孫庶麗 劉勤曉 李杰

對(duì)酶免四項(xiàng)弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者的追蹤檢測(cè)

孫庶麗 劉勤曉 李杰

目的 對(duì)酶免四項(xiàng)弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者進(jìn)行追蹤檢測(cè), 了解其假陽(yáng)性比率, 為弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者的屏蔽及日后歸隊(duì)提供參考資料。方法 對(duì)100例弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者在6個(gè)月以后進(jìn)行追蹤檢測(cè), 標(biāo)本均按原檢測(cè)不合格項(xiàng)目分類, 用檢驗(yàn)科目前正在使用的初、復(fù)檢試劑進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 57%的獻(xiàn)血者仍呈反應(yīng)性, 而43%的獻(xiàn)血者呈現(xiàn)無(wú)反應(yīng)性, 且所檢測(cè)標(biāo)本的S/CO值均處于0.7~2之間, 均屬弱反應(yīng)性。結(jié)論 弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者中存在很大程度的假陽(yáng)性, 全部對(duì)其進(jìn)行屏蔽, 必然造成大量血液的浪費(fèi)和愛(ài)心獻(xiàn)血者的流失, 期待相關(guān)部門(mén)對(duì)獻(xiàn)血者的屏蔽范圍及歸隊(duì)管理出臺(tái)明確的要求, 尤其是對(duì)弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者是否需要屏蔽及假陽(yáng)性獻(xiàn)血者的日后歸隊(duì)管理制定統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。

弱反應(yīng)性；追蹤檢測(cè)；屏蔽；歸隊(duì)

弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者指經(jīng)再檢后仍處于單試劑反應(yīng)性/灰區(qū)或雙試劑灰區(qū)的獻(xiàn)血者。處于血液安全性的考慮, 所獻(xiàn)血液報(bào)廢, 獻(xiàn)血者屏蔽。通過(guò)對(duì)2006~2008年威海市中心血站檢測(cè)為弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者在6個(gè)月以后進(jìn)行追蹤檢測(cè)分析, 為弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者的屏蔽及日后歸隊(duì)提供參考資料。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2006年1月1日~2008年12月31日100例檢測(cè)結(jié)果為弱反應(yīng)性的獻(xiàn)血者。

1.2 試劑與設(shè)備 HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP試劑均為中國(guó)藥品生物制品檢定所批批檢檢定合格的國(guó)產(chǎn)試劑,且均處于效期內(nèi)；RSP-150加樣系統(tǒng)(瑞士)；FAME24/20后處理(瑞士)。

1.3 方法 對(duì)100例弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者在6個(gè)月以后進(jìn)行追蹤檢測(cè), 標(biāo)本均按原檢測(cè)不合格項(xiàng)目分類, 用檢驗(yàn)科目前正在使用的初、復(fù)檢試劑進(jìn)行檢測(cè)。雙試劑反應(yīng)性/灰區(qū)為反應(yīng)性, 雙試劑無(wú)反應(yīng)性為無(wú)反應(yīng)性, 單試劑反應(yīng)性/灰區(qū)進(jìn)行雙孔復(fù)試, 仍為反應(yīng)性/灰區(qū)按反應(yīng)性計(jì)。

2 結(jié)果

表1 酶免四項(xiàng)弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者追蹤檢測(cè)結(jié)果［n(%)］

3 討論

酶免檢測(cè)因其敏感度高, 操作簡(jiǎn)單、易于自動(dòng)化, 成本低等特點(diǎn)被普遍用于獻(xiàn)血者篩選, 但在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn), 其檢測(cè)結(jié)果易受獻(xiàn)血者體內(nèi)因素、標(biāo)本質(zhì)量、試劑、設(shè)備、操作人員等因素的影響致使結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性［1］。本文的研究證實(shí)了這一點(diǎn), 通過(guò)對(duì)弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者在6個(gè)月后的追蹤檢測(cè)發(fā)現(xiàn)僅有57%仍呈反應(yīng)性, 且所檢測(cè)標(biāo)本的S/CO值均處于0.7~2之間, 均屬弱反應(yīng)性, 而43%的獻(xiàn)血者呈現(xiàn)無(wú)反應(yīng)性。說(shuō)明原弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者中存在很大程度的假陽(yáng)性, 全部對(duì)其進(jìn)行屏蔽, 必然造成大量血液的浪費(fèi)和愛(ài)心獻(xiàn)血者的流失。

追蹤檢測(cè)不合格比例由高到低依次是抗-TP＞抗-HCV> HBsAg>抗-HIV, 符合低現(xiàn)患率人群中的假反應(yīng)性率較高現(xiàn)患率人群高的特點(diǎn)［3］。

自2012年7月本站開(kāi)展核酸檢測(cè)以來(lái), 檢驗(yàn)科將同期所有HBsAg、抗-HCV、抗-HIV初/復(fù)檢結(jié)果為弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者標(biāo)本401例全部納入核酸檢測(cè), 包括HBsAg 122例,抗-HCV 205例, 抗-HIV 74例, 其核酸檢測(cè)結(jié)果均為陰性,并將此74例抗-HIV弱反應(yīng)性標(biāo)本送疾控中心確認(rèn), 結(jié)果均為陰性。由此證實(shí)401例弱反應(yīng)性標(biāo)本中不存在真正的陽(yáng)性標(biāo)本。迄今為止本站檢出并經(jīng)確認(rèn)的核酸陽(yáng)性標(biāo)本8例均來(lái)自酶免雙試劑無(wú)反應(yīng)性標(biāo)本, 酶免弱反應(yīng)性標(biāo)本中未出現(xiàn)一例核酸陽(yáng)性。

2013年下半年, 本站采用梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)對(duì)抗-TP弱反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行確認(rèn), 迄今為止共確認(rèn)標(biāo)本27例, 結(jié)果均為陰性。

我國(guó)法規(guī)要求血液檢測(cè)使用兩個(gè)不同廠家的試劑進(jìn)行,只要一種試劑出現(xiàn)反應(yīng)性, 血液均要報(bào)廢, 目的是兩種試劑互補(bǔ), 避免真陽(yáng)性標(biāo)本的漏檢。但從檢測(cè)數(shù)據(jù)看, 采用2次檢測(cè)并未增加真陽(yáng)性標(biāo)本的檢出能力, 而是增加了假陽(yáng)性率,造成大量的血液報(bào)廢和愛(ài)心獻(xiàn)血者的流失。尤其近幾年, 酶免試劑廠家為避免漏檢, 一味提高試劑的靈敏度, 忽視了試劑的特異性, 再加上檢測(cè)人員為避免弱反應(yīng)性標(biāo)本的漏檢,人為加大灰區(qū)范圍, 將灰區(qū)標(biāo)本按反應(yīng)性計(jì), 導(dǎo)致相當(dāng)比例合格獻(xiàn)血者被淘汰。實(shí)際通過(guò)本站的檢測(cè)數(shù)據(jù)看, 灰區(qū)標(biāo)本中未出現(xiàn)一例確認(rèn)陽(yáng)性標(biāo)本。

綜合分析, 產(chǎn)生假陽(yáng)性的原因包括以下幾方面：①政策原因：我國(guó)血液篩查未做確認(rèn)試驗(yàn)。②試劑原因：靈敏度高的試劑特異性較低, 不同廠家的試劑包被的抗原或抗體組合不完全相同, 或同一廠家的試劑靈敏度和特異性存在批間差異［2］。③獻(xiàn)血者原因：獻(xiàn)血者體內(nèi)存在某種干擾物質(zhì)。④檢測(cè)原因：加樣器、洗板機(jī)、酶標(biāo)儀等設(shè)備故障、人為操作失誤等。⑤心理因素：決策者對(duì)漏檢的恐懼和擔(dān)憂。

以上種種原因?qū)е? 在處理獻(xiàn)血者結(jié)果時(shí), 為避免陽(yáng)性標(biāo)本的漏檢, 人們寧可錯(cuò)殺一千也不放過(guò)一個(gè)。

當(dāng)前, 臨床供血壓力日益加大, 如何在確保血液安全的前提下, 更好地保留愛(ài)心獻(xiàn)血者越發(fā)重要。采取適當(dāng)方法降低酶免檢測(cè)假陽(yáng)性率, 減少假陽(yáng)性所致的獻(xiàn)血者淘汰成為挽留獻(xiàn)血者的重要措施。

通過(guò)本次研究, 作者認(rèn)為對(duì)酶免四項(xiàng)初次檢測(cè)為弱反應(yīng)性的獻(xiàn)血者不應(yīng)全部進(jìn)行屏蔽, 應(yīng)該在半年后進(jìn)行該項(xiàng)目的EILSA雙試劑追蹤檢測(cè), 檢測(cè)結(jié)果仍為有反應(yīng)性則進(jìn)行永久屏蔽, 檢測(cè)結(jié)果為無(wú)反應(yīng)性再進(jìn)行相關(guān)確認(rèn)試驗(yàn), 確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性進(jìn)行永久屏蔽, 確認(rèn)結(jié)果陰性則該獻(xiàn)血者可繼續(xù)獻(xiàn)血,捐獻(xiàn)的血液仍需經(jīng)常規(guī)2次酶免篩查和血型檢測(cè), 結(jié)果全部合格后, 血液才可應(yīng)用于臨床。

首先血站應(yīng)做好以下幾方面的工作：①選擇合理的檢測(cè)模式, 真正起到方法上互補(bǔ), 避免陽(yáng)性漏檢；②對(duì)酶免試劑質(zhì)量嚴(yán)格把關(guān), 在強(qiáng)調(diào)靈敏度的同時(shí)加強(qiáng)特異性的控制；③灰區(qū)范圍設(shè)置要合理, 不要盲目擴(kuò)大灰區(qū)范圍；④酶免檢測(cè)弱反應(yīng)性標(biāo)本, 要進(jìn)行雙孔復(fù)查, 排除人為因素及設(shè)備問(wèn)題所致的假陽(yáng)性。其次建議采供血系統(tǒng)成立酶免四項(xiàng)確認(rèn)機(jī)構(gòu), 對(duì)血站重復(fù)檢測(cè)為弱反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行確認(rèn), 確認(rèn)結(jié)果作為血液去向和獻(xiàn)血者是否屏蔽的依據(jù)。若確認(rèn)結(jié)果為陽(yáng)性則獻(xiàn)血者永久屏蔽, 血液報(bào)廢；若確認(rèn)結(jié)果為陰性則獻(xiàn)血者暫時(shí)屏蔽, 本次所獻(xiàn)血液報(bào)廢, 6個(gè)月后再進(jìn)行一次酶免復(fù)查, 復(fù)查結(jié)果為無(wú)反應(yīng)性解除屏蔽, 復(fù)查結(jié)果仍為有反應(yīng)性則永久屏蔽。

期待相關(guān)部門(mén)對(duì)獻(xiàn)血者的屏蔽范圍及歸隊(duì)管理出臺(tái)明確的要求, 尤其是對(duì)弱反應(yīng)性獻(xiàn)血者是否需要屏蔽及假陽(yáng)性獻(xiàn)血者的日后歸隊(duì)管理制定統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn), 各血站統(tǒng)一遵照?qǐng)?zhí)行,既可挽留更多的愛(ài)心獻(xiàn)血者, 緩解臨床供血壓力, 又體現(xiàn)了對(duì)獻(xiàn)血者的愛(ài)心呵護(hù), 不至對(duì)獻(xiàn)血者的身心造成不良影響。

［1］ 王鳳玲,馮秀河,華麗鳳,等.酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)梅毒抗體假陽(yáng)性產(chǎn)生的原因探討.實(shí)用醫(yī)技雜志, 2007,14(11):1417-1418.

［2］ 符慧杰,徐克前,侯玨,等.梅毒抗體篩查可疑感染獻(xiàn)血者回訪結(jié)果分析.中國(guó)輸血雜志, 2010,23(9):724-725.

［3］ 劉宇寧,蔡菊英,劉曉音.血液篩查HBsAg、抗-HCV假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)的調(diào)查分析.中國(guó)輸血雜志, 2012,25(3):261.

Enzyme detection of four tracks for the weak reaction of blood donor

SON Shu-li, LIU Qin-xiao, LI Jie.Central Blood Bank of Weihai City Weihai 264200, China

Objective Purpose for enzymes from four track weak reaction of blood donor testing and know its false positive rate, for the weak reaction of blood donor screening and subsequent back reference.Methods 100 patients with weak reactivity track testing blood donors after 6 months, the specimens are classified by original detected faulty items, is now beginning, review of clinical laboratory reagents for detection.Results 57% blood donors was still reactivity, 43% blood donor unresponsiveness, and lies between the 0.7-2 S/CO values of the test specimen are weakly reactive.Conclusion Weak reaction sexual blood who in the exists is large degree of fake positive, all on its for shield, necessarily caused large blood of waste and love blood who of loss, looks forward to related sector on blood who of shield range and the back Management introduced clear of requirements, especially on weak reaction sexual blood who is needs shield and the fake positive blood who of future back management developed unified of standard.

Weakly reactive; Trace detection; Screening; Return

264200 威海市中心血站(孫庶麗)；威海市口腔醫(yī)院(劉勤曉)；威海市婦女兒童醫(yī)院(李杰)