陳麗艷 脫 晉 郭秀娟
遼寧省大連市婦產(chǎn)醫(yī)院急診科,遼寧大連 116033
子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma)是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤,自生育年齡至絕經(jīng)后均可發(fā)生,發(fā)病高峰在50~69歲,近年來(lái)其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì),但其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明[1]。子宮內(nèi)膜增生癥包括單純?cè)錾?、?fù)雜性增生及非典型增生,其與內(nèi)膜癌的發(fā)生關(guān)系密切。環(huán)氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)屬于誘導(dǎo)型基因,一般只在誘導(dǎo)因子的作用下表達(dá)上調(diào)。大量研究證明血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有促進(jìn)有絲分裂作用,并有促進(jìn)血管增生的能力。本研究通過(guò)檢測(cè)COX-2與VEGF在子宮內(nèi)膜增生癥及子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá),探討二者在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。
選擇2008年1月1日~2011年9月1日大連市婦產(chǎn)醫(yī)院術(shù)后病理診斷為子宮內(nèi)膜癌的100例患者為研究對(duì)象。 患者年齡 28~75 歲,平均(53.1±7.4)歲;所有患者術(shù)前均未行化療、放療及內(nèi)分泌治療。取同時(shí)期子宮內(nèi)膜增生癥患者標(biāo)本90例為子宮內(nèi)膜增生癥組,其中單純性增生30例,復(fù)雜性增30例,不典型增生30例,患者年齡29~63歲,平均(51.3±8.2)歲。并取同時(shí)期因其他原因行全子宮切除術(shù)獲得的正常子宮內(nèi)膜增生期標(biāo)本30例作為對(duì)照組,年齡 45~65 歲,平均(55.2±4.5)歲。
鼠抗人COX-2單克隆抗體,鼠抗人VEGF單克隆抗體,PV9000 Immuno-Bridge+二步法免疫組化試劑盒及3,3'-二氨基聯(lián)苯胺顯色劑(DAB),以上試劑購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。
每例標(biāo)本經(jīng)常規(guī)甲醛溶液固定,石蠟包埋,連續(xù)組織切片成4 μm厚,按SP法試劑盒說(shuō)明進(jìn)行免疫組化染色。
COX-2與VEGF免疫反應(yīng)陽(yáng)性物質(zhì)主要位于細(xì)胞漿,呈棕黃色至棕褐色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞,細(xì)胞無(wú)陽(yáng)性反應(yīng)為陰性。陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)采用高倍鏡(400×)下對(duì)每張切片隨機(jī)選擇5個(gè)視野,計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞/視野,共計(jì)1 000個(gè)以百分率表示,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<1%為陰性(-),陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)1%~10%微弱陽(yáng)性(+),11%~50%為中度陽(yáng)性(++),>50%為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。
所有數(shù)據(jù)均用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
COX-2在正常增生期子宮內(nèi)膜無(wú)表達(dá),在VEGF中2例呈弱陽(yáng)性(+)表達(dá),陽(yáng)性率為6.67%。
COX-2與VEGF在不典型增生及復(fù)雜性增生內(nèi)膜中的表達(dá)均明顯強(qiáng)于單純性增生,在不典型增生和復(fù)雜性增生的內(nèi)膜表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);但它們?cè)趩渭冃驮錾?fù)雜型增生、不典型增生子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)逐漸增強(qiáng)(P < 0.05)。 見(jiàn)表 1、2。
表1 COX-2在子宮內(nèi)膜增生癥的表達(dá)(n)
復(fù)雜性及不典型增生與單純性增生比較,P<0.05;復(fù)雜性與不典型增生相比較,P>0.05;3種組織類(lèi)型間的表達(dá)率比較,P均<0.05。
表2 VEGF在子宮內(nèi)膜增生癥的表達(dá)(n)
復(fù)雜性及不典型增生與單純性增生比較,P<0.05;復(fù)雜性與不典型增生相比較,P>0.05;3種組織類(lèi)型間的表達(dá)率比較,P均<0.05。
子宮內(nèi)膜癌組織中COX-2陽(yáng)性染色不僅見(jiàn)于子宮內(nèi)膜癌上皮細(xì)胞的胞漿,而且見(jiàn)于血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿,棕黃色顆粒彌漫分布于整個(gè)胞漿或沿核膜周邊呈線狀分布;VEGF表達(dá)于多數(shù)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞和少數(shù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿;COX-2在正常增生期子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜增生癥及子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)陽(yáng)性率分別為0.0%、58.9%、88.0%,VEGF在正常增生期子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜增生癥及子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)陽(yáng)性率分別為6.7%、66.7%、92.0%。COX-2與VEGF在三種組織中的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05)。 見(jiàn)表 3、4。
COX-2與VEGF在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)通過(guò)Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)呈正相關(guān)(P<0.05)。
COX-2是前列腺素合成過(guò)程中的重要限速酶,COX-2是一種可誘導(dǎo)型酶具有促進(jìn)細(xì)胞增生、抑制細(xì)胞凋亡以及刺激新生血管的生成等多種功能[2]。近年研究發(fā)現(xiàn),COX-2在人的很多癌前病變和惡性腫瘤中高表達(dá),并可能參與腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移及分化[3-4]。正常情況下絕大部分組織細(xì)胞COX-2基因不表達(dá),只有在細(xì)胞外廣泛的刺激作用下才誘導(dǎo)表達(dá),如:炎性細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和促癌因素等均可誘導(dǎo)體內(nèi)組織產(chǎn)生COX-2。本研究顯示,COX-2蛋白在正常子宮內(nèi)膜中無(wú)表達(dá),這與眾多實(shí)驗(yàn)研究結(jié)論相符。COX-2蛋白在子宮內(nèi)膜增生癥中有較高表達(dá),與病理組織學(xué)類(lèi)型有相關(guān)性,在單純性增生、復(fù)雜性增生與不典型增生之間比較有明顯差別,且COX-2在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)明顯高于子宮內(nèi)膜增生癥中的表達(dá)。提示COX-2的表達(dá)水平與子宮內(nèi)膜增生癥的形成及內(nèi)膜細(xì)胞的增殖密切相關(guān),COX-2可能在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。
VEGF是一種對(duì)血管生長(zhǎng)有極強(qiáng)誘導(dǎo)作用的因子,能特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞,是目前所知的唯一作用于血管內(nèi)皮的生長(zhǎng)因子。VEGF一個(gè)極其重要的生物學(xué)功能就是能增加血管通透性,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移,從而促進(jìn)血管生成。VEGF在成年正常組織多呈低水平表達(dá)或不表達(dá),血管的生成在正常生理狀態(tài)是被封閉的。Kawano Y等[5]發(fā)現(xiàn)VEGF的表達(dá)與增生期子宮內(nèi)膜的新血管生成呈正相關(guān)。Ancelin M等[6]發(fā)現(xiàn)VEGF(189)在細(xì)胞中的表達(dá)可能與子宮內(nèi)膜水腫和不規(guī)則出血有相關(guān)性。據(jù)文獻(xiàn)[7]報(bào)道VEGF在子宮內(nèi)膜癌中呈現(xiàn)高表達(dá),能夠協(xié)同促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌血管形成,可提高子宮內(nèi)膜癌的侵襲能力,以及對(duì)預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌的組織病理學(xué)、臨床預(yù)后有價(jià)值。本研究提示,在正常子宮內(nèi)膜可見(jiàn)VEGF少量表達(dá),與VEGF參與女性正常子宮內(nèi)膜增生期血管生成相符。本研究發(fā)現(xiàn),VEGF蛋白在子宮內(nèi)膜增生癥及子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)量較正常子宮內(nèi)膜的表達(dá)明顯增高,且在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)明顯高于其他兩種組織類(lèi)型。提示VEGF參與了子宮內(nèi)膜增生過(guò)長(zhǎng)的血管生成及血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖,VEGF與子宮內(nèi)膜癌血管生成有關(guān),在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展的連續(xù)過(guò)程中,VEGF表達(dá)呈進(jìn)行性升高,且與增殖密切相關(guān)。
COX-2與血管生成密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn),COX-2的催化產(chǎn)物前列腺素E2(PEG-2)通過(guò)EP受體激活Her2/neu酪氨酸激酶信號(hào)通路及活化劑蛋白和轉(zhuǎn)錄激活因子促進(jìn)VEGF表達(dá),VEGF反過(guò)來(lái)又能促進(jìn)COX-2的表達(dá),其相互作用被某些因素(如炎癥)激發(fā)后,即可加速惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[8-9]新近國(guó)外有資料證實(shí)COX-2能夠上調(diào)VEGF表達(dá),促進(jìn)腫瘤新生血管形成,抑制COX-2則可抑制VEGF的表達(dá)[10]。COX-2可能通過(guò)產(chǎn)生前列腺素E調(diào)節(jié)VEGF的表達(dá),單一前列腺素E在體內(nèi)可刺激血管的生成,外源性前列腺素E可逆轉(zhuǎn)吲哚美辛引起的VEGF表達(dá)下調(diào)[11]。本研究發(fā)現(xiàn),子宮內(nèi)膜癌中COX-2表達(dá)與VEGF表達(dá)呈正相關(guān)性,說(shuō)明在子宮內(nèi)膜癌中COX-2表達(dá)與VEGF表達(dá)密切相關(guān),COX-2可能通過(guò)促進(jìn)腫瘤血管形成來(lái)影響子宮內(nèi)膜癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。因此COX-2抑制劑有可能成為治療子宮內(nèi)膜癌的新方法。近年來(lái)有關(guān)臨床研究表明,COX-2的表達(dá)多與預(yù)后不良有關(guān)。根據(jù)COX-2在不同子宮內(nèi)膜增生癥患者中的不同表達(dá),來(lái)分析判斷患者的預(yù)后及向惡性疾病 (子宮內(nèi)膜癌)的發(fā)展趨勢(shì)??筛鶕?jù)COX-2在子宮內(nèi)膜癌患者中的不同表達(dá),來(lái)分析判斷患者的預(yù)后及腫瘤的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移的趨勢(shì)。
表3 3種組織中COX-2的表達(dá)[n(%)]
表4 3種組織中VEGF的表達(dá)[n(%)]
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