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        華氏巨球蛋白血癥實(shí)驗(yàn)室診斷與鑒別分析

        2013-09-12 03:16:08王中全宋改芳胡溢博河南省直第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科河南鄭州450006
        中國(guó)老年學(xué)雜志 2013年16期
        關(guān)鍵詞:輕鏈漿細(xì)胞單克隆

        王中全 宋改芳 胡溢博 (河南省直第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南 鄭州 450006)

        華氏巨球蛋白血癥(WM)患者少見,病因未明,是一種慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病,屬于B細(xì)胞淋巴瘤范疇,特點(diǎn)為骨髓中漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)并伴有外周血單克隆性IgM異常增高〔1〕。本病好發(fā)于老年人,以60歲以上男性患者居多。病程進(jìn)展緩慢,可多年無(wú)癥狀,早期易誤診。WM患者大量的高分子巨球蛋白IgM導(dǎo)致血漿黏滯度增高,主要表現(xiàn)為乏力、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、視力降低、易感染、雷諾現(xiàn)象等。主要體征有面色蒼白、肝脾腫大、淋巴結(jié)腫大、紫癜和神經(jīng)系統(tǒng)異常等。多發(fā)性骨髓瘤(MM)是骨髓內(nèi)單一漿細(xì)胞株異常增生的一種惡性腫瘤,骨髓內(nèi)異常的骨髓瘤細(xì)胞增生浸潤(rùn)骨骼或軟組織,同時(shí)分泌“M蛋白”,常引起病理性骨折、穿鑿樣溶骨病變、腎功能不全和高黏滯綜合征等臨床表現(xiàn)〔2〕。

        1 材料與方法

        1.1 一般資料 選擇2008年1月至2012年3月來(lái)我院診治的M患者8例,MM患者20例,所有患者均按文獻(xiàn)診斷標(biāo)準(zhǔn)明確診斷〔2〕。

        1.2 儀器與方法

        1.2.1 形態(tài)學(xué)檢查 28例患者的血涂片、骨髓涂片經(jīng)瑞-吉氏染色后,分別計(jì)數(shù)100、500個(gè)有核細(xì)胞并進(jìn)行分類,計(jì)算不同細(xì)胞百分比。

        1.2.2 免疫學(xué)檢查 抽取患者靜脈血液分兩管,各3 ml,一管采用美國(guó)Beckman Coulter公司IMMAGE800特定蛋白儀及其配套試劑進(jìn)行免疫球蛋白定量測(cè)定。另一管采用HYDRASYSPHORE sebia儀器及其配套試劑進(jìn)行血清蛋白電泳和免疫蛋白電泳檢測(cè)。

        1.2.3 免疫表型檢查 抽取骨髓約1 ml,K2-EDTA抗凝,使用美國(guó)BD公司FACS Calibur TM流式細(xì)胞儀及其配套試劑,采用雙激光四色熒光分析技術(shù),使用熒光標(biāo)記的單克隆抗體標(biāo)記細(xì)胞表面標(biāo)志,CD45/CDSSC設(shè)門,圈定細(xì)胞群,經(jīng)參數(shù)分析,確定免疫表型,單抗包括抗 CD3、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、CD38、CD56、CD138 抗體。

        2 結(jié)果

        2.1 臨床資料和特征 (1)WM患者:8例,男5例、女3例,中位數(shù)年齡為64(52~74)歲;臨床表現(xiàn)為乏力6例(75.0%)、貧血5例(62.5%)、發(fā)熱2例(25.0%)、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀3例(37.5%)、淺表淋巴結(jié)腫大3例(37.5%)、肝脾腫大 2例(25.0%)、紫癜2例(25.0%)。(2)MM患者20例:男13例、女7例,中位數(shù)年齡為60(47~69)歲;主要臨床表現(xiàn)為病理性骨折17例(85.0%)、貧血15例(75.0%)、腎功能不全12例(60.0%)。

        2.2 實(shí)驗(yàn)室檢查 見表1。

        2.2.1 WM患者檢查結(jié)果 外周血涂片分類漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞比值為0.06~0.22,平均0.14,絕大多數(shù)患者呈正細(xì)胞、正色素性貧血,骨髓象分類顯示漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞比值為0.092~0.42,平均0.256。外周血和骨髓中的成熟紅細(xì)胞短串錢狀排列現(xiàn)象非常明顯。免疫球蛋白定量IgM異常增高,均>10 g/L,最高值達(dá)到89.35 g/L;IgG、IgA各有1例在參考范圍內(nèi),其余6例患者均減低。8例患者血清蛋白電泳都顯示異常的濃染“M蛋白”帶,均出現(xiàn)在γ區(qū)域。IFE檢查結(jié)果顯示κ輕鏈6例、λ輕鏈2例。免疫表型檢查結(jié)果:本組患者均高比例表達(dá)CD10〔6 例 (75.0%)〕、CD19〔7 例 (87.5%)〕、CD20〔7 例(87.5%)〕,僅有1例(12.5%)患者同時(shí)表達(dá) CD38。X線檢查:本組患者均未出現(xiàn)溶骨性病變及病理性骨折。生化檢驗(yàn)結(jié)果:8例患者尿素氮、肌酐均在參考范圍。

        2.2.2 MM患者檢查結(jié)果 外周血涂片漿細(xì)胞比值0~0.04,平均0.02,成熟紅細(xì)胞大小不一,多呈長(zhǎng)緡錢狀排列。骨髓象檢驗(yàn)結(jié)果顯示漿細(xì)胞比值為0.116~0.72,平均0.418,20例患者血清蛋白電泳出現(xiàn)異常的濃染“M蛋白”帶,16例出現(xiàn)在γ區(qū)域、3例在β、γ之間、1例在α區(qū)域(IgA型)。免疫球蛋白定量:IgG增高>35 g/L 15例,κ輕鏈5例、λ輕鏈10例;IgA增高>20 g/L 4例,κ輕鏈、λ輕鏈各 2例;IgM增高 1例,32.68 g/L,為κ輕鏈型。免疫表型檢查結(jié)果:本組患者高比例表達(dá) CD38〔18 例(90.0%)〕、CD138〔19 例(95.0%)〕,有3 例(15.0%)表達(dá)CD56,不表達(dá)B細(xì)胞抗原CD19和CD20。X線檢查:本組患者中有11例出現(xiàn)溶骨性病變、4例出現(xiàn)病理性骨折、2例出現(xiàn)骨質(zhì)疏松、3例患者拒絕做X線檢查。生化檢驗(yàn)有12 例患者尿素氮 >7.10 mmol/L、肌酐 >115 μmol/L。

        表1 血常規(guī)檢查結(jié)果〔n(%)〕

        3 討論

        WM是血液中呈現(xiàn)大量單克隆巨球蛋白(IgM)為特征的B淋巴細(xì)胞惡性病變。WM患者骨髓中典型的表現(xiàn)以小淋巴細(xì)胞、伴有不同比例的漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞及成熟漿細(xì)胞增生為主。小淋巴細(xì)胞大小與正常小淋巴細(xì)胞類似,胞核小、圓形、橢圓形、偏位、染色質(zhì)致密偏粗、無(wú)核仁,胞漿量少、淡藍(lán)色。漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞異常增生是巨球蛋白血癥最重要的骨髓形態(tài)學(xué)特點(diǎn),具有提示診斷的意義。漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞形態(tài)介于小淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞之間,比小淋巴細(xì)胞胞體偏大,圓形、橢圓形,核圓形、橢圓形,染色質(zhì)致密,無(wú)核仁,胞漿量比小淋巴細(xì)胞豐富、藍(lán)色或灰藍(lán)色,部分胞漿邊緣不整齊,在胞漿邊緣處可見斷離的小滴狀胞漿。漿細(xì)胞為成熟漿細(xì)胞,核偏位、圓形、染色質(zhì)粗糙呈塊狀,胞漿量豐富、深藍(lán)色不透明,有泡沫感。免疫表型分析具有重要的意義,主要表達(dá) CD10、CD19、CD20,不表達(dá)CD138,8例WM患者中僅有1例表達(dá)CD38。該組患者中的漿細(xì)胞多以成熟漿細(xì)胞為主,核圓形、橢圓形,染色質(zhì)粗糙呈塊狀,偶見畸形核漿細(xì)胞。外周血和骨髓中的成熟紅細(xì)胞短串錢狀排列現(xiàn)象非常明顯。血清蛋白電泳常在γ區(qū)出現(xiàn)M蛋白異常條帶,免疫球蛋白定量IgM異常增高,多>10g/L,免疫蛋白電泳確定為單克隆IgM型,κ輕鏈比λ輕鏈多見。WM患者缺乏典型的臨床表現(xiàn),并發(fā)癥多見,但不同于MM患者的是很少出現(xiàn)溶骨性病變、病理性骨折和腎功能減退〔3〕。

        MM患者骨髓內(nèi)骨髓瘤細(xì)胞異常增生,該類細(xì)胞大小明顯不一,橢圓形或不規(guī)則形,胞核圓形、橢圓形、畸形,染色質(zhì)粗糙疏松、核仁隱顯不一,胞漿量豐富,多呈藍(lán)色、灰藍(lán)色,偶呈火焰狀不透明、有泡沫感、近核處可見初漿。涂片易見雙核、三核、多核瘤細(xì)胞,可見瘤細(xì)胞群簇聚集現(xiàn)象。免疫表型分析瘤細(xì)胞高比例表達(dá)CD38、CD138。有學(xué)者認(rèn)為 CD138是漿細(xì)胞最特異的指標(biāo)〔4〕。外周血漿細(xì)胞<4%,成熟紅細(xì)胞緡錢狀排列現(xiàn)象典型。血清蛋白電泳出現(xiàn)異常M蛋白條帶,免疫球蛋白定量及免疫蛋白電泳:20例MM患者中最常見的是單克隆IgG型、其次為單克隆IgA型、另1例為單克隆IgM型;λ輕鏈比κ輕鏈多見。未發(fā)現(xiàn)IgD型、輕鏈型、雙克隆或多克隆免疫球蛋白型及不分泌型,可能與病例少有關(guān)。WM病程進(jìn)展緩慢,臨床表現(xiàn)多種多樣,且并發(fā)癥多,誤診率較高。對(duì)于老年患者出現(xiàn)貧血、感染、尤其是出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和視力障礙癥狀、眼底改變時(shí),應(yīng)做血常規(guī)、血沉、蛋白定量測(cè)定;如有異常,特別是總蛋白、球蛋白高時(shí),應(yīng)繼續(xù)做血清蛋白電泳、免疫蛋白電泳、骨髓細(xì)胞免疫表型及細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查。細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)在這兩種疾病鑒別上有一定意義,WM以小淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞、成熟漿細(xì)胞增生為主;而MM患者的骨髓中以原始、幼稚漿細(xì)胞增生為主。綜上所述,以上幾種實(shí)驗(yàn)協(xié)助檢查,可有效幫助醫(yī)生早期明確診斷,為患者提供最佳治療時(shí)機(jī),對(duì)指導(dǎo)臨床治療、判斷預(yù)后具有重要的臨床意義。

        1 Owen RG,Treon SP,Alkatib A,et al.Clinicopathological definition of Waldenstrom macroglobulinemia:consensus panel recommendations from the second international workshop on Waldenstrom macroglobulinemia〔J〕.Semi Oncol,2003;30:110-5.

        2 張之南,沈 悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)〔M〕.第3版.北京:科學(xué)出版社,2007:232-5.

        3 范立權(quán),熊樹民.漿細(xì)胞白血病實(shí)驗(yàn)室診斷與鑒別分析〔J〕.診斷學(xué)理論與實(shí)踐,2008;7(4):412-5.

        4 Yang Y,Yaccoby S,Liu W,et al.Soluble syndecan-1 promotes growth of myeloma tumors in vivo〔J〕.Blood,2002;100(2):610-7.

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