戈 偉,范珊紅,汪定成,邵海連,楊 銘
(第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院感染管理科,陜西 西安 710038)
二氧化碳嗜纖維菌屬是細(xì)小梭狀的革蘭陰性桿菌,其與牙周疾病密切相關(guān),也可引起其他系統(tǒng)感染。由該菌引起感染的病例報(bào)道國(guó)內(nèi)少見(jiàn),國(guó)外報(bào)道也不多[1]。我們從唐都醫(yī)院1例食管癌患者術(shù)后切口膿液中分離出1株溶血二氧化碳嗜纖維桿菌。
患者,男,65歲,工人,以進(jìn)食后胸骨后疼痛不適半年于2012年2月25日入院,確診為食管癌。于2012年3月7日進(jìn)行食管部分切除、食管胃胸膜頂器械式吻合加淋巴結(jié)清掃術(shù),術(shù)后第3天患者體溫升高,達(dá) 38.9℃,白細(xì)胞 15.15×109/L,中性粒細(xì)胞 0.946,淋巴細(xì)胞 0.029,紅細(xì)胞3.20 ×1012/L,血紅蛋白 99 g/L,血小板164×109/L,肝腎功能均正常。查體:雙肺呼吸音清晰,未聞及干濕啰音,左肺呼吸音低。胸部計(jì)算機(jī)體層掃描檢查提示,雙側(cè)胸膜腔積液,左側(cè)胸壁皮下氣腫。行胸腔閉式引流術(shù),引流出淡紅色液體約500 mL及少量氣泡。換藥時(shí)見(jiàn)傷口紅腫,局部有滲出,拆開(kāi)部分見(jiàn)有膿性液體滲出,抽取膿性液體送細(xì)菌培養(yǎng),檢出溶血二氧化碳嗜纖維桿菌,用紙片擴(kuò)散法做藥物敏感性試驗(yàn),結(jié)果顯示該菌對(duì)亞胺培南、哌拉西林-他唑巴坦、左氧氟沙星敏感,對(duì)哌拉西林、頭孢噻肟、阿米卡星耐藥。臨床采用亞胺培南及美羅培南治療1周后患者雙肺呼吸音清晰,未聞及干濕啰音,傷口無(wú)滲出,創(chuàng)面新鮮有肉芽組織長(zhǎng)出,愈合良好。
患者直接涂片為革蘭陰性桿菌,絲狀梭形桿菌,見(jiàn)圖1,接種3塊血瓊脂分別放置需氧環(huán)境、厭氧環(huán)境及10%CO2環(huán)境培養(yǎng),經(jīng)35℃培養(yǎng)48 h后,需氧環(huán)境平板上無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng),厭氧環(huán)境及10%CO2環(huán)境平板長(zhǎng)出直徑約2~3 mm灰白色、稍凸起、沿劃線(xiàn)擴(kuò)散生長(zhǎng)、呈條紋樣邊緣的菌落。涂片染色鏡檢為革蘭陰性桿菌,菌體呈絲狀,似梭形,見(jiàn)圖2。該菌氧化酶、觸酶均為陰性,采用美國(guó)西門(mén)子公司的WalkAway-96全自動(dòng)微生物分析儀苛養(yǎng)菌鑒定板上機(jī)檢測(cè),結(jié)果為二氧化碳嗜纖維桿菌屬,鑒定值99.99%,生物編碼77477661。進(jìn)一步做補(bǔ)充生化試驗(yàn),葡萄糖O/F發(fā)酵、乳糖、蔗糖、硝酸鹽還原、七葉苷、半乳糖苷酶試驗(yàn)陽(yáng)性,精氨酸、蜜二糖試驗(yàn)陰性。根據(jù)生化特性與形態(tài)染色,確定為溶血二氧化碳嗜纖維桿菌。
圖1 二氧化碳嗜纖維桿菌直接涂片革蘭染色鏡下形態(tài)(×1000)
圖2 二氧化碳嗜纖維桿菌純培養(yǎng)涂片革蘭染色鏡下形態(tài)(×1000)
二氧化碳嗜纖維桿菌屬是1979年提出來(lái)的,根據(jù)16S RNA的序列分析,該菌屬可分為3個(gè)組:(1)溶血二氧化碳嗜纖維桿菌、黃褐二氧化碳嗜纖維桿菌、生痰二氧化碳嗜纖維桿菌;(2)牙齦二氧化碳嗜纖維桿菌、顆粒二氧化碳嗜纖維桿菌;(3)狗咬二氧化碳嗜纖維桿菌、犬咬二氧化碳嗜纖維桿菌[2]。黃褐二氧化碳嗜纖維桿菌、生痰二氧化碳嗜纖維桿菌、牙齦二氧化碳嗜纖維桿菌鑒別比較困難,他們都是氧化酶、觸酶、精氨酸雙水解酶陰性。溶血二氧化碳嗜纖維桿菌、黃褐二氧化碳嗜纖維桿菌能發(fā)酵半乳糖、糖原,但硝酸鹽反應(yīng)陰性,這一點(diǎn)與生痰二氧化碳嗜纖維桿菌不同。牙齦二氧化碳嗜纖維桿菌與其他2種菌不同的是七葉苷、乳糖和蜜三糖的發(fā)酵反應(yīng)陰性或結(jié)果可變。另2種寄居在人體的二氧化碳嗜纖維桿菌——顆粒二氧化碳嗜纖維桿菌和溶血二氧化碳嗜纖維桿菌區(qū)別是溶血二氧化碳嗜纖維桿菌硝酸鹽反應(yīng),水解七葉苷及糖原和菊粉的發(fā)酵反應(yīng)均陽(yáng)性。從動(dòng)物中分離的狗咬二氧化碳嗜纖維桿菌與犬咬二氧化碳嗜纖維桿菌與人體分離的二氧化碳嗜纖維桿菌不同之處是他們的氧化酶、觸酶及精氨酸雙水解酶陽(yáng)性。狗咬二氧化碳嗜纖維桿菌和犬咬二氧化碳嗜纖維桿菌區(qū)別是前者不能發(fā)酵菊粉、蜜三糖、蔗糖。
二氧化碳嗜纖維桿菌主要寄生人類(lèi)口腔中,為條件致病菌。本案例為食道癌患者,可能與免疫功能減低引起該菌感染有直接關(guān)系。由于二氧化碳嗜纖維桿菌為兼性厭氧菌或微需氧菌,對(duì)營(yíng)養(yǎng)及孵育的條件要求苛刻,生長(zhǎng)緩慢,培養(yǎng)周期較長(zhǎng),國(guó)內(nèi)報(bào)道該菌引起的感染甚少,應(yīng)引起臨床及實(shí)驗(yàn)室高度重視。盡管目前試驗(yàn)技術(shù)還沒(méi)有商業(yè)化,但是DNA同源分析、16S RNA的限制片段長(zhǎng)度多態(tài)性以及細(xì)胞蛋白圖譜等方法已經(jīng)用來(lái)鑒別二氧化碳嗜纖維桿菌屬。
[1]陳東科,胡付品.二氧化碳嗜纖維菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的耐藥性分析及基因型檢測(cè)[J].實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志,2011,3(4):198-202.
[2]徐國(guó)建,梁國(guó)棟,邢來(lái)君,等.臨床微生物學(xué)手冊(cè)[M].北京:科學(xué)出版社,2005:797-804.