張大偉 秦優(yōu)優(yōu) 習(xí) 勛 劉世浩 仲 磊 單東力 閆朝岐(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150081)

乳腺癌是嚴(yán)重威脅婦女健康及生活質(zhì)量的主要惡性腫瘤之一，尤其是絕經(jīng)期前后(我國50歲左右)婦女呈高發(fā)人群。雖然其手術(shù)方式不斷改進(jìn)，但早期診斷及治療甚為關(guān)鍵，故乳腺癌腫瘤標(biāo)志物檢測具有重要意義。內(nèi)皮素及其受體通過調(diào)節(jié)有絲分裂、細(xì)胞生存周期、血管重構(gòu)、腫瘤浸潤免疫細(xì)胞、侵襲轉(zhuǎn)移等方式在不同的腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。在乳腺腫瘤的轉(zhuǎn)移侵襲中內(nèi)皮素1(ET-1)表達(dá)增加。ET-1與受體A結(jié)合并與缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)協(xié)調(diào)分別促使腫瘤細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體(CCR7)，而CCR7能誘導(dǎo)趨化現(xiàn)象和侵襲轉(zhuǎn)移〔1〕。因此，阻斷ET-1生成，就可能阻斷乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究旨在探討血清ET-1在老年乳腺癌患者保乳手術(shù)與改良根治手術(shù)前后的表達(dá)水平，以及ET-1表達(dá)濃度與乳腺癌臨床分期、組織學(xué)分級的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 檢測對象 收集我科2010年10月至2012年9月乳腺癌患者40例，均為女性，年齡均＞50歲，平均年齡54歲。術(shù)前均經(jīng)活檢穿刺病理學(xué)證實為乳腺癌，術(shù)前均未行任何治療。保乳手術(shù)者，腫瘤距離正常切緣≥0.5 cm，術(shù)中快速病理證實各切緣無癌細(xì)胞存留;其中腫瘤≤2 cm 20例，1.5 cm≤腫瘤＜2 cm者10例，腫瘤＜1.5 cm 10例，其中5例患者不同意保乳治療，采用改良根治術(shù)治療。收集乳腺良性腫瘤疾病10例。無乳腺疾病10例，作為健康對照組。

1.2 標(biāo)本收集 采集健康志愿者及乳腺良性腫瘤患者、乳腺惡性腫瘤患者術(shù)前和術(shù)后3～5 d清晨空腹肘靜脈血3～5 ml，注入含10%乙二胺四乙酸二鈉和抑肽酶的試管中混勻，4℃下，3 000 r/min離心10 min，分離的血清用0.1% 三乙醇胺(TFA)6 ml酸化3 000 r/min離心20 min后取其上清液，放置于－70℃冰箱保存待測。

1.3 血清ET-1測定 采用放射免疫法測定血清ET-1，試劑盒購自長春市生物制品所。γ計數(shù)儀，美國bookman。主要技術(shù)參數(shù):ET-1測定范圍20～4 680 pg/ml，靈敏度10 pg/ml，回收率平均95% ～100%，批內(nèi)變異系數(shù)(CV)＜5%，批間CV＜10%，正常參考值38.78～71.50 pg/ml。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計量資料以±s表示，兩均數(shù)比較和配對比較均采用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 各組血清ET-1水平 乳腺癌患者術(shù)前血清ET-1水平明顯高于乳腺良性腫瘤患者和健康對照組(P＜0.01)，術(shù)后ET-1降低，但仍高于乳腺良性腫瘤患者和健康對照組(P＜0.01)。乳腺癌改良根術(shù)組與乳腺癌保乳手術(shù)組比較ET-1水平無顯著差異(P＞0.05)。見表1。

2.2 乳腺癌患者血清ET-1水平與臨床病理特征的關(guān)系 本組乳腺癌組織組織學(xué)分級Ⅰ～Ⅲ級者ET-1值明顯升高(P＜0.05)，但與腫塊大小無明顯相關(guān)(P＞0.05)。見表2。

表1 各組患者外科治療前后血清ET-1水平(± s，pg/ml)

表1 各組患者外科治療前后血清ET-1水平(± s，pg/ml)

與健康對照組比較:1)P＜0.01;與術(shù)前比較:2)P＜0.01

組別 n 術(shù)前 術(shù)后健康對照10 42.11±7.02 －乳腺癌改良根治術(shù)組 5 76.08±8.251) 54.34±8.751)2)乳腺癌保乳手術(shù)組 35 75.32±7.121) 53.14±9.681)2)乳腺良性疾病對照組10 43.85±9.28 44.53±8.26

表2 癌組織ET-1值與腫瘤大小、病理組織學(xué)分級、臨床分期(± s，pg/ml)

表2 癌組織ET-1值與腫瘤大小、病理組織學(xué)分級、臨床分期(± s，pg/ml)

臨床病理 n ET-1 P值腫瘤大小 ≤2.0 cm 20 68.12±8.12 ﹥0.05 1.5～2.0 cm 10 70.20±8.54≤1.5 cm 10 59.25±8.26組織學(xué)分級 Ⅰ 15 68.22±7.89 ﹤0.05Ⅱ15 82.88±9.98Ⅲ10 84.21±8.32 TNM分期 Ⅰ～Ⅱ 21 82.82±9.27 ﹤0.05Ⅲ9 79.20±8.54淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 陽性 8 69.29±7.65 ﹤0.05陰性22 68.85±7.58

3 討論

在正常人血液中ET主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，以非常低的生理濃度存在，發(fā)揮神經(jīng)調(diào)節(jié)因子或局部激素樣作用，對組織器官具有重要的生物學(xué)作用。ET有三種類型ET-1、ET-2和ET-3，它們共同特點是具有＜1個α螺旋及2個二硫基橋接〔1〕。其中ET-1生理作用最為突出，在乳腺癌患者血液中ET-1表達(dá)增加〔2〕，Armstrong 等〔3〕對 60 例乳腺癌患者的血漿ET-1水平進(jìn)行研究表明腫瘤組織含有大量ET-1〔5〕。在前列腺癌中，其特異性ETA R拮抗劑BQ-123對前列腺癌PC3細(xì)胞株增殖的抑制效應(yīng)具有時間依賴性，可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自然凋亡〔4〕。Mabjeesh 等〔4〕研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1 抑制劑 2-甲氧雌二醇(2-Methoxyestradil，2ME2)與BQ-123聯(lián)合作用于前列腺癌細(xì)胞時顯著增強(qiáng)2ME2誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性反應(yīng)。實踐證明，多西他賽和阿曲生坦聯(lián)合化療治療前列腺癌效果較好〔5〕。ET及其受體的相互作用可通過激活多種信號途徑和使某些標(biāo)志性分子水平上調(diào)或下調(diào)來促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展〔6〕，如上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)表達(dá)，促使癌細(xì)胞淋巴管生成〔7〕，為腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移提供重要的理論基礎(chǔ)。分子靶向治療將成為治療乳癌侵襲、轉(zhuǎn)移新的研究方向。

本研究結(jié)果與Armstrong等〔5〕研究結(jié)果一致。經(jīng)手術(shù)治療后其ET-1下降，但改良根治術(shù)組與保乳手術(shù)組比較ET-1下降無明顯差異，說明老年女性患者如乳腺癌腫塊≤2 cm，行保乳手術(shù)與改良根治術(shù)其血清ET-1表達(dá)程度無明顯差異。提示50歲以上老年乳腺癌患者行保乳手術(shù)治療與改良根治術(shù)治療預(yù)后可能無明顯差異，有待進(jìn)一步隨訪。ET-1能夠反映出乳腺癌惡性程度高低，其表達(dá)濃度與臨床分期呈正比。ET-1表達(dá)水平越低，腫瘤惡性度越低。采集靜脈血做ET-1含量測定方便、快捷，應(yīng)用于保乳手術(shù)具有一定參考價值。乳腺癌患者血清ET-1術(shù)前升高，術(shù)后顯著降低，癌組織不同病理分級中有顯著性差異，提示其可作為乳腺癌的一種腫瘤標(biāo)志物常規(guī)檢測。ET-1高表達(dá)可影響乳癌患者預(yù)后，因此術(shù)后均應(yīng)行輔助治療定期檢測血清ET-1表達(dá)水平，將有助于乳腺癌患者術(shù)后放、化療等輔助治療療效觀察，指導(dǎo)治療和判斷預(yù)后。

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