天津市寶坻區(qū)藥品檢驗(yàn)所（301800）楊小孟 李季靜

補(bǔ)腎康樂膠囊由淫羊藿、制何首烏、花生米等17味中藥組成。用于壯陽益腎、大補(bǔ)氣血、填精生髓、強(qiáng)身健腦。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊》中，沒有含量測定指標(biāo)，淫羊藿為該制劑中的主要成分。為更好地控制該制劑質(zhì)量，保證療效，本文采用高效液相色譜（HPLC）法測定了補(bǔ)腎康樂膠囊中淫羊藿苷的含量。

1 儀器與試藥

島津HPLC-2010AHT型高效液相色譜儀；梅特勒-托利多AG135型電子天平。淫羊藿苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110737-200415）；乙腈為色譜純，其他試劑為分析純；補(bǔ)腎康樂膠囊（西安碑林藥業(yè)股份有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 色譜柱：phenomenex C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-水（30∶70）；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL；檢測波長：270nm[1]。理論塔板數(shù)按淫羊藿苷計(jì)算應(yīng)不低于3000[2]。

2.2 溶液制備 精密稱取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.05mg的對照品溶液。取裝量差異項(xiàng)下的樣品內(nèi)容物，研細(xì)，取約0.2g，精密稱定，加入甲醇適量，超聲處理30min，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得供試品溶液。取補(bǔ)腎康樂膠囊的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 專屬性試驗(yàn) 取2.2項(xiàng)下3種溶液，按擬訂的色譜條件測定。結(jié)果表明陰性對照無干擾。

2.3.2 線性關(guān)系考察 取濃度為0.512mg/mL淫羊藿苷對照品溶液，分別精密量取2.0，5.0，10.0，15.0，20.0mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密取l0μL進(jìn)樣，以峰面積為縱坐標(biāo)、對照品濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，淫羊藿苷回歸方程為Y＝9472.1X－6038.4，r＝0.9998（n＝5）。結(jié)果表明淫羊藿苷質(zhì)量濃度在0.01024～0.1024mg/mL范圍內(nèi)與峰面積有良好的線性關(guān)系。

2.3.3 精密度試驗(yàn) 取同一份對照品溶液，按擬訂的色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定淫羊藿苷峰面積，結(jié)果的RSD為0.29%（n＝6）。

附表 淫羊藿苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，分別于0，2，4，6，8h進(jìn)樣1次，測定淫羊藿苷峰面積，結(jié)果RSD為1.76%（n＝6），表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.5 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一批號樣品6份，按供試品溶液制備方法制備溶液并依法測定含量。結(jié)果平均含量為2.16mg/粒，RSD為0.25%（n＝6）。

2.3.6 加樣回收試驗(yàn) 分別稱取已知含量的樣品適量，精密加入對照品適量，按供試品溶液制備方法制備溶液并依法測定含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見附表。

2.4 樣品含量測定 取供試品溶液和對照品溶液，各進(jìn)樣10μL，以峰面積按外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果3批樣品中淫羊藿苷含量分別為2.16mg/粒，2.21mg/粒，2.17mg/粒，平均含量為2.18mg/粒。

3 討論

筆者對采用不同組成和比例的流動相的分離結(jié)果進(jìn)行了比較，如乙腈-水（28∶72）、甲醇-水（30∶70）、甲醇-水-冰醋酸（60∶40∶0.5）等，結(jié)果表明，以乙腈-水（30∶70）為流動相時分離效果較好。

綜上所述，采用高效液相色譜法測定補(bǔ)腎康樂膠囊中淫羊藿苷的含量，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，簡便易行，可推廣應(yīng)用。