李 強(qiáng)

（1.甘肅省張掖市甘州區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 張掖 734000；2.國家肉牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系張掖綜合試驗(yàn)站，甘肅 張掖 734000）

近年來各級畜牧獸醫(yī)部門，每年都需要對畜禽進(jìn)行采血及血清分離的工作，數(shù)量逐年增多且日趨頻繁，如血常規(guī)檢查、血片制作、紅細(xì)胞泥采集分離、病原學(xué)檢查，尤其是一年數(shù)次的抗體（免疫抗體、感染抗體）監(jiān)測及范圍廣泛的布魯氏桿菌病檢疫監(jiān)測等。在工作中發(fā)現(xiàn)，有的技術(shù)人員在采血及分離血清時，時常有失敗現(xiàn)象發(fā)生，如溶血、分離不出血清、血清如膠凍樣物質(zhì)及腐敗等情況，這導(dǎo)致反復(fù)采血而引起養(yǎng)殖場戶的反感、不配合甚至拒絕，也造成人財物的浪費(fèi)，為此，筆者現(xiàn)將畜禽采血及血清分離技術(shù)等方面的一些做法與大家探討。

1 材料準(zhǔn)備

保定用牛韁繩、麻繩、牛鼻鉗，醫(yī)用鑷子、止血鉗、醫(yī)用膠貼、醫(yī)用止血帶、剪毛剪，微量移液器、移液頭，70%～75%酒精、5%～10%碘酊、滅菌干棉球，消毒18＃、16＃、12＃及9＃針頭，采血管或潔凈干燥的青霉素瓶、一次性靜脈采血真空管及針頭、一次性注射器，工作服、帽、口罩、一次性手套、膠鞋、鞋套，采血登記表（見表1）、記錄用筆、玻璃鉛筆及冷藏箱、消毒液（用于工作人員及器械消毒）等。

表1 采血登記表 年月 日

2 牛的采血技術(shù)

2.1 牛血液采集技術(shù)

2.1.1 頸靜脈采血法 穿戴好工作服、帽、口罩、膠鞋及手套等，用韁繩保定好牛，如牛跳動不安，需要夾上牛鼻鉗；采血部位：其解剖位置為牛頸靜脈溝；采血部位先用剪毛剪剪毛后，用10%碘酊棉球消毒，再以75%酒精棉球脫碘消毒；如在頸部左側(cè)采血（以左側(cè)為例），用左手的食指、中指及無名指（或半握拳）壓住采血部位稍下（向心）端的頸靜脈，使靜脈回流受阻，靜脈怒張，這時用右手拇指、食指及中指持緊消毒后并干燥的18＃針頭，用飛針方式扎入頸靜脈（如用真空采血方法，因針頭尖銳且較細(xì)，輕輕即可刺入頸靜脈，當(dāng)針頭后方見血后，應(yīng)迅速將連接針頭的另一端插入真空管），血液便可從針頭流出（或滴出），助手迅速遞上已編號的采血管，接血時采血管應(yīng)稍傾斜，使血液沿管壁徐徐流入采血管中，切勿使血液直接滴入采血管底部，以免產(chǎn)生氣泡和因紅細(xì)胞破裂而引起溶血。采夠要求的血液量時，迅速拔出針頭，立即用滅菌棉球按壓止血5s左右，再用5%碘酊消毒傷口。采血完畢后，將采血管的管口蓋緊并平放或斜置，待血液完全凝固后再放入冷藏箱。

2.1.2 牛尾中靜脈采血法 首先將牛韁繩拴牢（應(yīng)盡可能拴短一些，以減少牛的活動范圍），采血者站在牛正后方，用左手將牛尾1／2處握緊并盡量舉高，使牛尾從尾根處自然抬起，與背中線垂直，避免在中間形成彎曲或偏向一側(cè)，防止牛會因疼痛而躁動不安，影響正常操作；右手持采血器（或一次性注射器，選用2.50～3.75cm 長的12＃針頭為宜），在尾根中線腹側(cè)，距肛門10cm 左右（采血部位的解剖位置是：第2 與第3 尾椎之間）的凹陷部正中處，先用10%碘酊消毒、再用75%酒精棉球脫碘消毒，在該處垂直于尾縱軸進(jìn)針約1cm 左右，然后試著抽吸，若無回血，可將針頭緩慢退出1～5mm，再抽吸即可采出血液。其它與牛頸靜脈采血相同。

2.1.3 牛乳靜脈采血法 母牛乳房發(fā)育較好且乳靜脈明顯的，也可在乳房靜脈采血；這時需要用結(jié)實(shí)的繩子，將牛兩后肢分別拴牢（兩后肢中間應(yīng)有約20～30cm 左右的距離）的方法保定好；常規(guī)消毒后，用一次性注射器或真空采血管采血。

3 采集的血液保存及血清分離技術(shù)

采集的血液趁未凝固前將采血管平放或斜置，以增加血清析出面；在血液未完全凝固前，嚴(yán)禁晃動采血管，以防溶血；待血液完全凝固后，將采血管置于冷藏箱內(nèi)，冬季置于較為溫暖的地方，切忌凍結(jié)；夏季置于陰涼處，以防腐敗。

采集的血液凝固后，在室溫下一般12h內(nèi)即可析出血清，在炎熱的夏季，3～6h 即可充分析出血清，此時應(yīng)及時將血清移出，以防腐敗及因晃動采血管等因素而影響血清質(zhì)量；有時血清析出量少或未析出血清的，可把凝固后12h以上的全血，置于離心機(jī)內(nèi)（放置采血管時需要注意的是：離心機(jī)是否平衡，掌握好管的大小、長度和對側(cè)放置的管內(nèi)血液容量是否一致等），離心分離血清（3 000～4 000r／min，離心時間為2～3 min），使血清析出，待血清析出后，用移液器小心（移液頭尖端部勿觸及凝血塊，以防影響血清質(zhì)量）將血清移入另一潔凈、干燥、無菌試管或小瓶中。分離后得到的血清，應(yīng)盡快用冷藏或冷凍方法保存，及時送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)。

4 常見不良“采血法”導(dǎo)致的結(jié)果

1）不剪毛、不消毒，導(dǎo)致皮毛上的雜物及病原微生物等污染針頭、掉入采血容器，影響血清質(zhì)量，造成動物發(fā)生感染和養(yǎng)殖戶的反感。

2）用自來水煮沸消毒的針頭，不經(jīng)干燥、不用力甩凈針頭內(nèi)的水、或不用滅菌生理鹽水沖洗，因?yàn)樗c血液是不等滲的，采集的血液很容易出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。

3）用1個針頭采數(shù)頭只牛，導(dǎo)致血清質(zhì)量差及溶血，也會造成畜禽間的交叉感染，畜主也很反感。

4）用酒精浸泡后的針頭直接采血，容易造成溶血。

5）個別人員專業(yè)技術(shù)素質(zhì)差，采不出血就用采血管直接在出血的皮膚處接、或未剪毛時在毛尖上接血，更有甚者，將畜禽屠宰后用采血管接，這時的組織液、各種雜物隨同血液進(jìn)入采血管，這樣的血液含有大量的微生物、雜質(zhì)等，會導(dǎo)致血液受到污染、溶血，分離出的血清呈膠凍樣，這樣的“血清”當(dāng)然是不能用的。

5 討論與分析

1）采血人員要合理分工，如采血員、保定員、記錄員、器械遞送員等，不要慌亂，不可漏采和重復(fù)采，注意人畜安全。

2）采血時間應(yīng)在，早晨喂飼前或停食（但要保證充足的飲水）后6h進(jìn)行，以免出現(xiàn)血清混濁等質(zhì)量問題。

3）使用一次性注射器、連試管式的真空采血器，避免因器械消毒不嚴(yán)，操作人員直接接觸動物血液受到病原微生物感染及畜禽人為的疫病傳播。

4）在采血和分離血清時做到①采血針頭、瓶（管）潔凈、干燥、無菌；②采血過程中確保人畜安全；③采血時按“畜（禽）采血登記表”逐一詳細(xì)登記；④采血時必須無菌操作，不溶血、無污染、無腐?。虎葑龅奖怼⑻?、血、畜四統(tǒng)一，以防混淆。

5）牛尾中靜脈采血法的優(yōu)缺點(diǎn) 對牛應(yīng)激反應(yīng)微小，牛不需要特殊的保定，此種操作方法相對比較安全，不影響乳牛的產(chǎn)奶量；操作簡便，采血人員容易掌握；具有單人即可操作、采血快速、保定簡單、防止人畜受傷等優(yōu)點(diǎn)。但不適用于犢牛的血液采集，以免造成犢牛尾部血管的永久性損傷。

筆者每年都要進(jìn)行大量的牛采血、血清分離及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)監(jiān)測工作，每年采血少時上百頭只，多時上千頭只，通過20多年的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，無感染、無溶血、無腐敗及事故等等現(xiàn)象發(fā)生。