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        保元清血顆粒中不同含量桂皮醛治療老年冠心病的療效

        2013-09-13 01:49:30韓業(yè)超長春中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室吉林長春307
        中國老年學(xué)雜志 2013年19期
        關(guān)鍵詞:桂皮色譜法乙腈

        孫 聰 韓業(yè)超 吳 強 (長春中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,吉林 長春 307)

        冠心病是老年人群常見的慢性疾病,中醫(yī)藥治療有著悠久歷史。保元清血顆粒是由多味中藥經(jīng)提取后制成的顆粒制劑,其中肉桂是方中的主藥,含有的桂皮醛等成分具有補火助陽、引火歸元、溫經(jīng)通絡(luò)的作用〔1〕。臨床上檢測桂皮醛作為藥品療效的質(zhì)量控制,但既往的方法缺乏穩(wěn)定性能〔2〕。本文采用高效液相色譜法檢測保元清血顆粒中不同含量桂皮醛在老年冠心病治療中的療效。

        1 資料與方法

        1.1 對象 選擇吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院中醫(yī)科住院患者90例,其中男54例,女36例;年齡60~82〔平均(68.5±6.7)〕歲。入選患者均符合冠心病臨床診斷標(biāo)準(zhǔn),心功能1~2級。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)心衰2度以上;(2)合并其他類型心臟病;(3)合并糖尿病及腦血管病;(4)不予合作者。

        1.2 儀器 Agilent1100高效液相色譜儀;DAD檢測器;Agilent化學(xué)工作站;KQ-600DV型數(shù)控超聲波清洗儀;BP211D型電子分析天平;AS200-S電子分析天平;ED2N型超純水器。

        1.3 試劑 桂皮醛對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號110710-200714,供含量測定用);保元清血顆粒由長春中醫(yī)藥大學(xué)科研中心提供試產(chǎn)品(規(guī)格50 g/袋;批號為100802、100803、100804);甲醇、乙腈為色譜純;水為高純水。

        1.4 方法

        1.4.1 對照品溶液的制備 精密稱取桂皮醛對照品50 mg,置50 ml量瓶中,加適量甲醇溶液并稀釋至刻度、搖勻;用0.45 μm微孔濾膜濾過,即得10.07 μg/ml的對照品溶液。

        1.4.2 供試品溶液的制備 取保元清血顆粒5 g,以對照品制備方法精密稱定后置具塞錐形瓶中,精密加入50 ml甲醇,稱定重量,超聲提取30 min,再稱定重量,用甲醇補足減損的重量,搖勻、濾過,精密量取續(xù)濾液1 ml,置20 ml量瓶中,加甲醇至刻度;搖勻,0.45 μm微孔濾膜過濾,即得供試品溶液。采用對照品進行含量校正,按處方配比制成桂皮醛含量12.5、25.5、55.5 μg/ml的三種溶液試劑。

        1.4.3 臨床分組及治療方法 將入選患者以隨機分組法均分為三組,每組30例,分別對應(yīng)給予不同濃度的供品溶液,即低劑量、中劑量和高劑量組;給藥方法為單劑量,3次/d,3 w為1個療程,兩個療程后檢測臨床指標(biāo)。

        1.4.4 臨床指標(biāo)檢測 選用色譜條件:色譜柱為SB-C柱;流動相為乙腈-水;流速為1.00 ml/min;柱溫為30℃;進樣量為20 μl;DAD檢測器檢測波長為290 nm。入選患者分別于入組前后進行心電圖、心臟彩超及臨床自主癥狀評測。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng) 用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行分析,數(shù)據(jù)資料以±s表示,采用t檢驗和χ2檢驗。

        2 結(jié)果

        2.1 色譜條件適應(yīng)性結(jié)果 在本實驗選定的色譜條件下,得到桂皮醛對照品及三組保元清血顆粒供試品色譜圖均無色譜峰出現(xiàn),表明各組分不干擾桂皮醛的測定。

        2.2 三組患者臨床資料對比 三組治療后均較治療前臨床資料明顯好轉(zhuǎn),有顯著性差異(P<0.05),以高劑量組臨床癥狀緩解明顯;但治療后心電圖、左室舒張功能及左室射血分?jǐn)?shù)的改善三組無顯著性差異(P>0.05)。見表1。

        表1 三組患者治療前后一般臨床資料對比(n)

        2.3 色譜線性關(guān)系觀察 在本實驗色譜條件下,桂皮醛在0.5~50 μg/ml具有良好的線性關(guān)系,線性方程為 Y=3.551 606 3X-2.603 881 3,相關(guān)系數(shù)r為0.999 76。

        2.4 穩(wěn)定性試驗 取三組各兩份樣品,共6份單劑量,分別于0、2、4、8、16、24 h 精密取樣 20 μl進行色譜檢測,桂皮醛波峰面積為13%,表明本供試品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

        3 討論

        《中華人民共和國藥典》(2010年一部)規(guī)定中藥提取物桂皮醛采用兩次甲醇超聲處理且放置過夜,該法提取率雖高但耗時過長。本實驗發(fā)現(xiàn)用甲醇超聲處理0.5 h即可達(dá)到較好的提取效果,可節(jié)省大量時間,提高檢測效率。桂皮醛的含量測定有薄層掃描法、微波提取過氧化氫氧化法、氣相色譜法、液相色譜法等。但薄層掃描法重復(fù)性相對較差,微波提取過氧化氫氧化法受干擾因素較多,氣相色譜法涉及內(nèi)標(biāo)物,分離難度很大,所以均未采用。相比之下液相色譜法操作簡單、穩(wěn)定性好,是理想的測定方法。

        有研究者采用乙腈-0.1%磷酸(35∶65)做流動相〔2〕,經(jīng)過實驗和乙腈-水做流動相比較,差別不明顯。在本文中采用液相色譜法,用甲醇-水作為流動相〔3,4〕,發(fā)現(xiàn)乙腈-水比甲醇-水做流動相分離度高、峰形好。本實驗結(jié)果說明該方法線性關(guān)系好、操作簡便、結(jié)果準(zhǔn)確,重復(fù)性好,適用于保元清血顆粒中桂皮醛含量的測定。

        有殺菌、消毒、防腐、抗?jié)兗訌娢?、腸道運動、抗病毒、抗癌、擴張血管及降壓、壯陽等多種功效〔5~9〕。冠心病臨床上常給予中藥制劑,而其療效通常缺乏穩(wěn)定的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)方法。本實驗結(jié)果表明,同種中藥制劑采用高效液相色譜法檢測有著良好的線性關(guān)系,穩(wěn)定性能好,無劑量組分干擾現(xiàn)象。因此,該方法可以用于臨床中藥制劑療效的質(zhì)量控制。

        1 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部〔M〕.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:128.

        2 王偉影,范 蕾,劉 斌,等.HPLC法測定附桂骨痛顆粒中桂皮醛含量〔J〕.中國藥師,2011;14(4):575-6.

        3 林德輝,林綠萍,程 怡,等.戒癮解毒膠囊的薄層鑒別與桂皮醛的含量測定〔J〕.北方藥學(xué),2012;9(3):3-4.

        4 王 宏.HPLC法芪風(fēng)顆粒中桂皮醛的含量〔J〕.北方藥學(xué),2011;8(1):17-8.

        5 Klan A,Nawaz K,Safdar M,et al.Cinnamon improves glucose and lipids of People with type2 diabetes〔J〕.Diabetes Care,2003(12);26:3215-8.

        6 Subash-Babu P,Prabuseenivasan S,Ignacimuthu S.Cinna maldbehyde-A potential antidiabetic agent〔J〕.Int J Phyloth Phytopharmacol,2007;14(1):15-22.

        7 安福利,張 仲,相聰坤,等.肉桂揮發(fā)油成分分析及其血小板聚集抑制作用研究〔J〕.藥物分析,2009;18(22):25.

        8 丁媛媛,趙鋼濤,楊 凡,等.肉桂油對病毒性心肌炎小鼠心肌中TLR4-NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響〔J〕.中國藥學(xué)雜志,2010;45(5):349-52.

        9 易 醒,李 莉,肖小年.肉桂油微乳中桂皮醛含量的高效液相色譜法測定〔J〕.時針國醫(yī)國藥,2011;22(6):1325-6.

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