閆香庭 王文立 張偉 莫中福 毛麗梅 朱玉權(quán) 宋鐵鷹 李玉霞

凋亡是指在特定時空發(fā)生的，受機體嚴格調(diào)控的細胞“自殺”現(xiàn)象，凋亡的過程受眾多的基因調(diào)控，天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)是細胞凋亡過程中重要的效應(yīng)者和執(zhí)行者，不管是腫瘤壞死因子受體介導(dǎo)的凋亡通路，還是線粒體介導(dǎo)的凋亡通路，均需要caspase-3的激活和發(fā)揮凋亡效應(yīng)。然而該信號通路在卵巢漿液性腫瘤中的表達及其與增殖和凋亡的相關(guān)性所知甚少。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2004年6月至2005年6月筆者在河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院病理科學習時的存檔蠟塊，卵巢漿液性囊腺瘤組(OSA組)12例;卵巢漿液性交界性腫瘤組(OS-BT組)18例;卵巢漿液性囊腺癌組(OSC組)46例，其中包括高分化16例，中分化20例，低分化10例;其中有淋巴轉(zhuǎn)移者22例，無轉(zhuǎn)移24例。另取正常卵巢組織(NOT組)蠟塊10例作為對照。年齡16～82歲，術(shù)前未行放、化療或服用激素類藥物。

1.2 方法 應(yīng)用免疫組織化學 S-P法對 NOT、OSA、OS-BT、OSC標本中的表達情況進行檢測，光鏡雙盲法下觀察切片，每個標本切片取10個高倍視野。結(jié)果判定方法如下：(1)選染色均勻的陽性表達區(qū)域，以著色細胞占視野細胞總數(shù)的多少分級。0：無陽性細胞;1：陽性細胞數(shù)＜25%;2：陽性細胞數(shù)26%～50%;3：陽性細胞數(shù)＞50%。(2)按著色細胞染色強弱分：0：陰性;1：弱，淡黃色;2：中等，棕黃色;3：強，棕褐色。按(1)、(2)的數(shù)值相加判斷結(jié)果，0～2為陰性(-);3～4為弱陽性(+);5～6為強陽性(++)，弱陽性(+)和強陽性(++)均按陽性統(tǒng)計。

1.3 統(tǒng)計學分析應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，組間比較采用單因素方差分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，兩變量關(guān)系采用簡單相關(guān)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 Caspase-3蛋白在不同組別的表達情況 Caspase-3蛋白在OSC組的陽性表達率明顯低于其在NOT、OS-BT和OSA組的表達(P ＜0.05)。見表1。

表1 Caspase-3蛋白在不同組別的表達情況 例(%)

2.2 Caspase-3蛋白在OSC病例不同分級中的表達情況 46例OSC病例中Caspase-3蛋白的陽性表達率在三級不同分化程度間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表2。

表2 Caspase-3蛋白在OSC病例不同分級中的表達情況例(%)

2.3 Caspase-3蛋白的陽性表達率與淋巴結(jié)浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系Caspase-3蛋白的陽性表達率與淋巴結(jié)浸潤轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)關(guān)系(r=-0.322，P=0.029＜0.05)，caspase-3蛋白在發(fā)生轉(zhuǎn)移的OSC病例中的陽性表達率明顯低于未發(fā)生轉(zhuǎn)移的OSC病例(P ＜0.05)。見表3。

表3 caspase-3蛋白的陽性表達率與淋巴結(jié)浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系 例

3 討論

凋亡是指在特定時空發(fā)生的，受機體嚴格調(diào)控的細胞“自殺”現(xiàn)象，凋亡的過程受眾多的基因調(diào)控，AKT信號傳導(dǎo)途徑在凋亡過程中發(fā)揮了重要的作用［1，2］，但其對凋亡的影響，目前尚缺乏明確的結(jié)論。甚至部分研究結(jié)果相互矛盾，部分研究表明，活化的AKT可直接磷酸化促凋亡蛋白;或直接或間接磷酸化轉(zhuǎn)錄因子家族，負性調(diào)節(jié)某些促凋亡轉(zhuǎn)錄因子，抑制凋亡的發(fā)生，調(diào)控細胞存活。

Caspase-3是細胞凋亡過程中重要的效應(yīng)者和執(zhí)行者，不管是腫瘤壞死因子受體介導(dǎo)的凋亡通路，還是線粒體介導(dǎo)的凋亡通路，均需要caspase-3的激活和發(fā)揮凋亡效應(yīng)。AKT信號傳導(dǎo)途徑可通過多種途徑影響細胞周期素的生成或抑制caspase-3 的活性［3］。

本研究發(fā)現(xiàn)，caspase-3蛋白在OSC組的陽性表達率明顯低于其在NOT、OSBT和OSA組的表達(P＜0.05);caspase-3蛋白的陽性表達率與淋巴結(jié)浸潤轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)關(guān)系(r=-0.322，P=0.029＜0.05)，caspase-3蛋白在發(fā)生轉(zhuǎn)移的OSC病例中的陽性表達率明顯低于未發(fā)生轉(zhuǎn)移的OSC病例(P＜0.05)，表明caspase-3蛋白在OSC的發(fā)生與發(fā)展中起重要作用，但在46例OSC病例中caspase-3蛋白的陽性表達率在三級不同分化程度間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，可能與本研究的樣本量不大有關(guān)，還有待進一步研究。

總之，Caspase-3蛋白在OSC中的表達明顯低于其在NOT、OSA、OS-BT和OSC中的表達，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的OSC中的表達明顯低于未發(fā)生轉(zhuǎn)移者，提示凋亡相關(guān)基因的失活或低表達在惡性腫瘤的演進和發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。

1 Robey RB，Hay N.Mitochondrial hexokinases，novel mediators of the antiapoptotic effects of growth factors and Akt.Oncogene，2006，25：4683-4696.

2 Maurer U，Charvet C，Wagman AS，et al.Glycogen synthase Kinase-3 regulates mitochondrial outer membrane permeabilization and apoptosis by destabilization of MCL.Mol Cell，2006，21：749-760.

3 Manning BD，Cantley LC.AKT/PKB signaling：Navigating downstream.Cell，2007，129：1261-1274.