何春容,楊 芳,劉小樂,范 濤,胡曉榕,張 仙

(廣東省深圳市福田區(qū)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,廣東深圳,518000)

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥(ICP)是以妊娠期出 現(xiàn)瘙癢及黃疸為特點(diǎn),能引起較高的胎兒早產(chǎn)率及圍產(chǎn)兒死亡率,受到臨床醫(yī)師的重視。ICP的發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚。由于其好發(fā)于妊娠中晚期,而此時(shí)是雌激素合成的高峰期,因此有學(xué)者認(rèn)為ICP與雌激素有關(guān)。但是也有報(bào)道稱ICP患者血清雌激素水平與正常孕婦相比未見明顯升高,而是由于患者對(duì)雌激素敏感度增加或雌激素降低膽酸代謝而導(dǎo)致ICP。本研究測(cè)定ICP患者血清雌三醇(E3)和絨毛促性腺激素-β(β-hCG)水平,并分析產(chǎn)后雌激素受體(ER)的表達(dá)情況,探討ER與ICP之間的相關(guān)性,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2010年3月—2013年3月于本院住院分娩的70例孕婦作為研究對(duì)象,其中ICP患者32例,正常孕婦38例;孕婦年齡23～39歲,平均(27.5±4.7)歲;孕齡35～40周,平均(37.7±2.6)周。將ICP患者納入研究組,正常孕婦納入對(duì)照組。2組孕婦年齡、孕齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 研究組納入標(biāo)準(zhǔn)

研究組納入標(biāo)準(zhǔn)[1]:①妊娠中晚期出現(xiàn)全身或局部皮膚瘙癢癥狀;②血清轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)有中度升高;③因妊娠導(dǎo)致血清生化升高;④乙肝五項(xiàng)檢測(cè)抗體呈陰性;⑤產(chǎn)后生化、體征以及相關(guān)臨床癥狀消失。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣本收集 2組孕婦均于分娩前30 min空腹肘靜脈取血5 mL,雙盲編號(hào),離心后收集血清,置于-40℃冰箱保存?zhèn)溆谩．a(chǎn)前10 min內(nèi)將胎盤母體中央組織取出,組織面積為3cm×2 cm×2 cm,用10%甲醛固定后,石蠟包埋。

1.3.2 血清β-hCG和E3水平測(cè)定 采用放射免疫法對(duì)β-hCG和E3水平進(jìn)行測(cè)定,放免試劑盒均由北京華英生物技術(shù)研究所提供。

1.3.3 胎盤免疫組化 采用免疫組織化學(xué)染色法對(duì)收集胎盤中ER、HCG表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)定。免疫組化染色前將石蠟切片,平均片厚5μ m,2組均同時(shí)采用免疫組化染色,采用SP-9002免疫組化染色試劑盒(北京博樂通生物科技有限公司),所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

判斷標(biāo)準(zhǔn)[2]分為以下2種,按照染色強(qiáng)度:無染色:0;輕微染色:1;中度染色:2;強(qiáng)染色:3。按照染色面積:無染色:0;細(xì)胞染色面積<25%:1;細(xì)胞染色面積25%～50%:2;細(xì)胞染色面積>50%:3。綜合2種標(biāo)準(zhǔn),判定積分之和,參考標(biāo)準(zhǔn):-:0;+:1～2;2+:3～4;3+:5～6。其中,≥+作為陽(yáng)性結(jié)果,-作為陰性結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有研究數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,患者資料均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用 t檢驗(yàn),組間率的比較采用 χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性采用Spearman關(guān)聯(lián)性分析,以 P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組血清β-hCG和E3水平比較

研究組E3水平為(18.53±9.73)ng/mL,顯著高于對(duì)照組的(12.64±5.49)ng/mL,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);研究組和對(duì)照組β-hCG水平分別為(17.03±8.56)ng/mL和(15.95±7.41)ng/mL,經(jīng)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 2組胎盤組織中ER、HCG表達(dá)陽(yáng)性率比較

研究組ER陽(yáng)性表達(dá)率為71.88%,顯著高于對(duì)照組的26.32%(P<0.05);而2組HCG陽(yáng)性表達(dá)率經(jīng)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

表1 2組胎盤組織中ER、HCG表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比[n(%)]

2.3 研究組血清β-hCG、E3水平與ER相關(guān)性分析

Spearman關(guān)聯(lián)性分析結(jié)果顯示,研究組血清E3與胎盤組織ER表達(dá)顯著正相關(guān)(r=0.604,P<0.05);而血清β-hCG水平與胎盤組織HCG表達(dá)無顯著相關(guān)性(r=0.198,P>0.05)。

3 討 論

ICP是出現(xiàn)于中晚期妊娠期間,以生化檢查膽汁淤積以及皮膚瘙癢為主要癥狀的疾病。該病隨著妊娠的持續(xù),一般在產(chǎn)后逐漸消失。有研究[3]報(bào)道該病在以后妊娠中存在復(fù)發(fā)的可能,但是在未孕期間,患者無明顯肝臟疾病的臨床表現(xiàn),肝功能檢查也正常。對(duì)母親來講,ICP是一種良性疾病,即使出現(xiàn)持續(xù)性瘙癢也不會(huì)給孕婦帶來不利的病理影響;對(duì)胎兒來講,ICP會(huì)帶來嚴(yán)重后果,主要包括流產(chǎn)、死胎或早產(chǎn)等。關(guān)于ICP的發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清除,有報(bào)道[4]稱ICP的孕婦中,胎兒臍血內(nèi)膽汁酸水平明顯升高,而雌激素會(huì)降低膽酸代謝,因此有學(xué)者認(rèn)為雌激素水平與ICP發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)聯(lián)。

雌激素在孕婦體內(nèi)合成釋放的過程與ICP模式相近,它的合成高峰期在妊娠中晚期。研究[5]發(fā)現(xiàn)單胞胎妊娠ICP發(fā)生率明顯低于雙胞胎妊娠,而雙胞胎妊娠孕婦雌激素水平和孕激素水平是單胞胎妊娠的5倍以上。Oztekin[6]調(diào)查發(fā)現(xiàn),有ICP病史的婦女口服避孕藥發(fā)生ICP的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)顯著增加。針對(duì)ICP的發(fā)病機(jī)制,學(xué)者們做了大量基礎(chǔ)性研究,目前主要有5種假說[7]:膽汁滲透性明顯增加;鈉泵(Na-K-ATP酶)活性降低;雌激素代謝異常;膜流動(dòng)性明顯降低和肝蛋白合成異常。雌激素可能通過影響其中一種或幾種途徑來介導(dǎo)膽汁淤積。陳新萍[8]證實(shí)乙炔雌二醇會(huì)特異性地改變竇狀膜區(qū),使?；悄懰猁}的攝取量降低;而竇狀膜區(qū)的改變與鈉泵密切相關(guān)。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),雌激素與肝臟內(nèi)葡糖醛酸和硫酸鹽結(jié)合,一般認(rèn)為這些結(jié)合物具有膽汁淤積的作用;通過一系列復(fù)雜的過程導(dǎo)致體內(nèi)硫酸鹽與葡糖醛酸失衡,進(jìn)而引發(fā)膽汁淤積。黃桂瓊[9]研究發(fā)現(xiàn),ICP孕婦體內(nèi)雌激素前體物質(zhì)脫氫表雄酮濃度降低,導(dǎo)致了雌激素如E2、E3等合成減少。作者認(rèn)為當(dāng)ICP發(fā)生時(shí),胎兒存在器官功能障礙,而脫氫表雄酮濃度降低則提示毒性作用于胎兒腎上腺素。本研究顯示研究組E3水平為(18.53±9.73)ng/mL,對(duì)照組為(12.64±5.49)ng/mL,研究組明顯高于對(duì)照組(P<0.05);且研究組ER陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于對(duì)照組(P<0.05);Spearman關(guān)聯(lián)性分析結(jié)果顯示,研究組血清E3與胎盤組織ER表達(dá)顯著正相關(guān)(r=0.604,P<0.05)。這一結(jié)果提示ICP孕婦中雌激素水平顯著升高,此外雌激素受體水平也相應(yīng)增加,這與患者體內(nèi)雌激素持續(xù)刺激有關(guān),雌激素的持續(xù)刺激可以反饋性增加ER水平,而ER水平增加又進(jìn)一步提高胎盤對(duì)雌激素的敏感性。

絨毛促性腺激素是由胎盤合成并在孕婦血、尿中大量存在的一種激素。有研究[10]發(fā)現(xiàn)ICP孕婦β-hCG水平顯著高于正常孕婦,其原因可能是胎盤血供不足導(dǎo)致絨毛變性壞死,因此可以將β-hCG作為胎盤功能檢測(cè)的一項(xiàng)指標(biāo)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),研究組β-hCG略高于對(duì)照組,但2組βhCG水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);而2組HCG陽(yáng)性表達(dá)率經(jīng)比較差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);血清β-hCG水平與胎盤組織HCG表達(dá)無顯著相關(guān)性(r=0.198,P>0.05)。這可能與本研究中ICP孕婦在產(chǎn)前進(jìn)行積極治療或提前終止妊娠有關(guān)。

綜上,ICP孕婦體內(nèi)E3和ER水平明顯升高,且血清E3與胎盤組織ER表達(dá)明顯正相關(guān),這一變化可能與ICP發(fā)生有關(guān),并對(duì)胎兒預(yù)后產(chǎn)生一定的不良影響。

[1]Sinakos E,Lindor K D.Bile acid profiles in intrahepatic cholestasis of pregnancy:is this the solution to the enigma of intrahepatic cholestasis of pregnancy[J].American Journal of Gastroenterology,2010,105(03):596.

[2]聶克克,馬學(xué)真,何信佳,等.乳腺癌HER-2基因熒光原位雜交檢測(cè)的臨床應(yīng)用[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2010,14(3):4.

[3]郭尚云.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥對(duì)圍產(chǎn)兒結(jié)局的影響[J].中國(guó)婦幼保健,2011,26(13):1959.

[4]林安平,盧春冬,王琳,等.1 340例妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的回顧性分析[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,13(2):102.

[5]殷艷,李芳,王冬梅,等.維吾爾族雌激素β受體基因多態(tài)性與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的相關(guān)性分析[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,2012,29(3):319.

[6]Oztekin D,Aydal I,Oztekin O.Predicting fetal asphyxia in intrahepatic cholestasis of pregnancy[J].Obstetrical and Gynecological Survey,2010,65:158.

[7]何毛毛.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥胎兒宮內(nèi)缺氧機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志:電子版,2011,7(1):62.

[8]陳新萍,張智,劉絲蓀,等.胎盤ABCB4表達(dá)下調(diào)對(duì)膽汁酸排泌功能的負(fù)性調(diào)節(jié)作用及其對(duì)圍生兒預(yù)后的影響[J].中國(guó)病理生理雜志,2011,27(5):1012.

[9]黃桂瓊,劉正飛,何毛毛,等.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者血漿促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素增長(zhǎng)受限[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,14(10):624.

[10]曹麗瓊.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥相關(guān)基因的研究[J].國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志,2011,38(3):189.