北京市豐臺區(qū)藥品檢驗所（100071）呂崢崢

北京市醫(yī)療器械檢驗所（101111）王會如

香砂平胃顆粒由蒼術(shù)（炒）、厚樸（姜炙）、陳皮、香附（醋炙）、甘草、砂仁六味藥組成[1]。厚樸是我國傳統(tǒng)的珍貴中藥材。厚樸的提取物有抗菌作用，其抗菌活性成分為厚樸酚與和厚樸酚。厚樸在《中國藥典》2010年版二部中對其含量采用HPLC法進行控制，而香砂平胃顆粒原標(biāo)準(zhǔn)只有性狀及檢查項，不利于質(zhì)量控制。本實驗建立HPLC法測定香砂平胃顆粒中厚樸酚、和厚樸酚的含量以完善質(zhì)控體系。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 ①儀器：高效液相色譜儀：島津LC-2010CHT；電子天平：梅特勒AG285；超聲破清洗器：昆山KQ-300；紫外分光光度計：安捷倫8453。②試藥：甲醇（色譜純）；厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱為waters C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇-水（75∶25）；檢測坡長：294nm；流速：1.0mL/min；進樣量10μL（對照品），20μL（供試品）；理論塔板數(shù)按厚樸酚峰值計算應(yīng)不低于4000。

1.2.2 試驗溶液的制備 ①對照品：取厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL分別含10μg、12μg的溶液，即得。②供試品：取樣品，研細(xì)，取約3g精密稱定，置于具有塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇20mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，40Hz）20min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。③陰性對照樣品溶液的制備：取無厚樸藥材的樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。

2 結(jié)果與分析

2.1 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 取厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品溶液10μL，供試品溶液、陰性對照溶液各20μL注入液相色譜儀，結(jié)果陰性對照溶液對測定無干擾（見附圖1～3）

2.2 線性考察 按照上述對照品溶液的制備方法，制成厚樸酚對照品溶液（10.17μg/mL）、和厚樸酚對照品溶液（12.30μg/mL），吸取上述溶液3μL、5μL、10μL、15μL、20μL注入液相色譜儀。分別以厚樸酚、和厚樸酚進樣量μg為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明厚樸酚、和厚樸酚進樣量分別在0.0305μg～0.2034μg和0.0369μg～0.2460μg時與峰面積呈良好的線性關(guān)系。計算得回歸方程：厚樸酚：Y=1.536×106-1.761×103，R=0.9999；和厚樸酚：Y=1.900×106-1.697×103，R=0.9999。

附圖1 厚樸酚及和厚樸酚HPLC圖

附圖2 供試品HPLC圖

附圖3 陰性對照HPLC圖

2.3 精密度試驗 精密吸取厚樸酚、和厚樸酚對照品溶液10μL注入液相色譜儀中，測定峰面積，連續(xù)進樣5次，厚樸酚、和厚樸酚對照品RSD分別為0.2%、0.1%，結(jié)果表明精密度良好。

2.4 穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一批次供試品溶液20μL，按上述色譜條件分別于制備0、3、6、9h進樣測定，結(jié)果表明樣品在9h內(nèi)穩(wěn)定，厚樸酚、和厚樸酚RSD分別為0.8%、0.5%。

2.5 重現(xiàn)性試驗 取同一批號（批號20110202），按“1.2.2中②”方法制成6份，測得厚樸酚、和厚樸酚總含量的平均值為104μg/g，RSD為0.9%。

2.6 加樣回收試驗 取本品研細(xì)，取3g，精密稱定并加入厚樸酚對照液（15μg/mL）10mL、和厚樸酚（30μg/mL）5mL，70%甲醇25mL，同法制備5份，分別進樣測定，測得厚樸酚、和厚樸酚平均回收率分別為97%、98%，RSD均為1.4%。

2.7 樣品測定 按“1.2.2中②”分別對三個不同廠家的樣品中厚樸酚、和厚樸酚的含量進行測定，結(jié)果見附表所示。根據(jù)樣品含量測定結(jié)果，不同生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的香砂平胃顆粒中的厚樸酚、和厚樸酚含量相差較多，暫定本品1g含厚樸以厚樸酚（C18H18O2）、和厚樸酚（C18H18O2）的總量計，不得少于45μg?；虮酒访看駱阋院駱惴樱–18H18O2）、和厚樸酚（C18H18O2）的總量計，不得少于0.45mg。

附表 三個不同廠家樣品中厚樸酚及和厚樸酚的含量測定結(jié)果

3 討論

3.1 采用《中國藥典》2010年版一部厚樸項下方法[1]：甲醇-水（78∶22），為了達(dá)到分離度調(diào)整為甲醇-水（75∶25）。

3.2 通過比較溶劑50%甲醇、70%甲醇和稀乙醇，最好采用70%甲醇作為溶劑，可以得到好的峰形且較好過濾。

3.3 超聲處理 考察10min、15min、20min、30min，最終選擇20min處理供試品。