姜學(xué)智,謝雯麗,王慧玲
(1.大連開(kāi)發(fā)區(qū)醫(yī)院 呼吸內(nèi)科,遼寧大連 116600;2.大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第二醫(yī)院 呼吸內(nèi)科,遼寧 大連 116027)
血清可溶性髓細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體-1對(duì)社區(qū)獲得性肺炎的診斷意義
姜學(xué)智1,謝雯麗2,王慧玲2
(1.大連開(kāi)發(fā)區(qū)醫(yī)院 呼吸內(nèi)科,遼寧大連 116600;2.大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第二醫(yī)院 呼吸內(nèi)科,遼寧 大連 116027)
目的 評(píng)價(jià)血清可溶性髓細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體-1(sTREM-1)對(duì)社區(qū)獲得性肺炎(CAP)的診斷意義。方法 選擇CAP患者60例為肺炎組,24例健康成人為對(duì)照組。根據(jù)美國(guó)感染病學(xué)會(huì)/美國(guó)胸科協(xié)會(huì)重癥CAP標(biāo)準(zhǔn)、CURB-65評(píng)分、PSI評(píng)分對(duì)病情嚴(yán)重程度評(píng)估。入院24 h內(nèi)抽取肘靜脈血,檢測(cè)血清sTREM-1、CRP、Fbg及D-二聚體含量。結(jié)果 肺炎組患者血清sTREM-1、CRP、Fbg及D-二聚體水平均高于對(duì)照組(P<0.05)。重度肺炎組血清sTREM-1水平為(120.21±39.24)ng/L,輕中度肺炎組血清sTREM -1水平為(54.48±9.87)ng/L。重度肺炎組血清Fbg、sTREM-1水平與輕中度肺炎組比較差異有顯著性意義(P<0.05),兩組血清CRP、D-二聚體水平比較差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。中高危肺炎組血清sTREM-1水平為(126.06±21.23)ng/L,低危肺炎組為(39.45±8.08)ng/L。中高危肺炎組血清Fbg、sTREM-1水平高于低危肺炎組,差異有顯著性意義(P<0.05),兩組血清CRP、D-二聚體水平比較差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。在重癥肺炎組血清sTREM-1水平為(122.34±24.14)ng/L,高于非重癥肺炎組(44.74±9.22)ng/L。重癥肺炎組血清Fbg、D-二聚體水平高于非重癥肺炎組(P<0.05),兩組血清CRP水平比較差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。應(yīng)用ROC曲線(xiàn)研究各生物指標(biāo)診斷價(jià)值,結(jié)果顯示sTREM-1的診斷效能最強(qiáng)(AUC為0.847),其次為CRP(AUC為0.753)、Fbg(AUC為0.675)及D-二聚體(AUC為0.668)。當(dāng)血清sTREM-1水平>15.79 ng/L時(shí),診斷肺炎的敏感度為63.30%,特異度為83.30%,準(zhǔn)確率為71.40%。結(jié)論 血清sTREM-1水平在CAP患者中明顯升高,對(duì)CAP的診斷提供重要參考,其水平高低能夠反映CAP的嚴(yán)重程度及預(yù)后情況。
可溶性髓細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體-1;社區(qū)獲得性肺炎;診斷;病情評(píng)估
肺炎是臨床常見(jiàn)疾病,其診斷多依據(jù)癥狀、體征及影像學(xué)表現(xiàn)。但是,肺間質(zhì)性疾病、肺水腫、肺栓塞及肺血管炎等一些非感染性疾病有時(shí)也可以出現(xiàn)發(fā)熱、血白細(xì)胞升高、胸部X線(xiàn)浸潤(rùn)影等類(lèi)似肺炎的臨床表現(xiàn)。而細(xì)菌感染是肺炎最為常見(jiàn)的原因,病原學(xué)檢查是確診的重要手段。因精確的病原學(xué)診斷十分困難,痰培養(yǎng)陽(yáng)性率很低、獲得結(jié)果時(shí)間較長(zhǎng),對(duì)診斷、早期指導(dǎo)臨床治療意義有限。近年來(lái)反應(yīng)炎癥的生物標(biāo)志物研究較多,為社區(qū)獲得性肺炎(CAP)的診斷提供了新的參考指標(biāo),但均有不足。可溶性髓細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體-1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1,sTREM -1)是一種新的炎性標(biāo)記物,在細(xì)菌感染病人的血清、肺泡灌洗液、腦脊液、胸腹水、羊水、關(guān)節(jié)腔滑液及尿液中均為高表達(dá)。本研究通過(guò)測(cè)定CAP患者血清sTREM -1、C 反應(yīng)蛋白(c-reactive protein,CRP)、纖維蛋白原(fibrinogen,F(xiàn)bg)、D-二聚體(D-Dimer,DD)水平,進(jìn)一步探討sTREM-1在CAP診斷中的意義。
肺炎組:選取大連開(kāi)發(fā)區(qū)醫(yī)院2011年4月—11月呼吸內(nèi)科普通病房及呼吸ICU住院患者60例,為經(jīng)抗菌藥物治療有效或病原學(xué)檢查結(jié)果陽(yáng)性患者。肺炎組:男40 例,女20 例,平均年齡(61.70 ±4.37)歲。對(duì)照組:健康成人24例。男10例,女14例,平均年齡(61.0±6.34)歲。納入本研究者均由本人或其家屬簽署知情同意書(shū)。兩組性別、年齡經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn),差異無(wú)顯著性意義,具有可比性。
肺炎組依據(jù)2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)CAP診治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。對(duì)照組為健康成人,既往無(wú)心肺疾病史,無(wú)吸煙史,近期無(wú)肺部感染史。
根據(jù)美國(guó)感染病學(xué)會(huì)(IDSA)/美國(guó)胸科協(xié)會(huì)(ATS)2007年頒布的成人CAP指南中的重癥CAP標(biāo)準(zhǔn)[2]將肺炎組分為非重癥肺炎組和重癥肺炎組。根據(jù)CURB-65評(píng)分將肺炎組分成輕中度肺炎組(0~2分)和重度肺炎組(≥3分)。根據(jù)PSI(Pneumonia severity index)評(píng)分將肺炎組分為5級(jí):分值0分為Ⅰ級(jí),<70分為Ⅱ級(jí),70~90分為Ⅲ級(jí),90~130分為Ⅳ級(jí),>130分為Ⅴ級(jí)。按Ⅰ~Ⅲ級(jí)、Ⅳ~Ⅴ級(jí)分別劃為低危肺炎組和中高危肺炎組。
肺炎組患者入院24 h內(nèi)、對(duì)照組健康人空腹采集肘靜脈血2 mL,室溫3 000 r/min離心20 min,取血清分裝入EP管,-70℃保存,成批檢測(cè)。采用ELISA法檢測(cè)血清sTREM-1濃度,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。應(yīng)用日立7600全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清CRP含量,STAGO全自動(dòng)凝血分析儀測(cè)定血清Fbg、DD 含量。
人sTREM-1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒(美國(guó)R&B公司提供,上海越研生物科技有限公司分裝)。Reader HT2 550酶標(biāo)儀(澳大利亞Anthos公司);日立7600全自動(dòng)生化儀(日本日立公司);STAGO全自動(dòng)凝血分析儀(法國(guó)STAGO公司)。
所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,計(jì)量資料滿(mǎn)足正態(tài)分布。兩組間比較采用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。變量之間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。以1-特異度為橫坐標(biāo),敏感度為縱坐標(biāo),做出受試者工作特征(ROC)曲線(xiàn),確定診斷閾值,計(jì)算單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)的敏感度和特異度。采用雙側(cè)檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)推斷,P<0.05判定為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
肺炎組 CRP、Fbg、DD、sTREM -1水平均高于對(duì)照組,差異有顯著性意義(P<0.05),見(jiàn)表1。
重度肺炎組血清Fbg、sTREM-1水平與輕中度肺炎組比較,差異有顯著性意義(P<0.05)。兩組血清CRP、DD水平比較,差異無(wú)顯著性意義(P>0.05),見(jiàn)表2。
中高危肺炎組血清Fbg、sTREM-1水平高于低危肺炎組,差異有顯著性意義(P<0.05)。兩組血清CRP、DD水平比較,差異無(wú)顯著性意義(P>0.05),見(jiàn)表3。
重癥肺炎組血清Fbg、DD、sTREM-1水平高于非重癥肺炎組,差異有顯著性意義(P<0.05)。兩組血清CRP水平比較,差異無(wú)顯著性意義(P>0.05),見(jiàn)表4。
肺炎組血清Fbg、sTREM-1水平與PSI評(píng)分、CURB-65評(píng)分均存在正相關(guān),差異有顯著性意義(P<0.05)。而 CRP、DD 水平與 PSI評(píng)分、CURB -65評(píng)分不相關(guān)(P >0.05),見(jiàn)表5。
表1 兩組血清生物標(biāo)記物水平比較Tab 1 The level of serum biological markers in two groups
表2 不同程度肺炎組血清生物標(biāo)志物水平比較Tab 2 The level of serum biological markers in different degree pneumonia groups
表3 不同危險(xiǎn)肺炎組血清生物標(biāo)志物水平比較Tab 3 The level of serum biological markers in different risk pneumonia groups
表4 非重癥與重癥肺炎組血清生物標(biāo)志物水平比較Tab 4 The level of serum biological markers in non-severe and severe pneumonia groups
表5 肺炎組生物標(biāo)志物水平與PSI、CURB-65評(píng)分相關(guān)性Tab 5 the correlation between the level of biological markers in pneumonia with PSI and CURB-65 (n=60)
應(yīng)用ROC曲線(xiàn)評(píng)估各生物標(biāo)志物的診斷能力,結(jié)果顯示血清sTREM-1曲線(xiàn)下面積(AUC)為0.847,CRP 為0.753,F(xiàn)bg 為0.675,DD 為0.668。
當(dāng)血清sTREM-1>15.79 ng/L時(shí),診斷 CAP的敏感度為63.3%,特異度為83.3%,準(zhǔn)確率為71.4%。以血清CRP>12.50 mg/L為臨界值,診斷CAP的敏感度為56.7%,特異度為67.3%,準(zhǔn)確率為 66.8%。
聯(lián)合檢測(cè)即sTREM-1+CRP、sTREM-1+Fbg及sTREM-1+CRP+Fbg的ROC曲線(xiàn)下面積分別為0.861、0.856、0.858,均高于 sTREM -1 的單獨(dú)檢測(cè)。見(jiàn)表6,圖1和圖2。
表6 血清sTREM-1、CRP及Fbg聯(lián)合診斷CAP比較Tab 6 The contrast among biological markers detection of combination in diagnosis of CAP
圖1 各生物標(biāo)志物ROC曲線(xiàn)Fig 1 The ROC curve of biological markers
圖2 各生物標(biāo)志物聯(lián)合ROC曲線(xiàn)Fig 2 The ROC curve of biological markers in combination
TREM-1是 Bouchon等[3]于2000年鑒定出的相對(duì)分子質(zhì)量為26 000的跨膜糖蛋白。在細(xì)菌感染后表達(dá)于中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞,其能夠激活放大細(xì)胞免疫反應(yīng),促進(jìn)炎性因子及趨化因子的分泌,在炎癥性疾病的進(jìn)展中扮演重要角色。TREM-1在細(xì)菌和真菌引起的感染性炎癥反應(yīng)中廣泛表達(dá)于皮膚、淋巴結(jié)以及肺組織,在非感染性炎癥或異物肉芽腫引起的肉芽腫感染中很少或不表達(dá)[4]。sTREM-1作為T(mén)REM-1的一種可溶性形式,研究發(fā)現(xiàn)其在細(xì)菌性腦膜炎[5]、慢性阻塞性肺疾病急性加重期[6]、消化性潰瘍(幽門(mén)螺桿菌陽(yáng)性)[7]、細(xì)菌性胸腔積液[8]、炎癥性腸?。?]等感染性疾病中均明顯升高。2004年,Gibot等[10]首次發(fā)表了sTREM-1在肺炎診斷中臨床意義的相關(guān)研究,結(jié)果顯示以BALF中sTREM-1水平≥5 pg/mL為標(biāo)準(zhǔn)診斷肺炎,其敏感度達(dá) 98%,特異度達(dá) 90%。Richeldi等[11]通過(guò)流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)檢測(cè)肺炎患者BALF中巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞TREM-1的表達(dá),發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞外細(xì)菌引起的感染中表達(dá)明顯升高,而在結(jié)核感染及非感染性間質(zhì)性肺炎中則低表達(dá)。因此,sTREM-1表現(xiàn)出了診斷CAP的良好應(yīng)用前景。
目前國(guó)內(nèi)外研究大多以呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎(ventilator associated pneumonia,VAP)患者 BALF 中的sTREM-1水平作為研究對(duì)象,以此界定肺炎的診斷閾值[10-12],而對(duì)于 CAP 患者及其血清中sTREM-1水平的研究較少。Ruiz-Gonzalez等[13]報(bào)道了以血清sTREM-1含量120 pg/mL為臨界值,預(yù)測(cè) CAP菌血癥的敏感度及特異度分別為92.3%和73.8%,優(yōu)于其他臨床指標(biāo)。
本研究以健康成人作為對(duì)照組,測(cè)定CAP患者血清sTREM-1的水平,結(jié)果顯示肺炎組患者血清sTREM-1水平顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05),說(shuō)明sTREM-1可以作為CAP診斷的參考指標(biāo)。
PSI評(píng)分與CURB-65評(píng)分是CAP病情嚴(yán)重程度評(píng)估的兩個(gè)普遍應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)。IDSA/ATS于2007年頒布的成人CAP指南中重癥CAP標(biāo)準(zhǔn)用于評(píng)估患者是否需要入住重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)。本研究以上述3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)CAP患者進(jìn)行分組,結(jié)果顯示PSI評(píng)分Ⅳ~Ⅴ級(jí)(中高危肺炎組)、CURB-65評(píng)分≥3分(重度肺炎組)、IDSA/ATS指南(重癥肺炎組)3組肺炎患者血清sTREM-1水平分別為(126.06±21.23)ng/L、(120.21 ± 39.24)ng/L 和(122.34 ±24.14)ng/L,均明顯升高,與相應(yīng)評(píng)分?jǐn)?shù)值呈正相關(guān),與低危組、輕中度組及非重癥組比較差異有顯著性意義(P <0.05),這與滿(mǎn)曉燕等[14]測(cè)定 42例感染性肺炎(27例重癥肺炎,15例非重癥肺炎)的血清sTREM-1水平結(jié)果一致,說(shuō)明血清sTREM-1水平能夠反映CAP的嚴(yán)重程度。PSI評(píng)分條目復(fù)雜,對(duì)于輕癥高齡患者存在高估值傾向,而對(duì)重癥年輕患者又存在低估值可能[15],臨床應(yīng)用受到一定限制。由于PSI評(píng)分更關(guān)注并發(fā)癥的發(fā)生,即評(píng)分越高,就有并發(fā)癥的存在。本研究PSI評(píng)分中高危肺炎組的血清sTREM-1水平明顯升高,由此可提示肺炎有并發(fā)癥存在的可能性。由于CURB-65評(píng)分操作簡(jiǎn)單,更關(guān)注CAP患者的病死率,如果能聯(lián)合檢測(cè)血清sTREM-1水平可以對(duì)CAP的嚴(yán)重程度及預(yù)后做出更為全面的評(píng)估,從而更好地指導(dǎo)CAP的分級(jí)治療。
臨床中能夠反映感染的生物標(biāo)志物有很多,如CRP、Fbg及DD等,但特異性均較差。本研究應(yīng)用ROC曲線(xiàn)顯示各生物標(biāo)志物的診斷效能,sTREM-1的曲線(xiàn)下面積為0.847,在4個(gè)標(biāo)志物中面積最大,說(shuō)明sTREM-1的診斷效能強(qiáng)于CRP、Fbg及DD。應(yīng)用ROC曲線(xiàn)進(jìn)一步確定診斷閾值,當(dāng)血清sTREM-1>15.79 ng/L時(shí),診斷CAP的敏感度為63.3%,特異度為 83.3%,準(zhǔn)確率為 71.4%。
應(yīng)用ROC曲線(xiàn)研究各個(gè)標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)定的診斷效能,結(jié)果顯示 sTREM -1+CRP、sTREM -1+Fbg及sTREM-1+CRP+Fbg的ROC曲線(xiàn)下面積均高于單獨(dú)檢測(cè)sTREM-1。聯(lián)合檢測(cè)sTREM-1及CRP診斷 CAP的特異度最高;聯(lián)合檢測(cè)sTREM-1及Fbg的敏感度及準(zhǔn)確率最高;聯(lián)合檢測(cè)sTREM-1、CRP及Fbg的特異度及準(zhǔn)確率均較高。
本研究顯示血清sTREM-1水平在CAP患者中明顯升高,血清sTREM-1升高水平與CAP的嚴(yán)重程度密切相關(guān),sTREM-1檢測(cè)水平可對(duì)CAP的診斷及病情嚴(yán)重程度提供重要參考。
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[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì).社區(qū)獲得性肺炎診斷和治療指南[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2006,29(10):651-655.
[2]Mandell LA,Wunderink RG,Anzueto A,et al.Infectious Diseases Society of America/American Thoracic Society consensus guidelines on the management of communityacquried pneumonia in adults[J].Clin Infect Dis,2007(44):S37-S39.
[3]Bouchon A,Dietrich J,Colonna A.Cutting edge:inflammatory responses can be triggered by TREM -1,a novel receptor expressed on neutrophils and monocytes[J].J Immunol,2000,164(10):4991 - 4995.
[4]Bouchon A,F(xiàn)acchetti F,Weigand MA,et al.TREM - 1 amplifies inflammation and is a crucial mediator of septic shock[J].Nature,2001,410:1103 -1107.
[5]Detennann RM,Weisfelt M,de Gans J,et al.Soluble triggering recepter expressed on myeloid cells l:a biomarker for bacterial meningitis[J].Intensive Care Med,2006,32(8):1243-1247.
[6]Radsak MP,Taube C,Haselmayer P,et al.Soluble triggering receptor expressed on myeloid cells 1 is released in patients with stable chronic obstructive pulmonary disease[J].Clin Dev Immunol,2007,52040:1 -7.
[7]Koussoulas V,Vassiliou S,Spyridaki E,et al.Evidence for the role of gastric mucosa at the secretion of soluble triggering receptor expressed on myeloid cells(strem-1)in peptic ulcer disease[J].World J Gastroenterol,2007,13(34):4610-4614.
[8]Huang LY,Shi HZ,Liang QL,et al.Expression of soluble triggering receptor expression on myeloid cells-1 in pleural effusion[J].Chin Med J,2008,121(17):1656 -1661.
[9]Park JJ,Cheon JH,Kim BY,et al.Correlation of serum -soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1 with clinical disease activity in inflammatory bowel disease[J].Dig Dis Sci,2009,54(7):1525 - 1531.
[10]Gibot S,Cravoisy A,Levy B,et al.Soluble triggering receptor expressed on myeloid cells and the diagnosis of pneumonia[J].New Engl J Med,2004,350(5):451 -458.
[11]Richeldi L,Mariani M,Losi M,et al.Triggering receptor expressed on myeloid cells:role in the diagnosis of lung infections[J].Eur Respir J,2004,24(2):247 -250.
[12]Gibot S,Cravoisy A,Levy B,et al.Soluble triggering receptor expressed on myeloid cells and the diagnosis of pneumonia[J].N Engl J Med,2004,350:451 -458.
[13]Ruiz-Gonzalez A,Esquerda A,F(xiàn)alguera M,et al.Triggering receptor(TREM-1)expressed on myeloid cells predicts bacteremia better than clinical variables in community acquired pneumonia[J].Respirology,2011,16:321 -325.
[14]滿(mǎn)曉燕,童朝暉,黃克武,等.可溶性髓細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體-1對(duì)肺炎診斷價(jià)值的初步評(píng)價(jià)[J].國(guó)際呼吸雜志,2009,29(24):1473 -1477.
[15]Mandell LA,Wunderink RG,Anzueto A,et al.Infectious Diseases Society of America/American Thoracic Society consensus guidelines on the management of communityacquired pneumonia in adults[J].Clin Infect Dis,2007(44):S37.
Meaning of soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1 in diagnosis of community acquired pneumonia
JIANG Xue-zhi1,XIE Wen-li2,WANG Hui-ling2
(1.Department of Respiratory,Dalian Development Area Hospital,Dalian116600,China;2.Department of Respiratory,the Second Affiliated Hospital of Dalian Medical University,Dalian116027,China)
[Abstract]ObjectiveTo investigate the meaning of soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1(sTREM -1)in the diagnosis of community acquired pneumonia(CAP).MethodsSerum sTREM-1,CRP,F(xiàn)bg,D-Dimer were determined in sixty patients with community acquired pneumonia and twenty-four healthy volunteers controls.CAP group patients were divided into non-severe pneumonia group(44 cases)and severe pneumonia group(16 cases)by IDSA/ATS severe CAP criteria,divided into mild& mid range pneumonia group(50 cases)and grossly pneumonia group(10 cases)by CURB-65 criteria,divided into low risk pneumonia group(42 cases)and high risk pneumonia group(18 cases)by PSI score.ResultsLevel of serum sTREM -1 was significant higher in pneumonia group than in the normal control group.Level of serum CRP,F(xiàn)bg,D -Dimer were higher in pneumonia group than in the normal control group,too.Level of serum sTREM -1 was higher in severe pneumonia group than in non-severe pneumonia group [(122.34±24.14)ng/L vs(44.74 ±9.22)ng/L,P <0.05].Level of serum sTREM -1 was higher in grossly pneumonia group than in mild &midrange pneumonia group [(120.21 ±39.24)ng/L vs(54.48 ±9.87)ng/L,P <0.05].Level of serum sTREM -1 was higher in high risk pneumonia group than in low risk pneumonia group [(126.06 ±21.23)ng/L vs(39.45 ±8.08)ng/L,P <0.05].For ROC curve in diagnosis of CAP,when the cut-off value of sTREM -1 was set at >15.79 ng/L,the sensitivity was 63.30%,specificity was 83.30%,accuracy was 71.40%.ConclusionSerum sTREM -1 level is higher in CAP.Detection of serum sTREM -1 is helpful in the diagnosis of CAP.Serum sTREM-1 level could help to evaluate the severity of infection.
[Key words]soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1;community acquired pneumonia;diagnosis;pathogenetic condition assessment
R563
A
1671-7295(2013)05-0442-05
姜學(xué)智,謝雯麗,王慧玲.血清可溶性髓細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體-1對(duì)社區(qū)獲得性肺炎的診斷意義[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013,35(5):442 -446.
10.11724/jdmu.2013.05.08
姜學(xué)智(1977-),男,遼寧大連人,主治醫(yī)師。E-mail:zysf2046@gmail.com
王慧玲,教授。E-mail:whl882728@163.com
2013-06-13;
2013-08-22)