楊梅，李敏，卿光明，何剛，王興貴，楊行軍，葛亞風(fēng)

魚(yú)腥草為三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的新鮮全草或干燥地上部分[1]， 原名“蕺”，始載于《名醫(yī)別錄》，列為下品。別名有岑草、俎菜、臭豬巢、臭腥草、側(cè)耳根、豬鼻孔、九節(jié)蓮等。分布于陜西、甘肅及長(zhǎng)江流域以南各地[2]，尤以浙江蓬都、青田、松陽(yáng)，江西永豐，貴州安順、貴陽(yáng)，福建沙縣，云南會(huì)澤，河南正陽(yáng)，湖南長(zhǎng)沙，廣西柳州，四川西昌、雅安、德陽(yáng)，重慶，安徽績(jī)溪等地最為適宜[3,4]。具有清熱解毒，消癰排膿，利尿通淋的功效，臨床用于肺癰吐膿，痰熱喘咳，熱痢，熱淋，癰腫瘡毒等病癥。

《中華本草》中記載[2]：“魚(yú)腥草果實(shí)為蒴果，卵圓形，具宿存花柱；種子多數(shù)，卵形。魚(yú)腥草種子發(fā)芽率不高，發(fā)芽適宜溫度為17～25℃變溫，發(fā)芽率為20%左右?！蹦壳皩?duì)魚(yú)腥草藥材的研究主要集中在化學(xué)成分、藥理作用、種質(zhì)資源及栽培技術(shù)等方面，而對(duì)魚(yú)腥草種子的形態(tài)及萌發(fā)特性的研究未見(jiàn)報(bào)道。

1 材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

從四川、貴州、云南等5省收集魚(yú)腥草種子樣品共計(jì)10份。詳見(jiàn)表1。

表1 魚(yú)腥草種子樣品來(lái)源

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

微型生化培養(yǎng)箱SPX-250B(上海悅豐儀器表有限公司）；解剖顯微鏡(ZEISS Stemi 2000-C）；電子分析天平BP121S(北京Sartorius天平有限公司）；鑷子；培養(yǎng)皿；濾紙等。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 種子形態(tài)觀察

采用肉眼和解剖顯微鏡觀察果實(shí)、種子外觀形態(tài)。魚(yú)腥草果實(shí)為蒴果，卵圓形，黃綠色，頂端開(kāi)裂，具宿存花柱；種子多數(shù)，卵形，表面具方格網(wǎng)紋，黃棕色至紅棕色，具特異芳香氣。如圖1～4。

圖1 魚(yú)腥草果穗

圖2 魚(yú)腥草果實(shí)

圖3 ～4 魚(yú)腥草種子

2.2 種子千粒重測(cè)定

選擇千粒法測(cè)定。先將樣品充分混合，從中隨機(jī)取3份，每份1000粒，稱(chēng)重，精確到0.00001g，取其平均值，即種子的千粒重[5~6]。采用spss18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，對(duì)種子千粒重進(jìn)行單因素兩兩比較[7]。結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果：由表2可知，YXC-8的千粒重最重（62.69 mg），YXC-5的千粒重最輕（38.17 mg）。由上可知，魚(yú)腥草種子極小，平均千粒重為49.19 mg。

表2 魚(yú)腥草種子千粒重比較（n=3）

2.3 種子發(fā)芽實(shí)驗(yàn)

2.3.1 光照條件的考察 取YXC-4魚(yú)腥草種子樣品，置于鋪有兩層濾紙直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，分別于25 ℃的黑暗與光照條件下進(jìn)行培養(yǎng)，三次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子，保持濾紙濕潤(rùn)，每天觀察并記錄種子萌發(fā)情況，待種子萌發(fā)達(dá)到最高時(shí)，以后再無(wú)萌發(fā)種子出現(xiàn)時(shí)的天數(shù)為末次計(jì)數(shù)時(shí)間，計(jì)算種子發(fā)芽率[8]。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 光照條件初步考察結(jié)果

結(jié)果：魚(yú)腥草種子開(kāi)始萌發(fā)時(shí)所需時(shí)間為8天，光照條件對(duì)魚(yú)腥草種子的萌發(fā)具有明顯的影響，黑暗條件下，魚(yú)腥草種子不發(fā)芽。

2.3.2 種子萌發(fā)實(shí)驗(yàn) 將魚(yú)腥草種子置于鋪有兩層濾紙直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，在25 ℃恒溫光照條件下培養(yǎng)，3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒。每天觀察并記錄種子萌發(fā)情況，待種子萌發(fā)達(dá)到最高時(shí)，以后再無(wú)萌發(fā)種子出現(xiàn)時(shí)的天數(shù)為末次計(jì)數(shù)時(shí)間[8]，計(jì)算種子發(fā)芽率。結(jié)果見(jiàn)表4。并采用解剖顯微鏡觀察魚(yú)腥草種子萌發(fā)不同階段的形態(tài)（如圖5～12）。

發(fā)芽率 = 最終種子發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)×100%

發(fā)芽勢(shì) = 規(guī)定時(shí)間內(nèi)種子發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)×100%（本實(shí)驗(yàn)以第17 d作為計(jì)算發(fā)芽勢(shì)的時(shí)間）

發(fā)芽指數(shù)（GI）= ∑（Gt/Dt ）（Gt為在t天的種子發(fā)芽數(shù)，Dt為相對(duì)應(yīng)的種子發(fā)芽天數(shù)）[5]

表4 不同產(chǎn)地魚(yú)腥草種子的發(fā)芽情況

圖5 (1-9天，吸脹階段)

圖6 (8-11天，胚根突破種皮)

圖7 （10-13天，根莖迅速生長(zhǎng)）

圖8（12-15天，開(kāi)始生長(zhǎng)須根，胚芽發(fā)育成兩片嫩葉）

圖9 （14-18天，胚芽發(fā)育成的嫩葉見(jiàn)光變綠）

圖10（17-22天，種皮脫落）

圖11 （21-24天，胚芽逐漸發(fā)育成莖和葉） 圖12（24-25天，根系更發(fā)達(dá)）圖5～12 魚(yú)腥草種子不同萌發(fā)階段

3 結(jié)論與討論

3.1 通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可知，魚(yú)腥草種子為光敏感種子，即光照是該種子發(fā)芽的基本條件。這種現(xiàn)象在我國(guó)現(xiàn)知的三白草科（Saururaceae）4種植物中均未見(jiàn)報(bào)道。但究竟光照時(shí)間和光照強(qiáng)度是如何影響魚(yú)腥草種子發(fā)芽，何種光照條件最適合魚(yú)腥草種子萌發(fā)尚在研究中。

3.2 千粒重表示的是一千粒種子的重量，它是體現(xiàn)種子成熟度及飽滿程度的一項(xiàng)指標(biāo)[9]，千粒重越重，飽滿種子占供試樣品質(zhì)量的百分率越高，種子品質(zhì)越好。魚(yú)腥草種子極小，其中YXC-8的千粒重為62.69 mg，YXC-5的千粒重38.17 mg。平均千粒重為49.19 mg。其種子千粒重大小是否與魚(yú)腥草的種質(zhì)資源、生長(zhǎng)環(huán)境等不同有關(guān)，尚需更深入的研究。

3.3 YXC-5樣品的千粒重最小，其外觀形態(tài)為卵形，淺黃色，且種子的發(fā)芽率為0，可能是因?yàn)榉N子還未成熟。

3.4 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察到Y(jié)XC-6樣品霉變較多，對(duì)比其他樣品貯藏方式及試驗(yàn)結(jié)果表明，YXC-6樣品在收集之前已被病菌感染，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)過(guò)程中霉變嚴(yán)重，影響到種子的發(fā)芽率。

3.5 一般而言，某些種子隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，種子的活力降低，種子的發(fā)芽勢(shì)也降低，但種子的發(fā)芽率不一定降低。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可知，其中YXC-1、YXC-8、YXC-9的發(fā)芽率高，但其發(fā)芽勢(shì)較低，這可能與種子的貯藏年限有關(guān)。貯藏時(shí)間與貯藏條件對(duì)魚(yú)腥草種子活力的影響以及何種條件最適合魚(yú)腥草種子的貯藏尚在研究中。

目前，魚(yú)腥草的繁殖方式為種莖繁殖，但是魚(yú)腥草種子實(shí)驗(yàn)證明其發(fā)芽率高，60%的樣品發(fā)芽率超過(guò)70%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出《中華本草》記載魚(yú)腥草種子發(fā)芽率為20%左右的報(bào)道，究竟在生產(chǎn)中能否采用種子繁殖，有待進(jìn)一步通過(guò)出苗率等實(shí)驗(yàn)探索魚(yú)腥草種子在自然條件下的發(fā)芽能力。通過(guò)該研究，不僅可以了解魚(yú)腥草的種子特性，還為后續(xù)進(jìn)行魚(yú)腥草藥材的種質(zhì)保存、育種等研究奠定基礎(chǔ)。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版I部[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:208.

[2] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局.《中華本草》編委會(huì).中華本草.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1999.

[3] 葉榮華,藍(lán)云龍,施林妹,等.魚(yú)腥草種源試驗(yàn)初報(bào)[J].浙江林業(yè)科技,2008,2(28):34.

[4] 楊健,郭書(shū)臺(tái),楊學(xué)禮,等.不同產(chǎn)地魚(yú)腥草質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2007, 6(27):62.

[5] 國(guó)際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì).顏啟傳,畢辛華(譯).國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程[S].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1985.

[6] 盧魏魏,朱再標(biāo),郭巧生,等.白花蛇舌草種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志,2012,37(1):1743.

[7] 郭巧生,張賢秀,王艷茹,等.夏枯草種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究[J].中國(guó)中藥雜志,2009,34(7):812.

[8] 李衛(wèi)東.益母草種子發(fā)芽和生活力檢驗(yàn)方法的研究[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥,2010,11(12):15.

[9] 賀玉林,李先恩,淡紅梅,等.遠(yuǎn)志種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].種子,2007,26(1):106.