteapoptosisinlivercirrhoticrats

ZHANG Li-li1, PANG Hui2, Lü Min-li3, ZHANG Hui-ying1, JIA Jian-tao1, WANG Li-min4, LIU Yan5, LI Xu-jiong5, LI Bao-hong1, ZHANG Cui-ying5, ZHAO Zhong-fu6, HAN De-wu7, JI Cheng8

(1DepartmentofPathophysiology,2DepartmentofImmunology,4FunctionalIntegrativeLaboratory,5DepartmentofPhysiology,6InstituteofHepatology,ChangzhiMedicalCollege,Changzhi046000,China;3ICUoftheSecondHospital,7InstituteofHepatology,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China;8ResearchCenterforLiverDisease,KeckSchoolofMedicine,UniversityofSouthernCalifornia,LosAngeles,CA90089,USA.E-mail:zhanghy2001@163.com)

AIM: To explore the cardiomyocyte apoptosis induced by glucose-regulated protein 78/immunoglobulin heavy chain-binding protein (GRP78/BiP) in liver cirrhotic rats and its mechanism.METHODSThe liver cirrhotic rat model was established with multiple pathogenic factors, and sampled at the time points of 4 weeks, 6 weeks and 8 weeks. In experiment 1, the heart was collected and weighed, the thickness of the left ventricular wall was measured, and the ratios of the left ventricular wall thickness to the heart weight, and the heart weight to the body weight were calculated. In experiment 2, TUNEL was used to detect the apoptotic cardiomyocytes,and the protein levels of GRP78/BiP, CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein/growth arrest and DNA damage-inducible protein 153 (CHOP/GADD153), caspase-12, nuclear factor-κB p65 (NF-κB p65) and B-cell lymphoma/leukemia-2 (Bcl-2) in the myocar-dium were detected by the method of immunohistochemistry.RESULTSCompared with the normal myocardium, significant larger ratios of the left ventricular wall thickness to the heart weight and the heart weight to the body weight, a significant increase in the cardiomyocyte apoptosis, and a significant larger positive expression index of GRP78/BiP in the hearts 8 weeks after modeling were observed. The protein levels of CHOP/GADD153 and caspase-12 were gradually increased during the development of liver cirrhosis and were significantly increased at 8 weeks. The positive expression of NF-κB p65 and Bcl-2 showed consistent changes, and were markedly higher at 4 weeks than those at the other time points. The positive expression index of GRP78/BiP was positively correlated with the apoptotic index, and the levels of CHOP/GADD153 and caspase-12. The positive expression index of CHOP/GADD153 was negatively correlated with NF-κB p65 and Bcl-2.CONCLUSIONElevated expression of GRP78/BiP may play a crucial role in the pathogenesis of liver cirrhotic cardio-myopathy mediated by endoplasmic reticulum stress.

Glucose-regulated protein 78; Endoplasmic reticulum stress; Liver cirrhotic cardiomyopathy; Apoptosis; Endotoxins

R363

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2013.05.031

1000- 4718(2013)05- 0941- 06

2012- 06- 28

2013- 03- 19

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81070339)；山西省國際科技合作計(jì)劃資助項(xiàng)目(No.2010081068)；山西醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生理學(xué)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任基金資助項(xiàng)目(No.2010-09)；山西省回國留學(xué)人員科研基金資助項(xiàng)目(No.211-091)

△通訊作者Tel: 0355-3151441; E-mail: zhanghy2001@163.com