馬海霞 高景順 (義馬煤業(yè)集團公司總醫(yī)院檢驗科，河南 義馬 472300)

不穩(wěn)定性心絞痛與冠狀動脈粥樣硬化密切相關(guān)。以老年患者較為多見，而老年患者往往伴隨其他多種慢性疾病，如高血壓、糖尿病等，其對疾病的抵抗能力明顯降低。目前臨床研究顯示血鏈球菌感染是除血脂異常外另一項可誘發(fā)冠狀動脈粥樣硬化形成的危險因素〔1〕。本文通過對老年不穩(wěn)定性心絞痛患者口腔內(nèi)的血鏈球菌進行檢測，以期總結(jié)出血鏈球菌與不穩(wěn)定性心絞痛嚴重程度的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 于2011年1月至2012年1月在我院心內(nèi)科住院行冠狀動脈造影后明確診斷為冠心病的不穩(wěn)定性心絞痛患者中隨機選擇50例，組成不穩(wěn)定性心絞痛組，同時從我院體檢中心隨機選取年齡段匹配的體檢者30例，組成對照組。不穩(wěn)定性心絞痛組中，年齡62～84(平均67.23)歲，其中冠狀動脈單支狹窄者19例，兩支狹窄者18例，三支狹窄者13例。對照組年齡65～83(平均68.15)歲。兩組在性別、年齡、吸煙等基礎(chǔ)因素比較，未見顯著差異。見表1。

1.2 標本采集 受檢者知情同意。不穩(wěn)定性心絞痛組行冠狀動脈造影術(shù)后，于術(shù)后第2天下午3:00左右，留取非刺激狀態(tài)下的口腔唾液0.5 ml。同時在患者應用清水清潔口腔后，留取患者牙齦下方的菌斑。健康體檢者在體檢當日下午3:00左右，引用同樣方法留取口腔唾液和牙齦下菌斑。并立即送入實驗室進行接種。

表1 兩組基礎(chǔ)因素分析(n)

1.3 標本培養(yǎng) 所有放置標本的標本瓶均予充分震蕩混勻，后應用林格液稀釋，唾液稀釋至10-4倍，牙齦下菌斑稀釋至10－2倍，并將稀釋后的標本接種至NAYS-B培養(yǎng)基。隨后將培養(yǎng)皿置于混合有90%N2和10%CO2的環(huán)境中，37℃恒溫培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)皿恒溫培養(yǎng)24 h后，從培養(yǎng)皿中提取已嵌入培養(yǎng)基中的菌落轉(zhuǎn)種至血培養(yǎng)基中，再次放入混合有90%N2和10%CO2的37℃恒溫環(huán)境中，再次培養(yǎng)48 h。

1.4 標本鑒定 在于NAYS-B培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h后計算血鏈球菌的總菌數(shù);在血培養(yǎng)基培養(yǎng)72 h后，從培養(yǎng)皿中挑取菌落，應用隨機引物聚合酶鏈反應進行菌種鑒定。對照菌種均購自上海第二醫(yī)科大學口腔醫(yī)學研究所。

1.5 觀察指標 首先對血鏈球菌總菌數(shù)與不穩(wěn)定性心絞痛發(fā)生的相關(guān)性進行分析。隨后分析不穩(wěn)定性心絞痛嚴重程度與各菌種間的相關(guān)性。

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0軟件，計量數(shù)據(jù)以±s表示，計數(shù)數(shù)據(jù)以百分率表示，應用 t檢驗、χ2檢驗及相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組血鏈球菌數(shù)比較 兩組唾液及牙齦菌斑中培養(yǎng)出的菌數(shù)未見明顯差異(P＞0.05)。見表2。

2.2 兩組各型血鏈球菌比較 兩組在唾液及牙齦菌斑中緩癥鏈球菌和口腔鏈球菌均無明顯差異(P＞0.05)。而在不穩(wěn)定性心絞痛組唾液和牙齦菌斑中血鏈球菌和高氏鏈球菌檢出率明顯高于對照組(P＜0.05)。見表3。

2.3 血鏈球菌數(shù)與不穩(wěn)定性心絞痛嚴重程度 經(jīng)相關(guān)性分析后發(fā)現(xiàn)，無論是在唾液中還是在牙齦菌斑中，其菌群數(shù)量與不穩(wěn)定性心絞痛均呈直線相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)。見表4。

表2 兩組血鏈球菌數(shù)比較(CFU/L，±s)

表2 兩組血鏈球菌數(shù)比較(CFU/L，±s)

組別 n 唾液中總菌數(shù) 牙齦下菌斑菌數(shù)不穩(wěn)定性心絞痛組50 4 552.88±965.90 414.14±117.99對照 30 4 361.27±970.65 377.10±118.75 t/P值 0.857/0.3951)0.179/0.793

表3 兩組唾液、牙齦菌斑中鏈球菌陽性比較(n)

表4 不穩(wěn)定性心絞痛患者不同嚴重程度比較(CFU/L，±s)

表4 不穩(wěn)定性心絞痛患者不同嚴重程度比較(CFU/L，±s)

組別 n 唾液中總菌數(shù) 牙齦下菌斑菌數(shù)單支狹窄19 3 593.89±367.94 318.00±101.90兩支狹窄 18 4 651.00±395.15 436.38±68.52三支狹窄 13 5 818.61±423.31 523.84±78.81 r/P值0.828/0.000 0.704/0.000

3 討論

血鏈球菌屬機會致病菌，其定植于口腔內(nèi)，是維持口腔內(nèi)生態(tài)平衡的主要的細菌之一〔2，3〕。血鏈球菌主要分為血鏈球菌與高氏鏈球菌，口腔鏈球菌與緩癥鏈球菌兩大類。目前無論在動物實驗中還是在臨床觀察中均已證實血鏈球菌可誘發(fā)血液中血小板的聚集〔4，5〕。老年患者由于其對疾病的抵抗力明顯降低，其感染鏈球菌的可能性更大，因此，及時監(jiān)測老年患者的血鏈球菌水平對改善老年患者的預后具有十分重要的意義。通過血液培養(yǎng)的方式來檢測血鏈球菌感染的檢出率并不高，所以本研究采取提取口腔唾液及牙齦菌斑部位的血鏈球菌的方式來分析血鏈球菌與不穩(wěn)定性心絞痛患者的相關(guān)性。

本研究提示老年患者不穩(wěn)定性心絞痛的發(fā)生與唾液及牙齦菌斑中的總菌數(shù)方面未見明顯相關(guān)性，但是與血鏈球菌和高氏鏈球菌存在顯著的相關(guān)性。其原因可能為在所見測的總菌數(shù)中包含了與不穩(wěn)定性心絞痛發(fā)生無關(guān)的緩癥鏈球菌和口腔鏈球菌的菌數(shù)，所以導致在總菌數(shù)方面為體現(xiàn)出明顯的相關(guān)性。由此可以看出，血鏈球菌影響著不穩(wěn)定性心絞痛的發(fā)生，而此種影響主要集中在血鏈球菌與高氏鏈球菌上。目前對于血鏈球菌對不穩(wěn)定性心絞痛的影響機制尚未完全明確，但是目前最主要的觀點為促血小板聚集學說及炎性介質(zhì)學說〔6〕。促血小板聚集學說認為，在血鏈球菌的表面存在血小板抗原，而體內(nèi)的腎上腺素等激素可促進血小板與血鏈球菌表面的抗原相結(jié)合，誘發(fā)血小板聚集的產(chǎn)生。而炎性介質(zhì)學說則認為，在血鏈球菌感染時，機體可釋放大量的炎性介質(zhì)，同時位于細菌細胞壁上的脂多糖，也隨細菌感染入血，兩者同時作用于血管內(nèi)皮，均促進血管平滑肌的增殖和脂肪的變性，同時還對機體的凝血功能及血小板的聚集起到一定的刺激作用。而血小板聚集及炎性介質(zhì)均為不穩(wěn)定性心絞痛患者的重要危險因素〔7，8〕，最終可導致血栓的形成而誘發(fā)不穩(wěn)定性心絞痛的產(chǎn)生。

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2 趙莉莉，朱建華，鄧淑莉，等.口腔感染與冠心病的相關(guān)性研究〔J〕.中華心血管雜志，2003;31(3):195-7.

3 鄧淑麗，陳 暉，張衛(wèi)東.口腔血鏈球菌和冠心病相關(guān)性探討〔J〕.中華口腔醫(yī)學雜志，2002;3(37):222-4.

4 陳 暉，趙孟輝，李菊花，等.血鏈球菌對兔血細胞血壓及心電圖的影響〔J〕.中華口腔醫(yī)學雜志，2001;36(5):354-6.

5 Haraszthy VI，Zambon JJ，Trevisan M，et al.Identification of periodontal pathogens in atheromatous plaques〔J〕.J Periodontol，2000;71(10):1554-60.

6 屠彥，陳 暉.口腔感染引發(fā)心血管疾病的機制〔J〕.國際口腔醫(yī)學雜志，2010;2(37):182-5.

7 齊 新，劉克強，王 敏，等.冠心病患者血小板聚集功能與炎癥因子關(guān)系的研究〔J〕.中國循環(huán)雜志，2009;3(24):178-81.

8 張嘉瑩，張菲斐，翟亞萍，等.不穩(wěn)定性心絞痛炎性細胞因子水平與冠狀動脈狹窄的對比分析〔J〕.中國循環(huán)雜志，2000;2(15):81-2.