王 留 劉秀玲

（河南省商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院動物工程系，河南省商丘市 476000）

豬傳染性胸膜肺炎 （PCP）是由胸膜肺炎放線桿菌 （APP）引起的一種高度接觸性呼吸道疾病，1957年P(guān)attison等首次報道[1]，國內(nèi)自1990年楊旭夫等首次發(fā)現(xiàn)該病以來,現(xiàn)己成為影響我國養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的五大疫病之一[2]。豬傳染性胸膜肺炎可致各年齡段的豬發(fā)生急性和慢性感染，急性型豬傳染性胸膜肺炎以纖維素性出血性胸膜肺炎為主要特征,發(fā)病率和死亡率常在20%以上，最急性型的死亡率高達(dá)80%～100%；慢性型豬傳染性胸膜肺炎以纖維素性壞死性胸膜肺炎為主要特征，病原菌潛伏于豬群內(nèi)，可使豬只生長緩慢，平均日增重下降，飼料報酬降低，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。研究及臨床實踐表明，當(dāng)豬群發(fā)生偽狂犬、豬瘟、藍(lán)耳病、喘氣病、副豬嗜血桿菌等疾病時，豬的免疫系統(tǒng)遭到破壞，肺臟的防御功能被削弱，產(chǎn)生免疫抑制，從而使豬只對該病的易感性增加，易于繼發(fā)或混合感染該病,造成更大損失。

自2011年9月開始采用IHA方法對前來就診的豬群進(jìn)行采血檢測，并對檢測結(jié)果進(jìn)行分析，旨在為養(yǎng)豬場在養(yǎng)殖過程中預(yù)防和控制該病流行提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集與處理

按照無菌采血要求，對就診的未免疫豬群隨機(jī)采集血液樣本967份，采用前腔靜脈或耳靜脈采血法采集血液，離心分離血清，于56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體，用于血清學(xué)檢測。

1.2 檢測儀器與試劑

5～200μL微量移液器、微量振蕩器、離心機(jī)、電熱恒溫箱等購自江蘇金壇設(shè)備有限公司，冰箱購自海爾電器公司，96孔V型血凝反應(yīng)板購自海門天龍實驗器材廠，豬傳染性胸膜肺炎正向間接血凝抗體檢測試劑盒購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.3 檢測方法

將稀釋液滴于V型反應(yīng)板各孔中，每孔25μL；取被檢血清25μL于第1孔中，與稀釋液混合后吸取25μL加于第2孔，依次作倍比稀釋至第4孔；每孔加致敏紅細(xì)胞抗原25μL。每塊反應(yīng)板均設(shè)陽性、陰性血清對照，對照均加至8孔。加完后將反應(yīng)板置微量振蕩器上振蕩1～2分鐘，直至診斷液中的紅細(xì)胞分布均勻，從振蕩器上取下反應(yīng)板，蓋上一塊與反應(yīng)板大小相近的玻璃板，置37℃溫育2～3小時后觀察結(jié)果。

1.4 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

出現(xiàn) “++”的血清最高稀釋倍數(shù)為該血清的抗體效價，血清效價≥1∶8以上者判為陽性，效價≤1∶4者判為陰性，介于二者之間判為可疑，應(yīng)重新試驗。

2 結(jié)果與分析

應(yīng)用IHA方法共檢測血清樣本967份，其中檢出抗體陽性血清224份，血清抗體陽性率23.16%。由表1可見，不同豬群傳染性胸膜肺炎血清抗體陽性率具有一定的差異，生長育肥豬血清抗體陽性率最高 （39.68%），其次為哺乳母豬 （34.04%）、后備母豬 （21.88%）和哺乳仔豬 （16.14%），保育仔豬最低（15.97%）。

表1 豬傳染性胸膜肺炎抗體檢測結(jié)果

3 討論

豬傳染性胸膜肺炎是規(guī)?；i場的主要呼吸道傳染病之一，由于豬胸膜肺炎放線桿菌 （APP）血清型眾多，各型之間及同一血清型的不同菌株之間毒力和致病性均有差異，幾乎無交叉保護(hù)作用，因而導(dǎo)致該病的診斷、治療及預(yù)防比較困難。國外曾有報道生前無癥狀豬宰后64%有胸膜肺炎病變，73%能從肺中分離到豬胸膜肺炎放線桿菌。豬胸膜肺炎放線桿菌主要通過豬群間的接觸、空氣飛沫及污染物傳播,帶菌豬與慢性感染豬為本病的傳染源。豬營養(yǎng)不良和各種應(yīng)激因素可誘發(fā)和促使本病的發(fā)生與流行,如氣溫突變、空氣污染嚴(yán)重、通風(fēng)不良、寒冷潮濕,不同日齡的豬只混群飼養(yǎng)、密度過大、飼料質(zhì)量差、長途運輸?shù)染蓪?dǎo)致本病的發(fā)生。

本次調(diào)查的被檢血清樣品全部來自未經(jīng)豬傳染性胸膜肺炎疫苗免疫的豬群,因此血清學(xué)檢測陽性即可判斷該豬群已經(jīng)感染豬傳染性胸膜肺炎。調(diào)查結(jié)果證明，商丘地區(qū)不同豬群傳染性胸膜肺炎血清抗體陽性率在15.97%～39.68%之間,總體抗體陽性率為23.16%，未免疫豬傳染性胸膜肺炎血清抗體陽性率較高,表明商丘地區(qū)豬群傳染性胸膜肺炎野毒感染具有普遍性。

檢測結(jié)果還顯示，母豬群的傳染性胸膜肺炎血清抗體陽性率較高，可能與母豬群的隱性感染有關(guān)。由于母豬飼喂時間較長，若管理不嚴(yán)或圈舍條件有限，就極容易感染豬胸膜肺炎放線桿菌。如果感染強(qiáng)度沒有達(dá)到致病，母豬長期處于隱性帶菌狀態(tài)就容易產(chǎn)生抗體。保育仔豬血清抗體陽性率最低，因為保育豬恰好剛斷奶，母源抗體已經(jīng)消失，體內(nèi)抗體水平達(dá)到最低。調(diào)查結(jié)果與王天奇等[3]、李珂等[4]、張光輝等[5]的報道基本一致，而與李明彥等[6]對豫南地區(qū)豬常見傳染病抗體檢測的陽性率為74.6%相差較大,可能與調(diào)查對象的地域分布、感染情況、豬齡結(jié)構(gòu)的不同及養(yǎng)殖場的規(guī)模、管理、環(huán)境等因素有關(guān)。

IHA檢測方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速、簡便、適用性強(qiáng)等優(yōu)點，可作為豬傳染性胸膜肺炎臨床診斷的主要方法之一，在該病的流行病學(xué)調(diào)查和防控方面具有重要的指導(dǎo)意義。

[1]趙德明.豬病學(xué).張仲秋，沈建忠，譯.第八版.北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2000：357-367.

[2]楊旭夫，彭發(fā)泉.我國豬胸膜肺炎嗜血桿菌感染的確定和診斷.畜牧獸醫(yī)學(xué)報，1990，21（3)：243-245.

[3]王天奇，董發(fā)明，龍塔，等.洛陽地區(qū)規(guī)?；i場傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查.中國獸醫(yī)雜志，2006，42（11）：22-23.

[4]李珂，張方杰.河南部分規(guī)?；i場豬傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查.中國畜牧獸醫(yī)，2009，3（5）：181-183.

[5]張光輝，解金輝，陳靜，等.河南省豬傳染性胸膜肺炎血清學(xué)調(diào)查分析.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（6)：326-327.

[6]李明彥，董冰.豫南地區(qū)豬常見傳染病抗體檢測及分析. 畜牧與獸醫(yī)，2004，36（8）：33-34.