麻卲

增殖細(xì)胞核抗原Ki-67對宮頸ASC-US的分流作用

目的研究增殖細(xì)胞核抗原ki-67對宮頸病變的分流作用。方法所有宮頸ASC-US病例均行薄層液基涂片檢測，同時(shí)行Ki-67免疫組化染色，以病理活檢作為診斷為標(biāo)準(zhǔn)，預(yù)測Ki-67對宮頸病變ASC-US的鑒別意義。結(jié)果A組：9.09±3.11；B組：17.96±4.49；C組：65.43±15.42；F值156.18；P<0.05，經(jīng)比較3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論Ki-67免疫組化染色對ASC-US的分流具有重要參考價(jià)值，值得臨床推廣用用，是較為理想的篩查方法。

薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查；Ki-67；宮頸病變

宮頸病變與持續(xù)性高危型人乳頭瘤病毒感染密切相關(guān)，宮頸病變是可以預(yù)防和治愈的疾病[1], 宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)涂片技術(shù)(thinprep cytologivtest，TCT)的普及使宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intra-epithelial neoplasisa，CIN)的早期檢出率大大增加，但在臨床上對于如何正確處理細(xì)胞學(xué)檢查為不能明確意義的非典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cells of undetermined significicance，ASC-US)患者，意見不一，由于相當(dāng)大的重疊率使ASC-US的診斷出現(xiàn)不一致現(xiàn)象，因此臨床上迫切需要一種生物學(xué)標(biāo)志物對宮頸ASC-US進(jìn)行再分類，Ki-67是目前研究較多的一個增殖細(xì)胞核抗原，參與細(xì)胞周期的調(diào)控，已經(jīng)有研究證明在宮頸細(xì)胞學(xué)涂片中用Ki-67進(jìn)行免疫組化染色檢查是一種可行的方法[2]，2010年李瑾[3]等利用增殖細(xì)胞核抗原Ki-67對ASC-US進(jìn)行合理分析，利用免疫組化染色，可以作為宮頸病變篩查較好的方法。本研究利用TCT診斷為ASC-US的剩余標(biāo)本進(jìn)行Ki-67免疫組化檢測，將ASC-US進(jìn)行再分類，探討Ki-67在宮頸ASC-US中的表達(dá)及診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 2010年6月至2012年12月間檢查宮頸TCT患者2075例，診斷為ASC-US100例,均來自鄭州市第一人民醫(yī)院婦科門診及住院患者，10例為住院患者，診斷為宮頸原位癌或浸潤癌5例，年齡18～65歲，平均年齡39.2歲，經(jīng)免疫組化Ki-67檢測，同時(shí)行陰道鏡下活檢病理證實(shí)。

1.2研究方法 分三組：所有ASC-US病例均行Ki-67免疫組化染色，再行陰道鏡下活檢，病理科醫(yī)師的協(xié)助下完成顯微鏡下閱片。

1.3結(jié)果判定 細(xì)胞學(xué)診斷：液基涂片采用TBS(The Bethesda System)系統(tǒng)進(jìn)行診斷，涂片中細(xì)胞數(shù)>5000者有評估價(jià)值。細(xì)胞學(xué)診斷為ASC-US意義不明的不典型鱗狀細(xì)胞。

Ki-67免疫組化陽性標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞核內(nèi)棕黃色顆粒達(dá)到下述標(biāo)準(zhǔn)者為Ki-67陽性染色：涂片在顯微鏡下觀察10個高倍(×400)視野，每個視野計(jì)數(shù)100個細(xì)胞，根據(jù)其中有Ki-67標(biāo)記核的細(xì)胞所占的百分比來評估。以陽性細(xì)胞數(shù)≥10%為陽性。

1.4分析方法 宮頸TCT診斷為ASC-US病例，計(jì)算免疫組化Ki-67陽性預(yù)測值等，以陰道鏡下宮頸組織活檢或術(shù)后病理組織學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果包括炎性反應(yīng)性細(xì)胞、CIN I及以上病變。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用11.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用方差分析，率的比較采用卡方檢驗(yàn)，對比以P值<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對100例TCT診斷為宮頸ASC-US患者行免疫組化Ki-67檢測后行陰道鏡下活檢病理分析，最終進(jìn)行診斷學(xué)對比分析，評價(jià)診斷正誤率。

2.1免疫組化Ki-67與組織學(xué)診斷的比較 見表1，所有ASCUS患者均行免疫組化Ki-67染色后行陰道鏡下多點(diǎn)活檢，其中炎性反應(yīng)性細(xì)胞改變12例(A組)12.0%(12/100)；CINI、CINII、CINllI83例(B組)83.0%(83/100)；宮頸鱗狀細(xì)胞癌或浸潤癌5例(C組)，5.0%(5/100)。

表1 ASC-US病例Ki-67檢測與陰道鏡下活檢病理結(jié)果對比

3 討論

宮頸癌占女性生殖道惡性腫瘤的首位。近年來其發(fā)病率呈年輕化趨勢，宮頸病變經(jīng)歷從癌前病變到癌變的10余年的漫長過程，因此對于宮頸病變的早期診斷及早期治療提供了足夠的時(shí)間，尤其是早期診斷意義重大，宮頸TCT的出現(xiàn)明顯提高了診斷的準(zhǔn)確率及陽性率，前期研究發(fā)現(xiàn)通過對宮頸ASC-US的隨訪，約20%發(fā)展為LSIL，10%發(fā)展為HSIL[4]，因此對于宮頸病變早期準(zhǔn)確診斷意義重大，臨床上迫切需要一種生物學(xué)標(biāo)志物輔助對ASC-US更進(jìn)一步細(xì)化分類。

Ki-67抗原是增殖細(xì)胞核抗原中較為常用的一種生物學(xué)標(biāo)志物，在有絲分裂中G0期以外的細(xì)胞周期均有表達(dá)，由于其細(xì)胞周期短，脫離活體后迅速講解，故可準(zhǔn)確的反應(yīng)細(xì)胞活性。國外學(xué)者報(bào)道，Ki-67是判斷CIN和宮頸癌級別的一個敏感指標(biāo)，也可預(yù)測早期宮頸病變的進(jìn)展情況[5]。Ki-67表達(dá)在多種腫瘤中均有明顯的改變，不僅對惡性腫瘤的診斷具有重要意義，而且對預(yù)測腫瘤的預(yù)后也很有價(jià)值，已有報(bào)道應(yīng)用其抗體定量分析腫瘤的生長分?jǐn)?shù)，腫瘤的分級、增生程度及預(yù)測腫瘤的預(yù)后[6]。

將免疫組化方法ki-67與細(xì)胞學(xué)診斷相結(jié)合，尤其對于臨床診斷為非典型鱗狀細(xì)胞的病例有重要意義。Cheung[7]等研究表明，在60例液基宮頸細(xì)胞學(xué)涂片上檢測Ki-67的免疫反應(yīng)性，結(jié)果表明在宮頸鱗癌和HSIL中，ki-67呈現(xiàn)強(qiáng)陽性反應(yīng)。認(rèn)為經(jīng)Thinprep處理的宮頸細(xì)胞學(xué)涂片適于免疫細(xì)胞化學(xué)研究，異常的鱗狀上皮細(xì)胞及腺上皮細(xì)胞在核異型的背景下輔以ki-67強(qiáng)陽性染色很容易識別，并能提高觀察者之間的一致性和可重復(fù)性。Sahebali[8]等在147例宮頸液基細(xì)胞學(xué)涂片上行Ki-67染色并探討其與HPV感染的相關(guān)性，結(jié)果表明在HSIL組，Ki-67免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞數(shù)顯著高于其他組，有一部分ASCUS為絕經(jīng)后萎縮上皮細(xì)胞，對這些細(xì)胞Ki-67通常是陰性的，因此認(rèn)為Ki-67免疫細(xì)胞化學(xué)分析有助于減ASCUS的診斷，能夠幫助鑒別異常增生細(xì)胞與萎縮細(xì)胞。他指出Ki-67可以作為液基宮頸細(xì)胞學(xué)的一個輔助指標(biāo)來診斷HSIL。本實(shí)驗(yàn)研究表明隨著宮頸病變程度的升高ki-67的表達(dá)呈上升趨勢，在炎性反應(yīng)性細(xì)胞與CINI之間有顯著性差異；CINI與CINII之間無差異；CINII與CINIII之間有顯著性差異，CINIII與鱗癌之間無顯著性差異，因此本實(shí)驗(yàn)表明對于ASCUS，行免疫組化ki-67檢測，有助于HSIL和LSIL之間的區(qū)別。

總之，免疫組化ki-67檢測對于宮頸ASCUS的鑒別診斷其方法簡單，易于操作，遠(yuǎn)期可對宮頸病變的治療及預(yù)后提供理論依據(jù)，對于宮頸病變的規(guī)范化治療意義重大。

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450000 鄭州市第一人民醫(yī)院