雅健 趙建輝 彭云水 朱芳華 王春平 牛潤嶺 宋鐵鷹 石戰(zhàn)英

手術(shù)創(chuàng)傷可誘發(fā)多種應(yīng)激反應(yīng)及術(shù)后炎性反應(yīng)，強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)可抑制免疫功能，免疫功能低下又可加重炎性反應(yīng)，過度的炎性反應(yīng)不利于患者預(yù)后，增加感染易感性和殘留腫瘤細(xì)胞的生存機(jī)率。右美托咪啶應(yīng)用于椎管內(nèi)麻醉手術(shù)中，具有鎮(zhèn)靜效果好，呼吸循環(huán)穩(wěn)定，不良反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，并可提高麻醉質(zhì)量，減少鎮(zhèn)痛藥的需求，已得到臨床麻醉醫(yī)師的普遍認(rèn)可［1，2］。然而右美托咪啶對直腸癌根治術(shù)患者免疫系統(tǒng)的影響尚未見報道。本研究擬探討不同劑量右美托咪啶輔助椎管內(nèi)麻醉對直腸癌根治術(shù)患者免疫功能的影響，為臨床合理用藥提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究已獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，并與患者或其家屬簽署知情同意書。擇期行直腸癌根治術(shù)患者60例，年齡45～64歲，性別不限，體重指數(shù)18～30 kg/m2，美國麻醉師協(xié)會(ASA)分級Ⅰ或Ⅱ級。肝腎功能未見異常。采用隨機(jī)數(shù)字表法，隨機(jī)分為4組，每組15例。對照組(C組)、右美托咪啶 0.3μg·kg-1·h-1組(D1組)、右美托咪啶0.5 μg·kg-1·h-1組(D2組)和右美托咪啶 0.7 μg·kg-1·h-1組(D3組)。4組患者的年齡、體重、性別比、手術(shù)時間、出血量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 4組患者一般資料各指標(biāo)、手術(shù)時間及出血量的比較n=15，±s

表1 4組患者一般資料各指標(biāo)、手術(shù)時間及出血量的比較n=15，±s

D2組 56±7 23±6 160±17 279±37 D3組58±8 24±5 157±35 265±46

1.2 方法 術(shù)前常規(guī)禁食、禁飲。麻醉前肌內(nèi)注射阿托品0.5 mg和苯巴比妥那100 mg。入室后監(jiān)測心電圖(ECG)、血壓(BP)、心率(HR)、血氧飽和度(SpO2)。開放靜脈通路。局麻下行橈動脈穿刺置管監(jiān)測有創(chuàng)血壓，頸內(nèi)靜脈穿刺置管監(jiān)測中心靜脈壓(CVP)。行椎管內(nèi)麻醉，麻醉平面控制在T6～S5時開始手術(shù)，常規(guī)面罩吸氧(氧流量3 L/min)。麻醉起效后D1～D3組按照0.5μg/kg劑量給予4μg/ml的右美托咪啶(批號：11110734，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司)靜脈輸注(10 min)后分別改為0.3、0.5、0.7μg/kg維持;C組則相同的方式靜脈輸注等量0.9%氯化鈉溶液。

1.3 觀察指標(biāo) 分別于麻醉前30 min(T0)、麻醉后1 h(T1)、麻醉后2 h(T2)、術(shù)畢(T3)、術(shù)后24 h(T4)和48 h(T5)采集外周靜脈血樣2 ml，加入EDTAk2抗凝管中待測，檢測時取100μl抗凝全血，加入 CD3FITC/CD8PE/CD45PerCP/CD4APC或CD3FITC/CD16+56PE/CD45PerCP/CD19APC(碧迪醫(yī)療器械有限公司，上海)熒光抗體20μl，混勻后室溫避光放置20 min，再加入1∶10稀釋的FACS溶血素2 ml，混勻后室溫避光放置10 min，離心(1 500 r/min)5 min，去上清液，加入 PBS緩沖液2 ml，離心(1 000 r/min)5 min，去上清液，加500 μl PBS 懸浮。采用BD FACSAria流式細(xì)胞儀(BD公司，美國)檢測T淋巴細(xì)胞亞群(、、、/比值)以及 NK細(xì)胞()、B細(xì)胞(CD19+)的百分比。檢測前以熒光微球calibrite 4colour校準(zhǔn)儀器光路使其分辨率達(dá)到最佳工作狀態(tài)，采用cellquest pro軟件獲取與分析數(shù)據(jù)。建立FSC/SSC，SSC/CD45，SSC/CD3熒光點(diǎn)圖，調(diào)節(jié)FSC、SSC、FL熒光電壓、FSC閾值，熒光補(bǔ)償使細(xì)胞在圖中分布在合適的位置，在SSC/CD45圖中圈出淋巴細(xì)胞群為R1，SSC/CD3圖中圈出T淋巴細(xì)胞群為R2，建立、、、散點(diǎn)圖并分別設(shè)置為顯示R1或R2門內(nèi)的細(xì)胞，獲取細(xì)胞總數(shù)10 000個，設(shè)十字門分析、，，，分子的百分比。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，組內(nèi)比較采用重復(fù)測量設(shè)計的方差分析，組間比較采用成組t檢驗(yàn)。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

表2 4組患者各時點(diǎn)T淋巴細(xì)胞亞群、B細(xì)胞以及NK細(xì)胞比較n=15，±s

表2 4組患者各時點(diǎn)T淋巴細(xì)胞亞群、B細(xì)胞以及NK細(xì)胞比較n=15，±s

注：與T0比較，*P ＜0.05;與D1組比較，#P ＜0.05;與D2組比較，△P ＜0.05

D3組 12±4 6±47±38±47±47±5

3 討論

直腸癌根治手術(shù)時間長、損傷范圍大，術(shù)中存在輸血、低體溫、高血糖等因素，這些應(yīng)激因素可直接作用于免疫系統(tǒng)或激活交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)，使T細(xì)胞以及NK細(xì)胞的數(shù)量或活性降低，從而造成免疫抑制［3］。某些麻醉藥物也可影響免疫活性細(xì)胞的功能以及炎性介質(zhì)的基因表達(dá)和分泌，尤其對腫瘤患者，麻醉藥抑制NK細(xì)胞及淋巴細(xì)胞功能可能加速殘余腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移［4］，因而長時間的麻醉就可能對腸道腫瘤患者的免疫功能造成更不利的影響。本研究結(jié)果顯示，與T0比較，4組患者在T1～4的、、/比值以及的百分比均下降(P＜0.05)，D1～D3組患者在T5的、、/比值以及的百分比下降(P＜0.05)，說明右美托咪啶和直腸癌根治術(shù)手術(shù)創(chuàng)傷對患者都存在免疫抑制作用。

有研究表明，右美托咪啶可降低炎性細(xì)胞的反應(yīng)性，抑制促炎因子的釋放［5，6］。其可能機(jī)制為：右美托咪啶可抑制環(huán)氧合酶-2、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、TNF-α、IL-6及凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3等的表達(dá)［5，7-9］。本研究結(jié)果顯示，隨右美托咪啶劑量的上升 T淋巴細(xì)胞亞群(、/比值)、NK細(xì)胞()及B淋巴細(xì)胞()的百分比在一定范圍內(nèi)呈下降趨勢，表明右美托咪啶對直腸癌根治術(shù)患者免疫功能的抑制作用，在一定范圍內(nèi)存在劑量依賴性。

綜上所述，右美托咪啶對直腸癌根治術(shù)患者的免疫功能有抑制作用，在一定范圍內(nèi)存在劑量依賴性。

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