張朋飛 王 琳 劉素鴿

(保定學(xué)院 生化系，河北 保定 071000)

硫酸阿米卡星為新型廣譜卡那霉素A的半合成衍生物，具有抗菌譜廣、活性強(qiáng)的特點(diǎn)，是臨床上敏感性細(xì)菌導(dǎo)致的疾病有效治療藥物之一[1－4]。

該藥合成過(guò)程中需使用甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等溶劑，未能被全部清除。人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)[5]和中國(guó)藥典(2010版)規(guī)定了69種組分作為藥品中殘留溶劑的檢測(cè)對(duì)象及各組分在藥品中的殘留限度，其中乙醇的殘留限度為 0.5%[2－5]。

本實(shí)驗(yàn)根據(jù)中國(guó)藥典第二部2010版有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定的原則[3]，建立了毛細(xì)管氣相色譜法，對(duì)硫酸阿米卡星中甲醇、乙醇、乙腈、丙酮四種殘留的有機(jī)溶劑進(jìn)行分離，并使用內(nèi)標(biāo)分析法測(cè)定硫酸阿米卡星中乙醇的殘留量。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器設(shè)備與材料

GC－4000(A)毛細(xì)管氣相色譜儀(北京東西電子廠(chǎng))，A5000氣相色譜儀工作站(北京東西分析儀器有限公司)，SGH－500高純氫發(fā)生器(北京東方精華苑科技有限公司)，G103色譜用空氣發(fā)生器(北京東方精華苑科技有限公司)，硫酸阿米卡星注射液(批號(hào)2101441FA，齊魯制藥有限公司)，其他試劑均為分析純。

1.2 溶液的配制

分別配制五種有機(jī)溶劑此為標(biāo)準(zhǔn)溶液1、2、3、4、5號(hào)，濃度分別為(0.007917 ml、0.007895 ml、0.004000ml、0.001580ml、0.003214 ml)。分別各取上述甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、正丙醇1.0 mL，0.5 mL，0.5 mL，0.2 mL，0.6 mL 于100 mL 容量瓶中，配成對(duì)照品溶液6;精確量取5 mL乙醇，于100 mL容量瓶中，配成貯備液。

1.3 色譜條件

OV－17(30m×0.32mm)毛細(xì)管氣相色譜柱;檢測(cè)器為FID;載氣為氮?dú)?，柱前壓?.06MPa;進(jìn)樣口溫度200℃;檢測(cè)器溫度200℃;柱溫:40℃恒溫;進(jìn)樣量為1μL;載氣分流流量為53.85mL/min。取待測(cè)試劑0.8μL 和正丙醇0.2μL，直接分流進(jìn)樣。

2 結(jié)果與討論

2.1 專(zhuān)屬性實(shí)驗(yàn)

取配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液6進(jìn)樣。如圖1表明甲醇保留時(shí)間為 1.70 min，乙醇為 1.90min，丙酮為 2.15 min，乙腈為 2.48 min，正丙醇為 2.57min，相鄰色譜峰間的分離度分別為 0.9，1.05，1.26，0.85，基本可以分離。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)溶液圖

圖2 硫酸阿米卡星譜圖

2.2 校正因子

取乙醇和正丙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.5μL，按上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，平行測(cè)五次，由公式:

其中Ar=標(biāo)樣組份的峰面積;Cr=標(biāo)樣組份的濃度;Ai=內(nèi)標(biāo)物的峰面積;Ci=內(nèi)標(biāo)物的濃度。

計(jì)算出校正因子數(shù)值分別為(1.639、1.631、1.642、1.648、1.628，其 RSD 為 0.51%)

2.3 線(xiàn)性關(guān)系考察

精密量取貯備液 0.2mL、0.8mL、1.4mL、2.0mL、2.6mL、3.2mL分別置于25mL容量瓶中，配制成一系列濃度的溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定峰面積(14455、55286、88409、141534、207137 和246945)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析(A=2.52125×107×C －9646.0482，其中 R=0.99488)

2.4 硫酸阿米卡星的測(cè)定

儀器的噪聲為0.4405μA*s，經(jīng)計(jì)算，乙醇的檢出限為0.00019g/mL。表明檢測(cè)靈敏度能夠滿(mǎn)足要求。取試劑0.8μ和正丙醇0.2μL，進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖2，按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算藥品中的乙醇的殘留量。

計(jì)算公式為如下:

其中Ar=樣品組份的峰面積或峰高;Ai=內(nèi)標(biāo)物的峰面積或峰高;Rf=校正因子。

由試劑色譜圖和以上兩公式可知供試品中乙醇含量為0.283%，符合中國(guó)藥典2010版二部附錄ⅧP的規(guī)定。

3 結(jié)論

本文所建立的方法專(zhuān)屬性良好，所測(cè)有機(jī)殘留溶劑乙醇具有良好的線(xiàn)性關(guān)系，RSD=2.6%，方法靈敏、準(zhǔn)確、快速且分離度良好，適用于硫酸阿米卡星注射液中乙醇含量的測(cè)定。乙醇含量為0.283%，符合中國(guó)藥典2010年版二部附錄ⅧP的規(guī)定。

[1]王立萍，李茜，劉英.硫酸阿米卡星注射液質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].湖南畜牧獸醫(yī)，2008，2(1):10 －11.

[2]寧建龍，劉進(jìn)輝，孫志良等.硫酸阿米卡星脂質(zhì)體注射液對(duì)豬細(xì)菌性疾病的療效研究[J].湖南畜牧獸醫(yī)，2008，2(1):10－11.

[3]周洪柱，翠云表.氣相色譜法測(cè)定乙腈廢水中乙腈的含量[J].云南化工，2005，32(5):42－43.

[4]朱小兵.解析氣相色譜[N].中國(guó)包裝報(bào)，2006－9－18(6).

[5]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[M].第七版，北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2000:1326－1327.