楊林松，張燕寧，何偉志

（1.長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 湖北 荊州 434025；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100094）

家蠶（Bombyx mori L.）屬鱗翅目蠶蛾科，是起源于我國(guó)的一種泌絲昆蟲(chóng)。我國(guó)在五千多年前的新石器時(shí)代已開(kāi)始植桑養(yǎng)蠶[1]。目前養(yǎng)蠶，仍然是許多省份的特色農(nóng)業(yè)，是農(nóng)民經(jīng)濟(jì)收入的主要來(lái)源[2]，因此，養(yǎng)蠶在我國(guó)農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中占有重要地位。近年來(lái)，農(nóng)藥使用愈加頻繁廣泛，因農(nóng)藥污染給蠶業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)的災(zāi)難性事故頻頻發(fā)生[3]，給桑蠶養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此有許多學(xué)者針對(duì)農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性影響開(kāi)展研究，主要集中在農(nóng)藥殘留對(duì)家蠶生理變化的影響［4～8］。目前，我國(guó)及日本均要求農(nóng)藥申請(qǐng)登記注時(shí)需要提供其對(duì)家蠶的毒性試驗(yàn)資料，以此作為農(nóng)藥環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。開(kāi)展農(nóng)藥對(duì)家蠶的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估不僅為蠶桑養(yǎng)殖區(qū)合理使用農(nóng)藥提供科學(xué)依據(jù)，而且對(duì)保護(hù)桑蠶產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)性發(fā)展具有重要的意義。

論文采用葉片飼喂法測(cè)定了6種農(nóng)藥制劑對(duì)家蠶的急性毒性，旨在了解我國(guó)常用農(nóng)藥對(duì)家蠶的急性毒性情況，為農(nóng)藥環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和生產(chǎn)上科學(xué)合理用藥提供參考。

1.材料和方法

1.1 供試藥劑

試驗(yàn)所用藥劑均為中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所實(shí)驗(yàn)室保存樣品，且均在有效保質(zhì)期內(nèi)。40%丁草胺·五氟磺草胺懸乳劑、20%蟲(chóng)螨腈懸浮劑、50%氟環(huán)唑水分散粒劑、32%草銨膦·乙氧氟草醚可濕性粉劑、16000IU/mg蘇云金桿菌水分散粒劑、5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑。

1.2 供試蠶種

家蠶（Bombyx mori L.），從山東廣通蠶種集團(tuán)有限公司引種，品種為菁松×皓月，實(shí)驗(yàn)室孵化，以二齡起蠶為試驗(yàn)材料，孵化率在99%以上。蟻蠶飼養(yǎng)和試驗(yàn)溫度為23～27℃，相對(duì)濕度為70%～80%。

1.3 試驗(yàn)設(shè)備

燒杯、容量瓶、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、溫濕度表、亞都加濕器、移液槍等。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

準(zhǔn)確稱取或量取適量供試藥劑，用蒸餾水配制并稀釋藥液，在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，按等比關(guān)系設(shè)置6個(gè)系列濃度和1個(gè)空白對(duì)照，每處理設(shè)置3次重復(fù)。在培養(yǎng)皿內(nèi)飼養(yǎng)2齡起蠶，用不同濃度的藥液完全浸漬桑葉10秒鐘，晾干后分別置于培養(yǎng)皿內(nèi)，每培養(yǎng)皿接入20頭2齡蟻蠶。然后置于26±2℃，相對(duì)濕度75%～85%，要求空白對(duì)照死亡率不超過(guò)10%。

藥劑處理后24、48、72h、96h觀察并記錄家蠶中毒癥狀及死亡數(shù)。用DPS軟件計(jì)算供試樣品對(duì)家蠶96h的毒力回歸方程y=a+bx、至死中濃度（LC50）及95%置信限區(qū)間，并參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》的標(biāo)準(zhǔn)劃分各藥劑對(duì)家蠶的急性毒性等級(jí)。（見(jiàn)下表1）

2.結(jié)果與分析

在實(shí)驗(yàn)室條件下，根據(jù)農(nóng)藥毒性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)，5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑對(duì)家蠶急性半致死濃度LC50（96h）為2.56x10-3mg/L，對(duì)家蠶急性毒性等級(jí)為劇毒。16000IU/mg蘇云金桿菌水分散粒劑對(duì)家蠶急性半致死濃度LC50（96h）為2.03mg/L，對(duì)家蠶急性毒性等級(jí)為高毒。20%蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶急性半致死濃LC50（96h）為6.60mg/L，對(duì)家蠶急性毒性等級(jí)為高毒。32%草銨膦·乙氧氟草醚可濕性粉劑對(duì)家蠶急性半致死濃度LC50（96h）為277mg/L，對(duì)家蠶急性毒性等級(jí)為低毒。40%丁草胺·五氟磺草胺懸乳劑對(duì)家蠶急性半致死濃度LC50（96h）為1046mg/L，對(duì)家蠶急性毒性等級(jí)為低毒。50%氟環(huán)唑水分散粒劑對(duì)家蠶急性半致死濃度LC50（96h）為1297mg/L，對(duì)家蠶急性毒性等級(jí)為低毒。

表1 6種藥劑的劑量梯度（mg/L）

表2 6種藥劑96h對(duì)家蠶急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)表2可知，6種藥劑對(duì)家蠶96h毒力大小（LC50值）依次為5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑＞16000IU/mg蘇云金桿菌水分散粒劑＞20%蟲(chóng)螨腈懸浮劑＞32%草銨膦·乙氧氟草醚可濕性粉劑＞40%丁草胺·五氟磺草胺懸乳劑＞50%氟環(huán)唑水分散粒劑。

3.結(jié)論與討論

浸葉法是昆蟲(chóng)毒力測(cè)定中最常用的方法之一，在國(guó)內(nèi)外已普遍采用，它能反映農(nóng)藥對(duì)家蠶的胃毒、觸殺和熏蒸多種致毒效應(yīng)，接近于田間農(nóng)藥對(duì)家蠶的實(shí)際危害情況。近年來(lái)，由于農(nóng)藥的不合理施用，導(dǎo)致環(huán)境污染嚴(yán)重，本實(shí)驗(yàn)希望能為合理用藥提供依據(jù)。

農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性大小與家蠶品系、幼蟲(chóng)齡期及發(fā)育階段等因素有關(guān)［10］。2齡蠶對(duì)農(nóng)藥最敏感，齡期越大，敏感性越低，因此，評(píng)價(jià)農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性，選擇2齡幼蟲(chóng)作為試蟲(chóng)較為合理。另農(nóng)藥的評(píng)定時(shí)間有待評(píng)價(jià)24h和48h。

發(fā)達(dá)國(guó)家在農(nóng)藥環(huán)境毒性評(píng)價(jià)方面體制健全、管理嚴(yán)格，主要進(jìn)行對(duì)魚(yú)、鳥(niǎo)、蜜蜂、藻類(lèi)和蚯蚓的毒性評(píng)價(jià)，我國(guó)在制定關(guān)于這幾類(lèi)非靶標(biāo)生物的毒性評(píng)價(jià)準(zhǔn)則時(shí)都與國(guó)外況進(jìn)行了比較，并借鑒了其先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)［11］。50%氟環(huán)唑水分散粒劑等低毒農(nóng)藥，雖對(duì)家蠶的急性毒性較低，但有待研究其慢性毒性是否影響家蠶的吐絲和正常生長(zhǎng)。

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