李松賓，王偉麗，朱明偉，高芳

(商丘市食品藥品檢驗所，河南 商丘 476000)

HPLC測定枳術(shù)解郁膠囊中蒼術(shù)素的含量

李松賓*，王偉麗，朱明偉，高芳

(商丘市食品藥品檢驗所，河南 商丘 476000)

目的：建立枳術(shù)解郁膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用HPLC對枳術(shù)解郁膠囊中蒼術(shù)素的含量進(jìn)行測定。結(jié)果：枳術(shù)解郁膠囊中蒼術(shù)素的含量在0.009 9～0.029 6 μg有良好的線性關(guān)系，r=0.999 9，平均回收率為99.31%，RSD=0.70%。結(jié)論：建立了枳術(shù)解郁膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，該方法操作易行，穩(wěn)定可靠，用于枳術(shù)解郁膠囊中蒼術(shù)素的含量，可以用于該制劑的質(zhì)量控制。

枳術(shù)解郁膠囊；蒼術(shù)素；HPLC

枳術(shù)解郁膠囊是經(jīng)批準(zhǔn)生產(chǎn)的醫(yī)院中藥制劑[1](豫藥制字Z05140089)，處方由枳實、蒼術(shù)、蒼耳、沉香等中藥組成，有健脾胃，消痞滿，行氣解郁之功效，主要用于胸脘痞滿、脘腹脹疼，噯氣以及慢性胃腸病等。該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只有薄層色譜鑒別，沒有具體的定量控制方法。根據(jù)處方和藥理作用確定蒼術(shù)是枳術(shù)解郁膠囊的主藥之一，蒼術(shù)素為其有效成分，為保證制劑質(zhì)量的穩(wěn)定可靠，采用高效液相法對制劑中的蒼術(shù)素進(jìn)行了含量測定，以提高制劑標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與試藥

Agilent1260高效液相色譜儀；色譜柱Agilent-C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)，AUW220D電子天平，蒼術(shù)素對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：111924-201001，供含量測定用)，枳術(shù)解郁膠囊(商丘市中醫(yī)院，規(guī)格：0.3 g/粒，批號：110801，111023，111121)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[2]

Agilent-C18色譜柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流動相為甲醇-水(80∶20)，檢測波長為240 nm，流速為1.0 mL·min-1，進(jìn)樣量為10 μL。理論塔板數(shù)按蒼術(shù)素峰計算不低于5 000。

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取對照品蒼術(shù)素，精密稱定19.74 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻。再精密量取上述溶液2 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備[3]取重量差異項下供試品，混勻，精密稱取1.0 g，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇100 mL稱定重量，加熱回流1 h，放冷，并補足重量，搖勻，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液。

2.2.3 陰性對照品溶液的制備 除蒼術(shù)外，其他各藥按處方量投料，然后按2.2.2項下方法配制陰性對照品溶液。

2.3 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗

取上述陰性對照溶液、對照品溶液、供試品溶液適量，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，蒼術(shù)素的保留時間為7.84 min，理論塔板數(shù)不低于9 000。HPLC圖見圖1。

2.3.1 線性關(guān)系考察 取3.948 μg·mL-1對照品標(biāo)準(zhǔn)母液溶液：精密量取母液10，15，20，25，30 mL分別置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻。再分別精密量取上述溶液50 mL，分別置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻，即配制不同濃度的對照品溶液，分別精密吸取10 μL注入液相色譜儀，測定，以蒼術(shù)素峰面積為縱坐標(biāo)，以蒼術(shù)素進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程：Y=1 981.4X-2.888，得蒼術(shù)素線性范圍0.009 9～0.029 6 μg，r=0.999 9。

A.陰性對照 B.蒼術(shù)素對照品 C.樣品圖1 枳術(shù)解郁膠囊及對照品HPLC圖

2.3.2 精密度試驗 精密吸取供試品溶液10 μL,6次重復(fù)進(jìn)樣，測定各次峰面積，結(jié)果RSD=0.86%。

2.3.3 重復(fù)性試驗 稱取同一批供試品(批號：111023)，精密稱定樣品6份，照2.2.2項下方法制備，進(jìn)樣，測定，結(jié)果平均含量為0.211 2 mg·g-1，RSD=1.24%。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液(批號：111023)，分別于0，1，2，4，8，12 h精密吸取10 μL,進(jìn)樣，測定，結(jié)果RSD=0.49%，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.5 加樣回收率試驗 取已知含量的樣品共9份(批號：111023)，分別精密稱取0.5 g，置錐形瓶中,分別精密加入3個高低濃度的蒼術(shù)素對照品(以0.098 7 mg·mL-1蒼術(shù)素對照品為母液)，照2.3項下方法制備，進(jìn)樣10 μL，測定，計算蒼術(shù)素的加樣回收率，結(jié)果見表1 。

表1 枳術(shù)解郁膠囊中蒼術(shù)素的加樣回收試驗

2.4 樣品含量測定

按上述含量測定方法，測定3批樣品(批號為110801，111023，111121)中蒼術(shù)素含量，測定結(jié)果見表2。

表2 枳術(shù)解郁膠囊中蒼術(shù)素的測定(n=3) mg/粒

3 結(jié)論

在供試品制備的過程中，由于中藥成分的多樣與復(fù)雜性，曾考慮到其他樣品對蒼術(shù)的影響，比較了超聲和回流[4-5]不同提取方法的提取，超聲1 h，提取的蒼術(shù)素的量僅為0.846 mg·g-1，提取不完全。同時比較了回流30 min，1 h，1.5 h，結(jié)果證明回流30 min，樣品提取不完全，回流1 h和1.5 h提取效果差不多，所以本實驗采取了加熱回流1 h的提取方法。

通過實驗研究，建立了枳術(shù)解郁膠囊制劑的質(zhì)量定量控制方法，而且經(jīng)方法學(xué)驗證該方法穩(wěn)定可靠，專屬性較強，可為枳術(shù)解郁膠囊制劑質(zhì)量定量控制提供依據(jù)。

[1] 河南省食品藥品監(jiān)督管理局.河南省醫(yī)療機構(gòu)制劑標(biāo)準(zhǔn)[S].豫藥制字：Z05140089.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010：150.

[3] 南洋,賈凌云,李倩，等.RP-HPLC法同時測定蒼術(shù)中蒼術(shù)素和白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ的含量[J].藥物分析雜志,2010,30(1):17-20.

[4] 李偉,文紅梅,崔小兵.HPLC法測定白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ的含量[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐,2005,19(5):35.

[5] 張金龍,秦昆明,徐自升，等.南北蒼術(shù)炮制前后HPLC特征圖譜及蒼術(shù)素含量測定研究[J].科學(xué)技術(shù)與工程,2011,11(20):4843-4847.

DeterminationAtractylodininZhizhujieyuCapsulesbyHPLC

Li Song-bin*,WANG Wei-li,ZHU Ming-wei,Gao Fang

(ShangqiuInstituteforFoodandDrugControl,HenanShangqiu476000,China)

Objective： To establish a standard for determination atractylodin in Zhizhujieyu Capsules.Methods： Atractylodin in Zhizhujieyu capsules was determined by HPLC.Results: The linear range of atractylodin was 0.009 9 μg～0.029 6 μg,r=0.999 9.The average recovery of atractylodin was 99.31%,RSD=0.70%.Conclusion: The method is simple,sensitive and accurate,and can be used to determine atractylodin in Zhizhujieyu capsules and its quality control.

Zhizhujieyu capsules; Atractylodin; HPLC

2012-06-01)

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李松賓，男，主管藥師，研究方向：藥物分析，E-mail：weili1221@163.com