胡軼虹 譚興文 張征驕 江新梅

雞甲胺磷中毒性遲發(fā)性神經(jīng)病電生理測定及藥物干預(yù)研究

胡軼虹 譚興文 張征驕 江新梅

目的 ①建立雞甲胺磷中毒遲發(fā)性神經(jīng)病模型。②通過周圍神經(jīng)電生理檢測確定周圍神經(jīng)損傷情況并評價三磷酸胞苷二鈉(CTP)對周圍神經(jīng)的保護作用。方法 萊亨母雞隨機分為2組，甲胺磷經(jīng)消化道染毒，從染毒后第2天開始A、B組分別每天給鹽水和CTP1周，染毒后1、2、3、4、8周取雞坐骨神經(jīng)進行電生理檢測。結(jié)果 甲胺磷致遲發(fā)性神經(jīng)病早期以軸索損害為主，繼之出現(xiàn)脫髓鞘改變，但各組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 ①利用甲胺磷染毒萊亨雞可成功構(gòu)建遲發(fā)性神經(jīng)病模型。②電生理檢測陽性率高，且早于臨床體征的出現(xiàn)，是診斷遲發(fā)性神經(jīng)病的客觀指標(biāo)之一。③本病有自愈傾向，遠期預(yù)后較好。

甲胺磷；遲發(fā)性神經(jīng)病；三磷酸胞苷二鈉；周圍神經(jīng)電生理

近年來，隨著有機磷農(nóng)藥中毒搶救成功率的提高，遲發(fā)性神經(jīng)病的發(fā)病率也呈上升趨勢，發(fā)生率5%左右[1]，因此對其發(fā)病進行正確的評估及積極地預(yù)防治療是我們的重要任務(wù)。本實驗應(yīng)用甲胺磷染毒leghorn雞，并在患雞出現(xiàn)肌無力等臨床表現(xiàn)前進行神經(jīng)電生理檢測，評估CTP對OPIDN(遲發(fā)性神經(jīng)病)的預(yù)防及保護作用。

1 資料與方法

1.1 構(gòu)建動物模型及實驗分組 選取營養(yǎng)狀態(tài)良好的萊亨母雞(購自長春市生物制品所免疫室)50只，雞齡8～14個月，體質(zhì)量2 kg左右，單只飼養(yǎng)，用植物油溶解甲胺磷(購自湖北沙隆達股份有限公司)，濃度為5 mg/ml，雞斷食24 h后，依照2 ml/kg灌入甲胺磷，分別于染毒前20 min、染毒后3、6、10 h肌肉注射阿托品(購自河北省鄭州獸藥廠)保持度過急性期。A組為鹽水組，染毒后連續(xù)一周肌注生理鹽水(1 ml/kg)。B組為CTP(購自北京三九萬東藥業(yè)有限責(zé)任公司)組(濃度3 mg/ml)，染毒后連續(xù)一周肌注1 ml/kg。

1.2 標(biāo)本的留取及電生理檢測 染毒后1、2、3、4、8周隨機留取標(biāo)本。雞固定在特制木板上，室溫25℃，腹腔注射水合氯醛麻醉，下肢去皮，從髂關(guān)節(jié)至膝關(guān)節(jié)，沿坐骨神經(jīng)走行剝離肌肉，游離坐骨神經(jīng)，取坐骨神經(jīng)長約3 cm浸于臺式液中，除去周圍脂肪組織，其后應(yīng)用生物信號記錄儀(澳大利亞艾德公司生產(chǎn)，吉林大學(xué)生理實驗室提供)行電生理檢查。潛伏期為刺激偽跡前沿到動作電位起始處時間間隔；波幅為上相波頂點與下相波的最低點之間的距離；運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度為兩記錄電極間距離除以兩動作電位潛伏期差。

2 結(jié)果

2.1 臨床表現(xiàn) 甲胺磷染毒后5～10 min，雞出現(xiàn)萎靡、流涎、瞳孔縮小、喜臥的臨床表現(xiàn)，在第2～6天陸續(xù)出現(xiàn)死亡，共死亡6只，兩組間比較無差異，實驗組平均死亡率為12%。經(jīng)過1周后，雞開始出現(xiàn)全身無力，喜臥，后出現(xiàn)行走不穩(wěn)，重者出現(xiàn)站立困難，沒有完全癱瘓者，至第4周肌力幾乎恢復(fù)正常，兩組總體發(fā)病率(15.9%)，組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

2.2 波幅檢測結(jié)果 第1周，波幅呈明顯降低，其后2，3周波幅逐漸恢復(fù)，至第4周波幅已近恢復(fù)正常。兩實驗組比較差異無顯著性。詳見表1。

2.3 運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度檢測結(jié)果 第2周開始出現(xiàn)運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，第3、4周持續(xù)出現(xiàn)運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，至第8周運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度已基本恢復(fù)正常。各個實驗組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。詳見表2。

表1 各實驗組波幅變化

注：組內(nèi)比較1、2、3與4、8周間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)

表2 各實驗組運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度變化

注：組內(nèi)比較1、8周與2、3、4周間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)

3 討論

甲胺磷是一種高毒、低殘留、廣譜應(yīng)用的有機磷殺蟲劑[2]。消化道，呼吸道和皮膚接觸均可導(dǎo)致急性中毒，但消化道途徑中毒后，發(fā)生遲發(fā)性神經(jīng)病的可能性最大。不同種屬的動物對有機磷的敏感性也不盡相同，人和雞相對敏感。[3]。我們應(yīng)用甲胺磷染毒萊亨母雞，發(fā)現(xiàn)在染毒后1～2周先后出現(xiàn)了波幅及運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度改變(陽性率90%)，2周出現(xiàn)不同程度的肌無力表現(xiàn)(總發(fā)病率15.9%)，成功的構(gòu)建了遲發(fā)性神經(jīng)病的動物模型。

本研究發(fā)現(xiàn)染毒后1周出現(xiàn)波幅明顯降低，說明早期神經(jīng)損傷表現(xiàn)為軸索變性，2周開始出現(xiàn)運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，提示出現(xiàn)脫髓鞘改變，這與神經(jīng)病理檢查結(jié)果相吻合。同時發(fā)現(xiàn)波幅降低(染毒后1周)明顯早于肌無力(染毒后2周)的出現(xiàn)，電生理檢查的陽性率(90%)也明顯高于臨床表現(xiàn)的陽性率(15.9%)，而肌無力癥狀的恢復(fù)(4周)明顯早于波幅及神經(jīng)傳導(dǎo)速度的恢復(fù)(8周)。因此，我們認為有機磷農(nóng)藥中毒的患者，即使成功渡過急性期，仍需定期隨訪，及時發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性周圍神經(jīng)損害。神經(jīng)電生理檢查不但能夠發(fā)現(xiàn)早期周圍神經(jīng)損害，對神經(jīng)修復(fù)的預(yù)后判定也是一重要指標(biāo)。

目前有機磷中毒性遲發(fā)性神經(jīng)病尚無特異的治療方法。虞炳慶等應(yīng)用激素治療25例OPIDN患者，發(fā)現(xiàn)其能顯著提高遲發(fā)性神經(jīng)病1年內(nèi)痊愈顯效率[4]，但有4例出現(xiàn)柯興氏征，因此開發(fā)和應(yīng)用新藥取替它是我們緊迫的任務(wù)。CTP為核苷酸類藥物，在機體內(nèi)參與磷脂類及核酸的合成和代謝。具有營養(yǎng)神經(jīng)，提高神經(jīng)細胞抗損傷能力，增強神經(jīng)細胞活性，促進神經(jīng)突起生長的作用。王敏等[5]對22例有機磷中毒后遲發(fā)性神經(jīng)病患者進行為期10～14 d的CTP治療，發(fā)現(xiàn)總有效率達77%。本實驗中應(yīng)用CTP進行早期干預(yù)治療，但各時間點電生理檢測組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明該藥并不能阻止遲發(fā)性神經(jīng)病的發(fā)生，至第8周，電生理檢測結(jié)果已近恢復(fù)正常，提示本病有自愈傾向。為了在OPIDN治療上有所突破，還應(yīng)進行發(fā)病機制方面的相關(guān)研究。

[1] 王漢斌，阮金秀.急性有機磷農(nóng)藥中毒致臟器損害與并發(fā)癥的防治.中華急診醫(yī)學(xué)雜志，2001，10：285-287.

[2] 范永仙, 陳小龍, 姜曉平,等.甲胺磷農(nóng)藥的生物降解研究進展. 微生物學(xué)雜志，2002，22: 45-47.

[3] 郭斌，郭麗華，郭洪志，等.有機磷中毒引起的遲發(fā)性神經(jīng)病的臨床與電生理研究.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，1997，14：186-187.

[4] 虞炳慶，劉保群，芮曉東，等.糖皮質(zhì)激素治療有機磷農(nóng)藥中毒后遲發(fā)神經(jīng)病的療效觀察.臨床神經(jīng)病學(xué)雜志，1995，11：46-47.

[5] 王敏，李華，王桂華，等.三磷酸胞苷二鈉在有機磷中毒后遲發(fā)性神經(jīng)病中的應(yīng)用.中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2007,1:19-20.

130021吉林省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(胡軼虹 譚興文 張征驕);吉林大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(江新梅)

江新梅