衛(wèi)紅偉

乙型肝炎病毒DNA定量檢測與臨床的關系

衛(wèi)紅偉

目的 探討乙型肝炎病毒DNA的定量檢測和臨床的關系。方法 選取2010年6月至2012年6月期間來本院肝病?？凭驮\的128例患者的臨床資料進行回顧性分析, 所選取的患者均通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)來檢測乙型肝炎的病毒血清標志物, FQ-PCR(熒光定量聚合酶連反應)來檢測HBV-DNA的含量。結果 HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的陽性率為98.6%, HBcAb、HBeAg、HBsAg為25.2%, HBeAg、HBsAg為100%, HBcAb、HBsAg為20%, HBeAb、HBcAb、HBsAb為14.5%, HBcAb、HBeAb為20%, HBsAb為5.6%。全陰的為0。結論各種類型的乙型肝炎患者都有一定程度HBV-DNA復制, HBeAg的陽性患者其HBV-DNA的水平最高, 將HBV-DNA和HBeAg定量聯(lián)合進行診斷, 可以為早期的乙型肝炎篩查以及治療提供可靠的依據。

乙型肝炎病毒；DNA定量檢測；關系

為了探討乙型肝炎病毒DNA的定量檢測和臨床的關系,本次研究選取2010年6月~2012年6月期間來河南省宜陽縣人民醫(yī)院肝病?？凭驮\的128例患者的臨床資料進行回顧性分析, 所選取的患者均通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)來檢測乙型肝炎的病毒血清標志物, FQ-PCR(熒光定量聚合酶連反應)來檢測HBV-DNA的含量?，F將大致研究結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年6月至2012年6月期間來本院肝病?？凭驮\的128例患者, 其中男73例, 女55例, 年齡在12~76歲之間, 平均(34.8±14.5)歲, 所選取的患者都符合病毒性肝炎的診斷標準。且各類型的肝炎患者之間的資料沒有明顯的差異, 結果具有可比性。

1.2 檢測的儀器和試劑 HBV血清檢測標志物檢測試劑盒和HBV核酸擴增熒光檢測試劑盒；熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)分析儀均產自上?？迫A生物技術公司。

1.3 方法 在患者晨起空腹時抽取5 ml靜脈血, 將血清離心分裝在-20℃下保存?zhèn)溆?。然后通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)來檢測乙型肝炎的病毒血清標志物, 操作步驟按照試劑盒的規(guī)定進行。通過FQ-PCR(熒光定量聚合酶連反應)來檢測HBV-DNA的含量, 每一次檢驗都設立強陽性、弱陽性以及陰性作為內標, 將四個已經通過的陽性標準品作為外標。在進行檢測時做好室內的質控。

1.4 觀測的指標 觀測患者血清學的診斷指標和HBVDNA的陽性率以及定量檢測的結果情況；血清學的診斷分組：第一組為HBcAb、HBeAg、HBsAg, 第二組為HBcAb、HBeAg、HBsAg, 第三組為HBeAg、HBsAg, 第四組為HBcAb、HBsAg, 第五組為HBeAb、HBcAb、HBsAb, 第六組為HBcAb、HBeAb, 第七組為HBsAb以及全陰。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件對數據進行統(tǒng)計學處理, 以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義的基礎。

2 結果

128例患者血清學的診斷指標和HBV-DNA的陽性率以及定量檢測的結果情況, 詳見表1。

表1 患者血清學的診斷指標和HBV-DNA的陽性率以及定量檢測的結果情況［n (%)］

3 討論

近幾年, 發(fā)展了多種準確的、敏感的、先進的用于HBVDNA定量檢測的方法, 根據其原理主要有酶標記探針PCR技術和熒光標記探針的PCR技術。后者省時, 自動化的程度高, 而且可以免除PCR后處理的步驟, 減少了PCR產物對環(huán)境的污染, 現在已經成為了HBV-DNA定量檢測的主要方法。采用該方法對HBV-DNA進行定量檢測的范圍為3~8, 如果檢測的值比最低的檢測水平-3低, 將結果判斷為陰性。在進行數據統(tǒng)計時, 將陰性的結果忽略不計或者計算為0, 而求得HBV-DNA對數的平均值的計算結果, 這種方法是不合理的。如果要合理的反映不同類型的乙型肝炎病毒患者體內的HBV-DNA的含量, 應該采用中位數的差異H來進行HBVDNA的含量比較。

我國現在屬于乙型肝炎大國, 發(fā)病率在全世界排在前幾位。有研究表明, HBsAg的流行率大約為9.75%, 當人體感染了乙型肝炎病毒之后會出現不同的癥狀以及臨床表現。HBeAg呈陽性表示患者體內的乙型肝炎病毒在活躍的復制,表明其具有很強的傳染性［2］。HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的陽性率為98.6%, , HBeAg、HBsAg為100%, 說明本組患者的HBeAg陽性血清指標的模式組主要為第一組和第三組, 而且其HBV-DNA的陽性率以及HBV-DNA的定量都比其他各組要高, 說明HBeAg有可能與HBV-DNA的含量之間存在一定的正相關性［3］。HBcAb、HBeAg、HBsAg為25.2%, HBV-DNA 的對數的平均值為(5.03±1.86), HBcAb、HBsAg為20%, HBV-DNA 的對數的平均值為(6.28±0.48), 說明當e系統(tǒng)的抗原陰轉時, HBV-DNA還是有可能被檢測到,雖然其含量比第一組和第三組低。HBeAb、HBcAb、HBsAb為14.5%, HBV-DNA 的對數的平均值為(3.54±0.45), 說明HBsAb是一種保護性的抗體。

綜上所述, 各種類型的乙型肝炎患者都有一定程度HBV-DNA復制, HBeAg的陽性患者其HBV-DNA的水平最高, 將HBV-DNA和HBeAg定量聯(lián)合進行診斷, 可以為早期的乙型肝炎篩查以及治療提供可靠的依據。

［1］ 李金明.乙型肝炎病毒血清標志物測定及結果解釋的若干問題.中華檢驗醫(yī)學雜志, 2006,29(5):385.

［2］ 潘春燕.溶血對乙型肝炎病毒DNA 定量檢測的影響.左江醫(yī)學, 2008,36(1):53.

［3］ 劉勇.乙型肝炎病毒的檢測技術進展及臨床應用.中國實用內科雜志, 2007,27(3):236.

471600 河南省宜陽縣人民醫(yī)院檢驗科