謝國(guó)旗，顧 韋，蔣建新

膿毒癥是由病原微生物入侵機(jī)體感染引起的全身?yè)p傷性防御反應(yīng)癥候群，通常認(rèn)為是機(jī)體過度炎癥反應(yīng)或炎癥失控所致，是嚴(yán)重創(chuàng)傷、損傷、外科大手術(shù)后常見的并發(fā)癥。胃腸道以其在體內(nèi)獨(dú)特的生理環(huán)境參與了膿毒癥病理生理過程，腸道黏膜損害是膿毒癥促發(fā)多器官功能障礙綜合征的重要病理環(huán)節(jié)，腸黏膜屏障功能不全與膿毒癥患者的內(nèi)毒素血癥、系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)綜合征以及多器官功能衰竭密切相關(guān)，臨床上主要表現(xiàn)為應(yīng)激性胃腸黏膜病變、中毒性腸麻痹、腸道微生態(tài)失衡、腸道通透性增加、細(xì)菌易位所致的腸源性感染[1]。因此，預(yù)防和治療腸黏膜屏障功能不全，將對(duì)膿毒癥患者預(yù)后有重要意義。本研究通過檢測(cè)腸道通透性和糞便菌群分析兩個(gè)方面初步探討了膿毒癥患者腸黏膜屏障功能障礙情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 膿毒癥組：選擇2009￣01—2010￣12收住筆者所在醫(yī)院的20例患者，均符合文獻(xiàn)[2]的診斷標(biāo)準(zhǔn)，被證實(shí)有細(xì)菌存在或有高度可疑的感染灶，其診斷標(biāo)準(zhǔn)包括下列3項(xiàng)或3項(xiàng)以上體征：①體溫>38℃或<36℃；②心率>90次/min；③呼吸頻率>20次/min，或過度通氣使動(dòng)脈血二氧化碳分壓（PaCO2）<32 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）；④外周白細(xì)胞計(jì)數(shù)>12×109/L或<4×109/L或未成熟粒細(xì)胞>10%。對(duì)照組：同期接診的外傷患者20例，無(wú)任何部位感染征象，血常規(guī)正常。兩組患者性別、年齡構(gòu)成無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 儀器和試劑 721型分光光度計(jì)；800型醫(yī)用離心機(jī)；PEG-600貯備液：準(zhǔn)確稱取PEG-600（分子量范圍570～660）20.000 g溶于水中，用蒸餾水定容于1000 ml容量瓶中，使用時(shí)根據(jù)需要稀釋成不同濃度的溶液。

1.3 Fe（SCN）3-CHCl3二相系統(tǒng)光度法檢測(cè)腸道通透性 尿PEG600測(cè)定檢測(cè)IBF方法的建立[3]：在不同波長(zhǎng)下測(cè)定有色CHCl3相和水相中Fe（SCN）3的最大吸收波長(zhǎng)。測(cè)定不同時(shí)間吸光度。將PEG-600貯備液稀釋成標(biāo)準(zhǔn)系列，作校準(zhǔn)曲線。計(jì)算回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。將2.00 ml A液和2.00 ml CHCl3混合于10 ml試管中組成兩相系統(tǒng)。將0.2 ml PEG-600標(biāo)準(zhǔn)溶液或尿樣加入含有二相系統(tǒng)的離心管中，用不含PEG的兩相系統(tǒng)中的CHCl3相作參比，最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。膿毒癥組與對(duì)照組患者尿中的PEG含量分別計(jì)算均數(shù)（M）與標(biāo)準(zhǔn)差（SD），超過對(duì)照組M＋2SD者視為通透性增加。

1.4 糞便菌群分析檢測(cè)腸道菌群失調(diào) 參考文獻(xiàn)[4]糞便涂片診斷腸道菌群的理論和基礎(chǔ)，對(duì)每份糞便標(biāo)本快速涂片革蘭染色以快速診斷腸道菌群失調(diào)癥，按照菌種總數(shù)及菌群分布分為正常大便及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度菌群失調(diào)癥。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間比較用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 各組患者的尿樣檢測(cè)結(jié)果 尿樣測(cè)定發(fā)現(xiàn)膿毒癥組患者與對(duì)照組相比，尿液中 PEG-600含量升高 [（90.589±17.565） vs （83.867±6.234） μg，P<0.05]，提示膿毒癥組患者有腸道通透性增加。

2.2 各組菌群失調(diào)率 膿毒癥組高于對(duì)照組（P<0.05）。見表1。

表1 兩組患者菌群失調(diào)情況

3 討 論

膿毒癥發(fā)病機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，其發(fā)病機(jī)制不僅包括感染、炎癥、免疫、凝血等基本問題，與腸功能障礙也存在密切關(guān)系。研究證實(shí)，膿毒癥可使胃腸道黏膜缺血缺氧，胃腸道運(yùn)動(dòng)減弱，腸上皮細(xì)胞損傷，腸道病原微生物粘附、定植能力改變，厭氧菌數(shù)量減少，腸黏膜上粘附、定植的致病菌數(shù)量增加發(fā)生腸道菌群紊亂以及腸黏膜通透性增加[1]。腸黏膜屏障是指由機(jī)械屏障（腸上皮分泌的黏液、腸上皮細(xì)胞及其緊密連接等）、生物屏障（腸道微生態(tài)）和免疫屏障等組成的機(jī)體防御體系，主要作用是能阻止腸道內(nèi)有害物質(zhì)進(jìn)入體循環(huán)[5]。本研究通過檢測(cè)腸道通透性和糞便菌群分析兩個(gè)方面初步探討了膿毒癥患者腸黏膜屏障功能障礙情況。結(jié)果顯示，膿毒癥組患者有腸道通透性增加、菌群失調(diào)發(fā)病率顯著高于對(duì)照組（P<0.05），說明膿毒癥患者確實(shí)易導(dǎo)致腸黏膜屏障功能障礙。

另一方面，膿毒癥由于腸黏膜屏障破壞，腸道通透性增加，致病菌大量繁殖以及缺血缺氧、細(xì)胞因子作用，導(dǎo)致寄生于腸道內(nèi)的微生物和（或）內(nèi)毒素通過某種途徑越過腸黏膜屏障，大量侵入正常情況下為無(wú)菌的腸道外組織，如腸壁漿膜、腸系膜淋巴結(jié)、門靜脈及其他遠(yuǎn)處器官，出現(xiàn)腸源性感染并刺激已活化的單核和巨噬細(xì)胞釋放大量的細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)，誘發(fā)和加重膿毒癥和多器官功能障礙，故腸功能衰竭又被稱為膿毒癥、多器官功能衰竭的扳機(jī)。腸道在膿毒癥發(fā)病過程的作用主要是通過缺血-再灌注損傷、腸道菌群失調(diào)、內(nèi)毒素釋放炎癥介質(zhì)等機(jī)理，造成腸道細(xì)菌和內(nèi)毒素移位，啟動(dòng)或加重炎癥介質(zhì)的“瀑布效應(yīng)”，導(dǎo)致失控性SIRS[5]。因此，膿毒癥與腸功能障礙互相影響，極易形成惡性循環(huán)。探討膿毒癥患者的腸黏膜屏障功能，加強(qiáng)早期對(duì)膿毒癥患者腸道屏障功能的保護(hù)，對(duì)防治腸源性細(xì)菌和毒素移位以及膿毒癥、多器官功能障礙綜合征具有重要的意義。

[1]孟廣剛，任愛民.膿毒癥胃腸黏膜損傷及中西醫(yī)保護(hù)研究進(jìn)展[J].北京中醫(yī)藥，2010，29（10）：795-796.

[2]姚詠明，盛志勇，林洪遠(yuǎn)，等.膿毒癥定義及診斷的新認(rèn)識(shí)[J].中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)，2004，16（6）：321-323.

[3]姚玉川，馮天杰，趙江華，等.慢性消化病患者腸黏膜屏障功能障礙與腸道微生態(tài)失衡的關(guān)系[J].中華消化雜志，2006，26（4）：267-268.

[4]張秀榮，徐智民.腸道菌群糞便涂片檢查圖譜[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2000.1223.

[5]Baumgart DC，Dignass AU.Intestinal barrier function[J].Curr Opin Clin Nutr Metab Care，2002，5（7）:685-694.