張國明，馬小波，胡禮儀，臧家蘭，張高明，徐慶雷

(江蘇省沭陽縣人民醫(yī)院，江蘇 宿遷 223600)

正常人群血清細(xì)胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment 21-1，CYFRA21-1)水平低于1.7 μg/L，當(dāng)癌細(xì)胞溶解或壞死脫落時(shí)，可釋放大量CYFRA21-1進(jìn)入血循環(huán)使其表達(dá)上調(diào)。有研究表明，CYFRA21-1水平在惡性疾病中上升，特別是非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)[1]。本研究檢測了健康人以及NSCLC患者血清CYFRA21-1水平，并探討其在NSCLC患者病情和化療療效監(jiān)測中的價(jià)值。

材料和方法

一、研究對象

選擇沭陽縣人民醫(yī)院2009年5月至2011年9月收治的66例初診的NSCLC患者，年齡45～72歲。原發(fā)腫瘤灶為可測量病灶[即胸片或普通計(jì)算機(jī)斷層掃描(CT)腫瘤病灶最長直徑≥2 cm，螺旋CT病灶直徑≥1 cm]。所有患者經(jīng)病理學(xué)證實(shí)為NSCLC，男37例，女29例，其中肺腺癌31例，肺鱗癌35例，根據(jù)1997年國際抗癌聯(lián)盟(UICC)分期，ⅢA期6例，ⅢB28例，Ⅳ期32例。30名健康對照者為沭陽縣人民醫(yī)院體檢中心體檢健康者，男、女各15名，年齡29～76歲。健康對照組與肺癌組在年齡和性別上均有可比性，所有病例均符合以下條件:(1)均失去手術(shù)機(jī)會(huì)或不愿接受手術(shù)或有手術(shù)禁忌癥的中晚期NSCLC;(2)患者之前未接受過其他抗腫瘤治療;(3)具有可評價(jià)的腫瘤病灶，可行化療療效評價(jià);(4)排除肺癌患者合并胃腸道疾病、婦科疾病、泌尿系統(tǒng)疾病、腎功能不全等疾病。

二、方法

1.化療方案 所有患者均接受一線化療藥物化療，化療方案:吉西他濱 +順鉑，吉西他濱1000 mg/(m2·d)，靜脈滴注，第 1、8、15 天;順鉑100 mg/m2，靜脈滴注，第1天。每4周為1療程，并完成4個(gè)療程。所有患者抽血當(dāng)天如果用藥，于抽血后滴注化療藥物。

2.標(biāo)本采集 于化療第1療程的當(dāng)天上年8點(diǎn)、第8天上午8點(diǎn)、第15天上午8點(diǎn)以及第2療程第1天上午8點(diǎn)、第3療程的第1天上午8點(diǎn)和第3療程最后1天采血(化療周期為28 d)，置促凝管5 mL，3100×g離心15 min分離血清，－70℃貯存待檢?；煹牡?、第2、第3療程前血清CYFRA21-1基線水平定義為 BV1、BV2和BV3，第1療程的第8天上午8點(diǎn)、第15天上午8點(diǎn)血清CYFRA21-1水平定義為B1V8、B1V15。

3.療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 于第3療程化療前按1981年世界衛(wèi)生組織(WHO)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行化療療效評價(jià)，療效分4個(gè)等級:完全緩解(CR)，指腫塊縮小≥50%;緩解(PR)，指腫塊縮小≥25%，但＜50%;無變化(NC)或穩(wěn)定(S)，指腫塊縮小 ＜25%或增大＜25%;進(jìn)展(P)，指腫塊增大＞25%或出現(xiàn)新的病變。以上均于4周后 CT復(fù)核證實(shí)。

4.分組 按CT評價(jià)化療療效分2組:緩解組(CR+PR)和無效組[NC(或 S)+P]。66例NSCLC患者按1981年WHO標(biāo)準(zhǔn)以CT評價(jià)化療效果:緩解 53%(35/66);無效 47%[NC占48.4%(15/31)，P 占51.6%(16/31)]。

5.CYFRA21-1檢測 所有血清標(biāo)本于美國貝克曼UniCelTMDxI800全自動(dòng)免疫分析儀上進(jìn)行測定，試劑為原廠配套試劑及質(zhì)控物，嚴(yán)格按照說明書操作。CYFRA21-1 參考范圍為≤3.3 μg/L。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)用SPSS 15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以表示，組間均數(shù)比較采用方差分析，率比較用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、不同組織類型 NSCLC患者血清CYFRA21-1水平比較

NSCLC患者血清CYFRA21-1水平明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在NSCLC患者中肺鱗癌患者CYFRA21-1水平和陽性率明顯高于肺腺癌患者(P＜0.05)，見表1。

表1 不同組織類型NSCLC患者和健康對照者血清CYFRA21-1水平比較()

表1 不同組織類型NSCLC患者和健康對照者血清CYFRA21-1水平比較()

注:與健康對照組比較，*P ＜0.05;與肺腺癌組比較，#P ＜0.05

組別 例數(shù) CYFRA21-1(μg/L)陽性率(%)NSCLC 組 66 15.26 ±11.47* 60.6(40/66)肺鱗癌組 35 20.18 ±16.12*#77.0(27/35)肺腺癌組 31 11.97 ±9.01* 42.0(13/31)健康對照組 30 2.03 ±1.31 3.3(1/30)

二、化療第1療程、第2療程前后NSCLC患者血清CYFRA21-1水平比較

與治療前比較，化療緩解的患者治療后CYFRA21-1水平明顯下降(P＜0.05)，見表2;單變量分析表明，緩解組第2療程開始前的BV2、第3療程開始前的BV3血清CYFRA21-1水平明顯低于無效組(P＜0.05)，見圖1。BV1與 BV2的差別(BV1－BV2)和BV1與BV3的差別(BV1－BV3)，即療程2和療程3開始前的基線值分別較療程1開始前下降幅度明顯高于無效組(P＜0.05)。

表2 NSCLC患者一線化療緩解組和無效組血清CYFRA21-1水平 (μg/L)

三、化療前、后血清CYFRA21-1水平變化與化療療效的關(guān)系

NSCLC在一線化療前血清CYFRA21-1水平BV1、B1V8、B1V15在緩解組與無效組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.051;P=0.625;P=0.820)，但BV2和BV3差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);化療后緩解組BV2和BV3與化療前相比有逐漸降低的趨勢(P＜0.05)。緩解組化療第2療程前BV2與化療第1療程前BV1比較明顯降低，提示此組NSCLC患者對化療藥物敏感。

圖1 NSCLC患者化療前、后CYFRA21-1水平變化

討 論

NSCLC是肺癌中最常見的組織類型，占肺癌總數(shù)的70% ～80%，各期肺癌的5年存活率只有13%，因此，肺癌的治療和預(yù)后監(jiān)測具有重要的意義。眾所周知，化療藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也傷害正常細(xì)胞，而初治NSCLC患者的化療有效率僅為30% ～40%[1]。因此，及時(shí)準(zhǔn)確地判斷療效，終止無效治療就顯得尤為重要。然而影像學(xué)方法判斷療效多半在化療幾個(gè)周期后，因此，每周期化療療效的判斷需依據(jù)患者的其他信息，如癥狀、體征和腫瘤標(biāo)志物的變化等，而腫瘤標(biāo)志物的變化最為重要。若能較早知道腫瘤對化療的敏感性可根據(jù)患者的具體情況及時(shí)調(diào)整治療方案，以達(dá)到個(gè)體化治療的目的。

CYFRA21-1是細(xì)胞角蛋白19的可溶性片段，是一種酸性多肽，分布單層上皮細(xì)胞中，來源于上皮細(xì)胞的惡性腫瘤可見細(xì)胞角蛋白19的過度表達(dá)，NSCLC中鱗癌、腺癌均有細(xì)胞角蛋白19表達(dá)，當(dāng)腫瘤細(xì)胞死亡時(shí)激活的蛋白酶加速了細(xì)胞角蛋白的降解，大量溶解的片段釋放到血循環(huán)中[2]，使血中 CYFRA21-1 含量升高，肺癌中CYFRA21-1含量特別豐富，尤其是鱗癌[3]。以往較多的研究將腫瘤標(biāo)志物用于“診斷”，而國內(nèi)外具有指導(dǎo)意義的文件都認(rèn)為:腫瘤標(biāo)志物的主要臨床應(yīng)用價(jià)值是判斷治療效果和復(fù)發(fā)監(jiān)測[4]，而少見國內(nèi)將CYFRA21-1用于肺癌患者評價(jià)療效的文獻(xiàn)。本研究對象為晚期NSCLC患者，化療前由于大腫瘤細(xì)胞的存在，結(jié)果顯示，NSCLC患者血清CYFRA21-1水平明顯高于健康對照組(P＜0.05)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]。以 ＞3.30 μg/L 為陽性，血清CYFRA21-1對肺癌的陽性率為60.6%(40/66)，由于本研究未用良性肺疾病作對照，故不能作出特異性的評價(jià)。不同細(xì)胞類型的NSCLC患者血清CYFRA21-1的表達(dá)也不一樣，其中以肺鱗癌患者血清CYFRA21-1水平和陽性率最高，顯著高于肺腺癌(P＜0.05)，這與Buccheri等[6]的報(bào)道一致。

由于健康人CYFRA21-1水平變化很小，且半衰期較短，因此，在首次治療(放化療、手術(shù))后不久(大約48 h后)就可檢測 CYFRA21-1，以評價(jià)治療效果[7]。本研究結(jié)果顯示，對化療有效的患者治療后，CYFRA21-1水平與治療前比較明顯下降(P＜0.05)，而對化療抵抗的患者CYFRA21-1水平在治療前、后變化不明顯 (P＞0.05)?？赡苁怯捎贑YFRA21-1為腫癌細(xì)胞分泌，其水平與瘤細(xì)胞數(shù)目相關(guān)[8]，緩解組B1V8一過性增高，是由于腫瘤細(xì)胞大量壞死，細(xì)胞溶解釋放大量的CYFRA21-1而使其表達(dá)上調(diào)，化療第2周期前BV2與化療第1周期前BV1比較明顯降低，預(yù)示著此組NSCLC患者對化療藥物敏感[9-10]。

綜上所述，血清CYFRA21-1可作為早期判斷NSCLC患者化療敏感性的指標(biāo)，在化療第2周期開始前足以判斷出對化療敏感與否;以血清CYFRA21-1水平來評價(jià)早期化療的敏感性優(yōu)于CT，在評價(jià)化療療效方面與CT有高度相關(guān)性，對早期預(yù)測化療藥物的療效有重要的指導(dǎo)價(jià)值。臨床醫(yī)生可在每個(gè)個(gè)體化療的1個(gè)周期內(nèi)密切監(jiān)測血清CYFRA21-1水平，判斷目前所用化療方案是否有效，及時(shí)變更化療方案，以達(dá)到最佳化療效果。

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