武原霞

（天津市武清區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，天津 301700）

椰果樣品亞硝酸鹽的檢測(cè)

武原霞

（天津市武清區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，天津 301700）

摘 要：通過(guò)研究椰果樣品低濃度區(qū)亞硝酸鹽的檢測(cè)不準(zhǔn)確的問(wèn)題，科學(xué)分析造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確的原因，在大量試驗(yàn)積累的基礎(chǔ)上，建立新的檢測(cè)方法。在采用國(guó)標(biāo)檢測(cè)方法的同時(shí)調(diào)整樣品前處理方法，改變樣品的稀釋倍數(shù)，采用不同精度的分光光度計(jì)，并根據(jù)被分析樣品組分的濃度，減低標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值為0.999 7，曲線線性好。從而得出正確檢驗(yàn)結(jié)論。并通過(guò)不同實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行證實(shí)，證明此檢測(cè)方法靈敏度高，穩(wěn)定性好，可操作性強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：椰果；亞硝酸鹽；檢測(cè)

在椰果樣品亞硝酸鹽指標(biāo)檢測(cè)過(guò)程中，用GB5009.33-2010《食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定》分光光度法[1]進(jìn)行樣品處理，發(fā)現(xiàn)721型分光光度計(jì)低濃度區(qū)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不好，造成檢測(cè)結(jié)果在檢出限附近波動(dòng)，存在合格與不合格的差別。通過(guò)對(duì)椰果樣品的亞硝酸鹽值反復(fù)檢測(cè)，認(rèn)真分析，經(jīng)過(guò)大量的試驗(yàn)積累，建立如下檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 材料與方法

椰果樣品（市售）。

蛋白沉淀劑Ⅰ：亞鐵氰化鉀溶液（53 g/L），取亞鐵氰化鉀53.0 g,用水稀釋并定容至1 000 mL。

蛋白沉淀劑Ⅱ：乙酸鋅溶液（110 g/L），取乙酸鋅110.0 g,冰醋酸15 mL用水稀釋并定容至1 000 mL。

顯色劑Ⅰ：對(duì)氨基苯磺酸溶液（2 g/L）：稱取對(duì)氨基苯磺酸2.0 g，加水800 mL，于水浴上加熱溶解后，冷卻過(guò)濾，濾液徐徐加入鹽酸100 mL，并時(shí)時(shí)攪拌，再加水溶解使成1 000 mL。

顯色劑Ⅱ：鹽酸萘乙二胺溶液（1 g/L）：稱取0.2 g鹽酸萘乙二胺，用水稀釋并定容至200 mL。本試劑為現(xiàn)配現(xiàn)用，放入棕色瓶中，避光保存。

四硼酸鈉飽和液：稱取四硼酸鈉5 g，加水50 mL，微微加熱溶解后，冷卻至室溫，再加水定容至100 mL。

試驗(yàn)中所用試劑均為分析純，所用水為去離子水。

1.2 儀器與設(shè)備

BS224S電子天平：賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；TU1900紫外分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限公司；SJ204-230食品粉碎機(jī)：蘇泊爾公司；HS3120超聲波清洗器：天津恒奧科技有限公司。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 椰果樣品制備

將待測(cè)椰果樣品搖勻，將椰果（固液混合物）約200 g放入食品粉碎機(jī)中打碎，直至樣品呈細(xì)膩糊狀待用。因椰果樣品不含脂肪且含有低于1%蛋白質(zhì)，因此依次準(zhǔn)確稱取10 g、5 g、2.5 g、2 g樣品放入4個(gè)不同編號(hào)的100 mL比色管中，加入蛋白沉淀劑Ⅰ和蛋白沉淀劑Ⅱ各2 mL，四硼酸鈉飽和液4 mL，超聲均質(zhì)5 min，分別將樣品制成 1∶10、1∶20、1∶40、1∶50 4個(gè)不同稀釋度的樣品混合液，并定容到100 mL比色管中。用定量濾紙過(guò)濾，棄去最初濾液15 mL，其余濾液待用。

1.3.2 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及樣品測(cè)定

準(zhǔn)確稱取經(jīng)105℃～110℃干燥恒重的亞硝酸鈉約0.0100 g，加水溶解并定容至100 mL，其濃度相當(dāng)于100 mg/mL，作為標(biāo)準(zhǔn)原液，貯存于4℃。臨用時(shí)，取適量標(biāo)準(zhǔn)原液，分別用水稀釋至（0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.75、1.0、1.25 mg）/50 mL，同時(shí)取樣品濾液 40 mL，加入顯色劑Ⅰ4 mL，搖勻后靜置3 min～5 min，加入顯色劑Ⅱ2 mL，加水搖勻后定容50 mL，靜置15 min，于540 nm測(cè)定其吸光度。并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（見(jiàn)圖1低濃度區(qū)工作曲線）。合理選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線中標(biāo)液的濃度，標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值為0.999 7，曲線線性很好。說(shuō)明紫外分光光度計(jì)測(cè)亞硝酸鹽低濃度區(qū)線性好，檢測(cè)低濃度數(shù)值更準(zhǔn)確。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線，最后對(duì)可疑檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，得出的檢測(cè)結(jié)論是未檢出（檢出限≤1.0 mg/kg）。

圖1 低濃度區(qū)工作曲線Fig.1 The working curve of low concentration

2 結(jié)果分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線濃度和儀器精度對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響

椰果樣品的亞硝酸鹽含量很低或沒(méi)有，為保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，將標(biāo)準(zhǔn)曲線的中亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度降低了10倍。做出了標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1低濃度區(qū)工作曲線）。同時(shí)，我們?cè)O(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度是按常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度的1/10，這樣做的主要目的是使檢測(cè)儀器設(shè)備所設(shè)置的精度值更接近于樣品的濃度，有效地避免了大尺子量小物的情況。從而降低了儀器誤差。

同時(shí)用常規(guī)方法，用721型分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器廠）按GB5009.33-2010《食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定》分光光度法,將亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5 μg/50 mL，做出了圖 2 所示的標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖2常規(guī)濃度區(qū)工作曲線）。

圖2 常規(guī)濃度區(qū)工作曲線Fig.2 Conventional concentration curve

通過(guò)兩個(gè)圖的比較分析，不難看出圖2的標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值為0.987 7，而圖1的標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值為0.999 7，曲線的線性更好。通過(guò)認(rèn)真觀察，發(fā)現(xiàn)雖然圖2的標(biāo)準(zhǔn)溶液的整體曲線呈線性，但在低濃度區(qū)線性不好，而椰果樣品亞硝酸鹽吸光度值主要集中檢測(cè)低濃度區(qū)，用檢測(cè)儀器線性不好的區(qū)域去檢測(cè)樣品，這無(wú)疑增加了儀器的系統(tǒng)誤差，降低了檢測(cè)的準(zhǔn)確度。而上海生產(chǎn)的721型分光光度計(jì)屬于簡(jiǎn)易分光光度計(jì)，檢測(cè)器采用光電管，只適用于可見(jiàn)光區(qū)。而北京普析生產(chǎn)的TU1900紫外分光光度計(jì)儀器設(shè)備的檢測(cè)精度本身高于721型分光光度計(jì)，因此，在建試驗(yàn)方法時(shí)，選擇了精度高的TU1900紫外分光光度計(jì)。

2.2 椰果樣品前處理方法的合理選擇

1）考慮椰果樣品特性，無(wú)脂肪、低蛋白（蛋白含量<1%）的情況，將蛋白沉淀劑Ⅰ和蛋白沉淀劑Ⅱ濃度降低，用量減少，少加四硼酸鈉溶液。并經(jīng)5 min超聲波勻質(zhì)，使取樣更均勻。這是運(yùn)用了常規(guī)樣品處理中，達(dá)到樣品處理效果的前提下，盡量少加處理劑的原則。一方面可以減少多余試劑對(duì)試驗(yàn)的干擾，還可以節(jié)省試劑，降低檢測(cè)成本。

2）因椰果樣品特性，其樣品本身的亞硝酸鹽的值很低，只會(huì)出現(xiàn)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的低濃度區(qū)，按照GB5009.33-2010《食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定》分光光度法中11.2將椰果樣品稀釋了大約100倍[1]，樣品稀釋后，檢測(cè)結(jié)果大量出現(xiàn)在標(biāo)準(zhǔn)樣品的低濃度區(qū)檢出限臨界值范圍[2]，造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。為此，將前處理樣液濃度降低為 1∶10，1∶20、1∶40、1∶50 4個(gè)濃度。以減少檢測(cè)誤差。

3）檢測(cè)用吸光度波長(zhǎng)540 nm測(cè)定其吸光度。

2.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

為了證實(shí)我們上述檢測(cè)，用離子色譜法做證實(shí)性實(shí)驗(yàn)。依GB5009.33-2010《食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定》(離子色譜法)測(cè)亞硝酸鹽，標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值為0.999 0，曲線線性很好，通過(guò)標(biāo)樣標(biāo)準(zhǔn)曲線，最后對(duì)椰果可疑檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，得出的檢測(cè)結(jié)論是未檢出（檢出限≤0.2 mg/kg）。

3 結(jié)論

對(duì)于椰果這種無(wú)脂肪、低蛋白的樣品，其亞硝酸鹽檢測(cè)值主要集中在標(biāo)準(zhǔn)曲線的低濃度區(qū)，不能按常規(guī)的樣品處理方式。應(yīng)降低處理液的用量，改變檢測(cè)吸光度值，降低亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度，將樣液濃度降低為 1∶10、1∶20、1∶40、1∶50 4 個(gè)濃度。通過(guò)反復(fù)試驗(yàn)，證明該檢測(cè)方法靈敏度高，穩(wěn)定性好，可操作性強(qiáng)，得到更精準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果。

對(duì)于任何一種檢測(cè)方法，對(duì)于不同產(chǎn)品、不同精度的檢測(cè)設(shè)備，視具體情況具體分析，靈活運(yùn)用，才能得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。

：

[1]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.GB5009.33-2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定 [S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2010:1－9

[2]牟建平,章海平.榨菜中亞硝酸鹽測(cè)定的不確定度分析[J].職業(yè)與健康,2008,24(1):28－30

Detection of Nitrite from Nata de Coco Sample

WU Yuan-xia
（Tianjin Products Quality Supervision and Inspection Institute，Tianjin 301700，China）

Abstract：The reason why the testing of nitrite at low concentrations from Nata de coco is inaccurate will be scientifically analyzed.Based on numerous tests,new detection methods are established.Through using method at national standard as well as adjusting sample preparation method,changing dilution degree of the sample,and adopting spectrophotometers at different precision,standard curve is reduced to a well degree of linearity with R2value of 0.999 7 according to samples and finally the correct conclusions can be drawn.This testing method is proved to have high sensitivity,good stability and strong operability.

Key words：Nata de coco；nitrite；detection

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.14.028

武原霞（1972—），女（漢），工程師，大學(xué)本科，研究方向：食品檢測(cè)和食品安全。

2013-03-03