張 怡

楊黃即瓦尼木層孔菌(Phellinus Vaninii Ljub)，又名桑黃，屬擔(dān)子菌亞門、層菌綱、非褶菌目、銹革孔菌科、木(針)層孔菌屬［1］，有“森林黃金”之美稱。楊黃具有抗腫瘤、抗炎、抗血管生成活性等多種藥理作用［2-4］，在我國傳統(tǒng)中藥中用于治療痢疾、盜汗、血崩等［5］。楊黃總黃酮成分是其抗氧自由基的主要活性部位［5］，目前，國內(nèi)還沒有較好的楊黃總黃酮制劑上市［6］，多是將楊黃經(jīng)簡單處理后作為保健品使用，未發(fā)揮其治療作用。本研究將楊黃總黃酮提取物制成分散片，可減少患者的服藥量，且由于分散片兼具口服固體制劑和口服液體制劑的優(yōu)點(diǎn)，具有分散度高、溶出速度快、吸收快、生物利用度高等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)提高療效、擴(kuò)大臨床應(yīng)用具有重要意義。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 TDP型單沖壓片機(jī)(上海天祥健臺(tái)制藥機(jī)械有限公司)，YD-20智能片劑硬度儀(天津大學(xué)無線電廠)，UV-2401型紫外分光光儀(日本島津公司)，F(xiàn)7-2000脆度儀(天津大學(xué)無線電廠)，ZB-IB型智能崩解儀(天津大學(xué)精密儀器廠)。

1.2 試藥 微晶纖維素(MCC)、羥丙甲纖維素(HPMC)、立崩(超級(jí)羧甲基淀粉鈉)、交聯(lián)聚維酮(PVPP)、低取代羥丙纖維素(L-HPC)、羧甲基淀粉鈉(CMS-Na)均為安徽淮南山河藥用輔料有限公司生產(chǎn);α-乳糖(一水)、淀粉、糊精、硬脂酸鎂、無水乙醇、聚維酮K17(PVP K17)均為國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品;楊黃總黃酮提取物為本實(shí)驗(yàn)室自制(AlCl3絡(luò)合法測(cè)得總黃酮含量為70.6%)，蘆丁對(duì)照品購自南京澤朗植提有限公司，含量≥98%。

2 方法與結(jié)果

2.1 分散片的制備 準(zhǔn)確稱取30 g桑黃子實(shí)體粉末(過 60目篩)，置燒瓶中，加 70%乙醇900 mL，室溫下浸泡12 h后，超聲提取30 min，抽濾，殘?jiān)俪曁崛?次，合并2次濾液，濃縮烘干，得到桑黃總黃酮提取物。稱取一定量桑黃總黃酮提取物，加適量填充劑，按等量遞增的方法均勻混合，加粘合劑制軟材，過16目篩濕法制粒，60℃干燥30 min，過篩整粒，外加崩解劑和適量潤滑劑(硬脂酸鎂)后壓片?？刂破骄丶s0.25 g，每片含總黃酮約6.5%。

2.2 處方篩選

2.2.1 填充劑的選擇 固定粘合劑、崩解劑和壓力等條件，選擇合適的填充劑，考察MCC、乳糖、淀粉和糊精作為填充劑對(duì)分散片崩解時(shí)限、崩解時(shí)限及硬度的影響，見表1。

由表1可知，MCC作為填充劑的崩解效果最好，但硬度最小;乳糖為填充劑崩解效果不如MCC，但外觀光潔完整，可壓性好，綜合考慮，選用MCC和乳糖混合作為填充劑。不同比例的MCC和乳糖作為填充劑的崩解效果見表2。

表1 填充劑的選擇

表2 填充劑比例的選擇

2.2.2 粘合劑的選擇 粘合劑用量對(duì)顆粒粘度和濕度的影響很大，從而影響顆粒的流動(dòng)性和可壓性等重要的物理性質(zhì)。本文考察了5%PVP K17乙醇溶液、2%HPMC溶液、50%乙醇、10%淀粉漿作為粘合劑對(duì)崩解時(shí)限的影響。結(jié)果顯示，5%PVP K17乙醇溶液作為粘合劑時(shí)，分散片的崩解時(shí)間、顆粒性質(zhì)、片劑外觀、硬度較好。

2.2.3 崩解劑選擇 考察 PVPP、L-HPC、CMSNa、立崩用做外加崩解劑壓片，崩解時(shí)限見表3，考慮崩解時(shí)間、外觀以及價(jià)格因素，選擇立崩作為外加崩解劑。崩解劑用量見表4。

表3 崩解劑種類的選擇

表4 崩解劑用量的選擇

從表4可以看出，立崩用量在一定范圍內(nèi)能夠使片劑迅速崩解，但用量多于5%時(shí)崩解反而變慢，可能是由于基團(tuán)的引濕性，導(dǎo)致立崩部分水解后產(chǎn)生膠狀物質(zhì);也可能是立崩會(huì)在水中粘結(jié)并在藥片表面形成水化膜反而阻止了水分的滲入，延長片劑崩解的速度。

2.2.4 壓力的選擇 壓力的大小決定分散片的硬度，是決定片劑成型性的重要條件。保持處方不變，調(diào)整壓力大小，考察分散片的崩解時(shí)限。結(jié)果見表5。

表5 壓力大小的考查

結(jié)果表明，壓力對(duì)藥片的崩解和外形影響很大。從表5可以看出，壓力與崩解時(shí)間成正比。

能源互聯(lián)網(wǎng)統(tǒng)籌了智能電網(wǎng)、微電網(wǎng)、泛能網(wǎng)等概念，但智能電網(wǎng)是能源互聯(lián)網(wǎng)的基礎(chǔ)和核心，是能源轉(zhuǎn)化和配置的重要平臺(tái)。能源互聯(lián)網(wǎng)的架構(gòu)如圖2所示。

2.3 處方優(yōu)化 選擇崩解劑用量、填充劑比例和壓力為考查因素設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)(表6)，以崩解時(shí)間作為指標(biāo)，篩選制備楊黃總黃酮分散片的最優(yōu)處方。結(jié)果見表7。

表6 因素水平表

表7 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)結(jié)果分析

根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，各因素的影響次序?yàn)?A＞C＞B，MCC與乳糖之比影響最大。最佳處方為:A2B3C3，即 MCC∶乳糖為6∶2，立崩用量為 7%，壓力大小為3 kg。

2.4 驗(yàn)證試驗(yàn) 按最佳處方與工藝制備3批楊黃總黃酮分散片，考察分散片的外觀、硬度、崩解時(shí)間。結(jié)果所得片劑外觀光潔，硬度較好，崩解時(shí)間分別為18、16、16 s，表明處方合理、工藝穩(wěn)定。

2.5 質(zhì)量控制

2.5.1 含量測(cè)定 標(biāo)準(zhǔn)曲線:精密稱取蘆丁對(duì)照品25.0 mg，用70%乙醇溶解并定容于50 mL量瓶中，配成0.5 mg/mL的溶液。分別吸取0.0、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0 mL 標(biāo)準(zhǔn)液于 50 mL 量瓶，加入4.0 mL AlCl3溶液，搖勻，加15 mL去離子水后用70%乙醇定容?？瞻纵o料溶液同樣處理做空白，30℃水浴10 min，放冷20 min后，在408.20 nm處測(cè)定吸光度值。以濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)、吸光度A為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得方程:A=0.028 C-0.001，R2=0.999 4，曲線在 1 ～40 μg/mL 范圍內(nèi)線性良好。

楊黃總黃酮分散片含量測(cè)定:取楊黃總黃酮部位分散片10片，研細(xì)混勻，精密稱定細(xì)粉0.25 g(約相當(dāng)于黃酮25.0 mg)于50 mL量瓶，70%乙醇超聲后定容，過濾，精密量取續(xù)濾液5.0 mL于50 mL量瓶，加70%乙醇定容，精密吸取5.0 mL與5.0 mL 1%AlCl3絡(luò)合10 min后在408.2 nm波長處測(cè)定吸光度。測(cè)得片劑總黃酮含量為6.46%，RSD為1.97%。

2.5.2 片重差異 按《中國藥典》2010年版一部附錄ⅠD規(guī)定操作，平均片重為0.248 g，重量限度為±7.5%以內(nèi)，表明片重差異合格。

2.5.4 脆碎度 按《中國藥典》2010年版二部附錄ⅤE規(guī)定操作，測(cè)得失重0.62%，不超過1%，符合規(guī)定。

2.5.5 崩解時(shí)限 按《中國藥典》2010年版一部附錄ⅫA操作，測(cè)得平均崩解時(shí)限為17 s，符合規(guī)定。

3 結(jié)論與討論

3.1 試驗(yàn)結(jié)果表明，主藥含量10%，填充劑為MCC與乳糖(6∶2)，粘合劑為5%PVP K17乙醇溶液，濕法制粒，外加7%立崩和適量硬脂酸鎂，壓片，壓力控制在3 kg，為制備楊黃總黃酮分散片的最佳處方工藝。

3.2 主藥含量 參照《中華本草》楊黃日服用量6～15 g，每天服用9片以內(nèi)，計(jì)算得到主藥含量10%為宜。

3.3 按照等量遞增的方法使藥物和輔料能夠充分地混合均勻，提高崩解效率。

3.4 單沖壓片機(jī)壓片時(shí)，人工操作壓力、速度、次數(shù)等不同造成的各種干擾使片劑崩解時(shí)產(chǎn)生差異，在實(shí)際大批量生產(chǎn)過程中，使用的制粒壓片機(jī)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、機(jī)械化，能生產(chǎn)外形更加美觀，崩解更加穩(wěn)定快速，質(zhì)量更加符合要求的片劑。

［1］戴玉成，圖力古爾.中國東北野生食藥用真菌圖志［M］.北京:科學(xué)出版社，2007:164-166.

［2］Huang HY，Chieh SY，Tso TK，et al.Orally administered mycelial culture of Phellinus linteus exhibits antitumor effects in hepatoma cell-bearing mice［J］.J Ethnopharmacol，2011，133(2):460-466.

［3］Kim BC，Choi JW，Hong HY，et al.Heme oxygenase-1 mediates the anti-inflammatory effect of mushroom Phellinus linteus in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages［J］.J Ethnopharmacol，2006，106(3):364-371.

［4］Lee YS，Kim YH，Shin EK，et al.Anti-angiogenic activity of methanol extract of Phellinus linteus and its fractions［J］.Journal of Ethnopharmacology，2010，131(1):56-62.

［5］Shon MY，Kim TH，Nak JS.Antioxidants and free scavenging activity of phellinus baumii(Phellinus of hymenochaetaceae)extracts［J］.Food Chemistry，2003，(82):593-597.

［6］高行恩，史經(jīng)略.桑黃保健果醋的開發(fā)與研究［J］.中國調(diào)味品，2008(12):59-61，83.