王建輝，趙 輝，魏 永，趙厚偉，李 鵬，林崇強(qiáng)，朱曉曉，丁義超，許建華

（1.睢寧縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇睢寧 221200；2.睢寧縣動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，江蘇睢寧 221200；3.睢寧縣姚集鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇睢寧 221200；4.睢寧縣邱集鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇睢寧 221200）

生豬O型口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟是國(guó)家強(qiáng)制免疫的生豬病種。一般情況下，采用的免疫程序?yàn)槭酌庾⑸淇谔阋?、豬瘟疫苗，7～10天后注射藍(lán)耳病疫苗，1月后進(jìn)行二免，這種免疫程序較復(fù)雜，難操作，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且一免的抗體合格率不高。睢寧縣是生豬養(yǎng)殖大縣，2011年生豬出欄量達(dá)135.2萬(wàn)頭，規(guī)模養(yǎng)殖比重達(dá)79.1%。為提高基層免疫工作效率，降低強(qiáng)制免疫工作難度，有必要研究一種更合理的生豬O型口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟活疫苗三種疫苗的免疫程序，特進(jìn)行本試驗(yàn)，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法：

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 供試動(dòng)物：睢寧縣晁輝生豬養(yǎng)殖合作社（1場(chǎng)）和睢寧縣邱集鎮(zhèn)某養(yǎng)豬場(chǎng)（2場(chǎng)）選擇28日齡以上的健康、未免疫的仔豬進(jìn)行試驗(yàn)，每場(chǎng)選擇90頭，共180頭仔豬。期間試驗(yàn)豬按豬場(chǎng)正常生產(chǎn)流程管理，所有仔豬所處環(huán)境條件和飼養(yǎng)管理?xiàng)l件相同。

1.1.2 試驗(yàn)疫苗：本試驗(yàn)所用疫苗由江蘇省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一供應(yīng)，豬O型口蹄疫合成肽疫苗（新疆天康生物制品有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2012009）；STTM豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞源）（廣東永順生物制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2012043）；高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-F92株）（山西隆克爾生物制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)3212051）。

1.1.3 試驗(yàn)試劑：豬O型口蹄疫VP1結(jié)構(gòu)蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒（上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20110508）；豬瘟抗體檢測(cè)阻斷ELISA試劑盒（LSI生產(chǎn)，批號(hào)5-VETPPC-006）；豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)ELISA試劑盒（LSI生產(chǎn)，批號(hào)5-VETPRA-032）。

1.2 方法

1.2.1 免疫劑量及途徑（表1）

表1 免疫劑量及途徑

1.2.2 試驗(yàn)分組及免疫方案：選取實(shí)驗(yàn)豬隨機(jī)平均分到A、B、C、D、E、F、G、H、I 9個(gè)組中，每組10只，并對(duì)每頭仔豬打耳標(biāo)編號(hào)，原圈飼養(yǎng)。按表2進(jìn)行免疫接種。

1.2.3 免疫反應(yīng)觀(guān)察：每次免疫后96 h內(nèi)，對(duì)各組試驗(yàn)豬逐個(gè)觀(guān)察并記錄精神狀況、采食、發(fā)病、死亡等情況，統(tǒng)計(jì)免疫副反應(yīng)具體情況。

1.2.4 抗體監(jiān)測(cè)：分別在首免21天，二免23天后分別對(duì)各組試驗(yàn)豬無(wú)菌采血2 mL，登記耳標(biāo)號(hào)，做好血樣標(biāo)簽，分離血清，進(jìn)行抗體檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 免疫副反應(yīng)情況（表3）

表2 試驗(yàn)分組及免疫方案

表3 免疫副反應(yīng)情況

2.2 試驗(yàn)結(jié)果

用豬瘟抗體檢測(cè)阻斷ELISA試劑盒，檢測(cè)試驗(yàn)A組、試驗(yàn)B組、試驗(yàn)E組、試驗(yàn)F組、試驗(yàn)G組、試驗(yàn)H組、試驗(yàn)I組。首免 21天后的豬瘟抗體效價(jià)， 結(jié)果見(jiàn)表4。二免 23 天后的豬瘟抗體效價(jià)， 結(jié)果見(jiàn)表7。

用豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)ELISA試劑盒，檢測(cè)試驗(yàn)A組、試驗(yàn)D組、試驗(yàn)E組、試驗(yàn)F組、試驗(yàn)G組、試驗(yàn)H組、試驗(yàn)I組。首免21天后的豬繁殖與呼吸綜合癥抗體效價(jià)， 結(jié)果見(jiàn)表5。二免23天后的豬繁殖與呼吸綜合癥抗體效價(jià)， 結(jié)果見(jiàn)表8。

用豬口蹄疫VP1結(jié)構(gòu)蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒，檢測(cè)試驗(yàn)A組、試驗(yàn)C組、試驗(yàn)E組、試驗(yàn)F組、試驗(yàn)G組、試驗(yàn)H組、試驗(yàn)I組。首免21天后的豬口蹄疫抗體效價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表6。二免23天后的豬口蹄疫抗體效價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表9。

3 結(jié)論

3.1 使用三種疫苗共計(jì)免疫了180頭生豬，僅僅1頭出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，證明現(xiàn)在政府招標(biāo)提供的疫苗副反應(yīng)較小，適合大面積普免。

3.2 三種疫苗單獨(dú)免疫的免疫效果均最好，均好于疫苗同時(shí)免疫或者三種疫苗先后免疫的。

3.3 三種疫苗先后間隔7天免疫，免疫效果也較好，但是此種免疫工作量大，操作難度大，不適合大面積普免。

3.4 高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-F92株）與其他疫苗同時(shí)免疫時(shí)，免疫效果略差于單獨(dú)免疫時(shí)的效果，說(shuō)明高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-F92株）會(huì)干擾其他疫苗的免疫效果，但影響較小。

3.5 三種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射，其免疫效果較單獨(dú)免疫稍差，但均好于國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。說(shuō)明三種疫苗同時(shí)注射，也可以達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，效果雖然差于單獨(dú)免疫的效果，但這樣可以減少操作次數(shù)，同時(shí)減少豬應(yīng)激次數(shù)，適合在基層大面積推廣。

表4 豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果（一免）

表5 高致病性豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)結(jié)果（一免）

表6 豬口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果（一免）

表7 豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果（二免）

表8 高致病豬性藍(lán)耳病抗體檢測(cè)結(jié)果（二免）

表9 豬口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果（二免）

4 討論

按照企業(yè)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-F92株）不會(huì)干擾其他疫苗的免疫效果，但是此次試驗(yàn)證實(shí)，高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-F92株）還會(huì)影響其他疫苗的免疫效果。

部分專(zhuān)家認(rèn)為不適合將幾種疫苗同時(shí)注射，這樣免疫效果不理想。但是此次試驗(yàn)證實(shí)，STTM豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫合成肽疫苗和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-F92株）三種疫苗可以同時(shí)注射，免疫效果均高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)工作量大幅降低，適合在基層防疫工作中大力推廣。

[1] 張長(zhǎng)龍，嚴(yán)寶英，賈文孝，等.豬瘟、豬口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病疫苗有效免疫試驗(yàn)初探[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2009，30（7）：101-103.

[2] 華樹(shù)明.豬口蹄疫、高致病性藍(lán)耳病分點(diǎn)注射效果觀(guān)察[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2008，128（4）：23-24.

[3] 李金海，張東，鄧永強(qiáng)，等.同時(shí)免疫口蹄疫和高致病性豬藍(lán)耳病疫苗對(duì)免疫效果的影響[J].畜禽業(yè)，2008（5）：33-34.