劉紫淳，李英華，曲俊業(yè)，李玉山

(沈陽藥科大學 中藥學院，遼寧 沈陽 110016)

中藥科技

沙蓬地上部分三萜皂苷類化學成分的研究

劉紫淳，李英華，曲俊業(yè)，李玉山*

(沈陽藥科大學 中藥學院，遼寧 沈陽 110016)

目的：對沙蓬地上部分三萜皂苷類化學成分進行研究。方法：采用D-101大孔吸附樹脂柱色譜、反復硅膠柱色譜、半微量制備型高效液相色譜和制備薄層色譜分離、純化，根據(jù)1H-和13C-NMR波譜數(shù)據(jù)進行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從沙蓬地上部分乙醇提取物的正丁醇萃取物中分離得到4個齊墩果烷型三萜皂苷類化合物，分別鑒定為木鱉子苷Ⅱc(1)、偽人參皂苷RT1(2)、齊墩果酸-3-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(3)、齊墩果酸-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(4)。結(jié)論：化合物2和3從藜科植物中首次分離得到，4從沙蓬屬植物中首次分離得到。

沙蓬；化學成分；齊墩果烷型三萜皂苷

蒙藥沙蓬為藜科植物沙蓬Agriophyllumsquarrosum(L.)Moq.的干燥地上部分，始載于《認藥白晶鑒》，分布于我國東北、華北、西北、河南及西藏等地[1-2]。性平，味苦、澀；具有祛疫、清熱、解毒、利尿之功效，主治瘟疫、頭痛、赤目、黃疸、腎熱、口舌生瘡等癥[3]。為了闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，課題組對沙蓬地上部分的化學成分進行研究報道[4-6]。在繼續(xù)深入的研究過程中，又從沙蓬地上部分乙醇提取物的正丁醇萃取物中分離得到4個齊墩果烷型三萜皂苷類化合物，它們的化學結(jié)構(gòu)式見圖1。

圖1 化合物1～4化學結(jié)構(gòu)

1 儀器與材料

Bruker AV-400核磁共振波譜儀(瑞士Bruker公司)；LC-10AT高效液相色譜儀，SPD-10A紫外檢測器；色譜柱DFVELOSIL ODS-HG-5NOMURA CHEMICAI Mfg.No.2911328(300 mm×10 mm，5 μm)(日本Shimadzu公司)。

薄層色譜用硅膠GF254(10～40 μm)、柱色譜用硅膠(200～300 μm)(青島海洋化工廠)。D-101大孔吸附樹脂(滄州寶恩公司)。高效液相色譜用甲醇(分析純，天津博迪化工股份有限公司)，水經(jīng)重蒸餾后與有機溶劑按體積比配成流動相；其余試劑(分析純，市售)。

沙蓬藥材于2010年9月采自內(nèi)蒙古，經(jīng)沈陽藥科大學李玉山教授鑒定為沙蓬Agriophyllumsquarrosum(L.)Moq.的干燥地上部分。藥材標本保存在沈陽藥科大學生藥學教研室。

2 提取與分離

取干燥的沙蓬藥材2 kg，粉碎，用體積分數(shù)70%的乙醇回流提取3次(3，2，2 h)，回收溶劑得乙醇浸膏150 g。將乙醇浸膏用0.5 L水制成懸浮溶液，依次用石油醚、正丁醇分別萃取3次，得到石油醚萃取物10 g、正丁醇萃取物70 g。全部正丁醇萃取物通過D-101大孔樹脂柱色譜、半微量制備型高效液相柱色譜、硅膠柱色譜、制備薄層色譜分離、純化，得到化合物1(17.5 mg)、2(25.5 mg)、3(30.7 mg)和4(25.6 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色無定型粉末(甲醇)。在硅膠薄層色譜上與10%濃硫酸乙醇試劑噴霧后加熱顯紫色斑點。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)給出齊墩果烷型三萜皂苷元的7個甲基質(zhì)子信號δ0.76(3H，s，H3-26)，0.79(3H，s，H3-24)，0.87(3H，s，H3-30)，0.89(3H，s，H3-29)，0.91(3H，s，H3-23)，1.00(3H，s，H3-25)，1.11(3H，s，H3-27)，1個連氧次甲基質(zhì)子信號δ3.15(1H，dd，J=11.6，4.0 Hz，H-3)，1個烯質(zhì)子信號δ5.21(1H，s，H-12)等特征信號。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波譜圖數(shù)據(jù)(表1)給出齊墩果烷型三萜皂苷元的碳特征信號[7]，包括7個甲基碳信號δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.7(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1個連氧次甲基碳信號δ90.9(C-3)，1組雙鍵碳信號δ123.9(C-12)和144.8(C-13)，1個羰基碳信號δ178.3(C-28)。1H-NMR譜給出3個單糖基的端基質(zhì)子信號δ4.34(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)、4.52(1H，d，J=7.6 Hz，H-1″)、5.34(1H，d，J=8.2 Hz，H-1?)。13C-NMR波譜給出3組單糖基碳信號(表2)，包括1個吡喃葡萄糖醛酸基[δ106.3(C-1′)、75.1(C-2′)、86.6(C-3′)、70.9(C-4′)、77.5(C-5′)、170.5(C-6′)]，1個吡喃木糖基[δ105.6(C-1″)、74.9(C-2″)、77.1(C-3″)、71.0(C-4″)、67.1(C-5″)]，1個吡喃葡萄糖基[δ95.7(C-1?)、73.8(C-2?)、78.6(C-3?)、72.1(C-4?)、78.2(C-5?)、62.5(C-6?)]。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻[8-9]數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物1為木鱉子苷(momordin)Ⅱc。

化合物2：白色無定型粉末(甲醇)。在硅膠薄層色譜，與10%濃硫酸乙醇試劑噴霧后加熱顯紫色斑點。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)波譜圖給出齊墩果烷型三萜皂苷元上的7個甲基質(zhì)子信號δ0.83(3H，s，H3-26)，0.87(3H，s，H3-24)，0.95(3H，s，H3-30)，0.97(3H，s，H3-29)，0.98(3H，s，H3-23)，1.08(3H，s，H3-25)，1.19(3H，s，H3-27)，1個連氧次甲基質(zhì)子信號δ3.17(1H，m，H-3)，1個烯質(zhì)子信號δ5.28(1H，br s，H-12)等特征信號。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波譜圖數(shù)據(jù)(表1)給出齊墩果烷型三萜皂苷元碳特征信號[7]，包括7個甲基碳信號δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.8(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1個連氧次甲基碳信號δ90.8(C-3)，1組雙鍵碳信號δ123.9(C-12)和144.8(C-13)，1個羰基碳信號δ178.1(C-28)，以上數(shù)據(jù)表明化合物2的皂苷元與1相同。1H-NMR譜給出3個糖基相應的端基質(zhì)子信號δ4.41(1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)、4.59(1H，d，J=7.1 Hz，H-1″)、5.41(1H，d，J=8.0 Hz，H-1?)。13C-NMR譜給出3組單糖基碳信號(表2)，包括1個吡喃葡萄糖醛酸基[δ105.6(C-1′)、83.5(C-2′)、75.1(C-3′)、74.0(C-4′)、77.6(C-5′)、171.7(C-6′)],1個吡喃木糖基[δ106.4(C-1″)、75.0(C-2″)、77.6(C-3″)、71.0(C-4″)、67.2(C-5″)],1個吡喃葡萄糖基[δ95.8(C-1?)、74.0(C-2?)、78.3(C-3?)、71.2(C-4?)、78.7(C-5?)、62.5(C-6?)]?；衔?和1的區(qū)別在于C-3位的糖鏈上的木糖基連接在葡萄糖醛酸基的C-2位上。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道[10]數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物2為偽人參皂苷(pseudoginsenoside)RT1。

化合物3：白色無定型粉末(甲醇)。在硅膠薄層色譜與10%濃硫酸乙醇試劑噴霧后加熱顯紫色斑點。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)波譜給出三萜皂苷元上的7個甲基質(zhì)子信號δ0.83(3H，s，H3-26)、0.87(3H，s，H3-24)、0.95(3H，s，H3-30)、0.97(3H，s，H3-29)、0.98(3H，s，H3-23)、1.08(3H，s，H3-25)、1.19(3H，s，H3-27)，1個連氧次甲基質(zhì)子信號δ3.23(1H，m，H-3)，1個烯質(zhì)子信號δ5.29(1H，br s，H-12)等特征信號。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波譜圖數(shù)據(jù)(表1)給出齊墩果烷型三萜皂苷碳特征信號，包括7個甲基碳信號δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.7(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1個連氧次甲基碳信號δ90.8(C-3)，1組雙鍵碳信號δC123.8(C-12)和144.8(C-13)，1個羰基碳信號δC178.1(C-28)，以上數(shù)據(jù)表明化合物3的苷元為齊墩果酸[7]。1H-NMR波譜給出3個糖基相應的端基質(zhì)子信號δ4.42(1H，d，J=7.7 Hz，H-1′)、4.60(1H，d，J=7.4 Hz，H-1″)、5.42(1H，d，J=8.1 Hz，H-1?)。13C-NMR波譜給出3組單糖基碳信號(表2)，包括1個吡喃葡萄糖醛酸基[δ105.6(C-1′)、72.1(C-2′)、86.8(C-3′)、70.9(C-4′)、77.6(C-5′)、ND(C-6′)],1個吡喃阿拉伯糖基[δ106.3(C-1″)、74.9(C-2″)、73.9(C-3″)、70.9(C-4″)、67.1(C-5″)],1個吡喃葡萄糖基[δ95.7(C-1?)、75.0(C-2?)、78.7(C-3?)、71.1(C-4?)、78.3(C-5?)、62.5(C-6?)]。經(jīng)與文獻值[11]對照，確定化合物3為齊墩果酸-3-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷{(diào)oleanolicacid3-O-[α-L-arabinopyranosyl-(1→3)-β-D-glucuronopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranosyl ester}。

化合物4：白色無定型粉末(甲醇)。在硅膠薄層色譜與10%濃硫酸乙醇試劑顯紫色斑點。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)波譜給出三萜皂苷元上的7個甲基質(zhì)子信號δ0.84(3H，s，H3-26)、0.87(3H，s，H3-24)、0.95(3H，s，H3-30)、0.97(3H，s，H3-29)、0.98(3H，s，H3-23)、1.08(3H，s，H3-25)、1.19(3H，s，H3-27)，1個連氧次甲基質(zhì)子信號δ3.2(1H，d，4.2，H-3)，1個烯質(zhì)子信號δ5.29(1H，br s，H-12)等特征信號。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波譜圖數(shù)據(jù)(表1)給出7個甲基碳信號δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.8(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1個連氧次甲基碳信號δ90.8(C-3)，1組雙鍵碳信號δ123.9(C-12)和144.8(C-13)，1個羰基碳信號δ178.1(C-28)，以上數(shù)據(jù)表明化合物4苷元亦為齊墩果酸[7]。1H-NMR波譜給出3個糖基的端基質(zhì)子信號δ4.61(1H，d，J=7.2 Hz，H-1′)、4.42(1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)、5.42(1H，d，J=8.0 Hz，H-1?)。13C-NMR波譜給出3組單糖基碳信號(表2)，包括1個吡喃阿拉伯糖基[δ105.6(C-1′)、72.1(C-2′)、86.7(C-3′)、71.0(C-4′)、67.1(C-5′)],2個吡喃葡萄糖基[δ106.3(C-1″)、73.9(C-2")、77.6(C-3″)、71.2(C-4″)、76.9(C-5″)、62.5(C-6″)]、[δ95.7(C-1?)、75.0(C-2?)、78.7(C-3?)、71.2(C-4?)、78.3(C-5?)、62.5(C-6?)]。經(jīng)與文獻值[12]對照，確定化合物4為齊墩果酸-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷{(diào)oleanolic acid 3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-arabinopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranosyl ester}。

表1 化合物1～4中皂苷元的13C-NMR數(shù)據(jù)(CD3OD，100MHz，δC)

表2 化合物1～4中單糖基的13C-NMR數(shù)據(jù)(CD3OD，100MHz，δC)

續(xù)表2

4 結(jié)論

在對沙蓬地上部分的化學成分研究過程中，從沙蓬地上部分乙醇提取物中分離得到了4個齊墩果烷型三萜皂苷類化合物，其中化合物2和3為從藜科(Chenopodiaceae)植物首次分離得到，4為首次從沙蓬屬(Agriophyllum)植物中分離得到。

[1] 內(nèi)蒙古植物志編輯委員會.內(nèi)蒙古植物志[M].第二版.

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TriterpeneSaponinsfromtheAerialPartsofAgriophyllumsquarrosum

LIU Zi-chun，LI Ying-hua，QU Jun-ye，LI Yu-shan*

(SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica，ShenyangPharmaceuticalUniversity，Shenyang110016，China)

Objective：To study triterpene saponins constituents fromAgriophyllumsquarrosum(L.)Moq.Methods：The chemical constituents were isolated by means of various chromatographic methods such as macro porous resin column chromatography，silica gel column chromatography and HPLC chromatography.Chemical characters and spectroscopic analysis，including1H-NMR and13C-NMR spectra，were employed for the structural identification.Results：Four compounds were isolated from then-BuOH extract of the aerial parts ofA.squarrosum，and their structures were identified as momordin Ⅱc(1)、pseudoginsenoside RT1(2)、oleanolic acid 3-O-[α-L-arabinopyranosyl-(1→3)-β-D-glucuronopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranoside(3)、oleanolic acid 3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-arabinopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranoside(4).Conclusion：Compounds2and3were isolated from the family Chenopodiaceae for the first time，and Compound4was isolated from the genusAgriophyllumfor the first time.

Agriophyllumsquarrosum；Chemical constituents；Olean-type saponins

2013-05-29)

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李玉山，教授，博士，主要從事生藥學研究工作，Tel：(024)23986496，E-mail：lyshan888@126.com