黨阿麗，張丕奇，王佳龍，陳立娟，于麗萍，張恩波，張介馳*

(1.黑龍江省科學(xué)院微生物研究所，哈爾濱150010;2.黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院，哈爾濱150001)

黑木耳栽培需要大量消耗木屑資源，代用原料替代技術(shù)可解決生產(chǎn)中“菌林”矛盾，同時(shí)能降低生產(chǎn)成本。但是以農(nóng)作物秸稈等為主要原料時(shí)，能量消耗快，添加油脂等高能物質(zhì)可以大大改善這一問(wèn)題［1］。在配制培養(yǎng)基時(shí)，適當(dāng)增加含油的精料，對(duì)菌絲生長(zhǎng)和發(fā)育是有利的［2］;油脂拌料栽培食用菌產(chǎn)量高、品質(zhì)好［3］。上述研究皆為油脂關(guān)于蘑菇栽培的應(yīng)用，而豆油油脂乳化對(duì)黑木耳菌絲生長(zhǎng)的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)為黑木耳產(chǎn)業(yè)的持續(xù)發(fā)展提供基礎(chǔ)?，F(xiàn)報(bào)告如下:

1 材料與方法

1.1 供試菌種

黑29黑木耳菌株由黑龍江省科學(xué)院微生物研究所食用菌研究室提供。

1.2 菌種培養(yǎng)基

1.2.1 斜面母種培養(yǎng)基:cPDA培養(yǎng)基。

1.2.2 平板菌種培養(yǎng)基:cPDA培養(yǎng)基。

1.2.3 試驗(yàn)所用培養(yǎng)基:

0 號(hào)培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基):cPDA培養(yǎng)基。(對(duì)照)

1 ～6 號(hào)培養(yǎng)基分別為含豆油油脂濃度為1.0%、1.5%、2.0%、3.0%、4.0%、5.0%的 cPDA 培養(yǎng)基。

每一組做5個(gè)重復(fù)。

1 ～6 號(hào)培養(yǎng)基中所添加的豆油需預(yù)先乳化。具體方法:按豆油重量的8%，加入復(fù)配乳化劑(單甘酯︰蔗糖酯=1︰2.2，W︰W)，60℃水浴使之完全熔化，用小型電動(dòng)攪拌器高速攪拌使其乳化，然后按試驗(yàn)設(shè)計(jì)所需豆油乳狀液的量分別添加到60℃的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中制成不同豆油油脂濃度的培養(yǎng)基，最后高壓滅菌制成平板備用。

試驗(yàn)所用平板采用φ9 cm的培養(yǎng)皿，培養(yǎng)基裝量為25 g/皿。

1.3 接種和培養(yǎng)

從斜面母種中取適宜大小的菌種塊，接種于平板培養(yǎng)基中，倒置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20 d。用φ0.5 cm自制接菌環(huán)沿同心圓取菌種塊分別接種于試驗(yàn)所用培養(yǎng)基平板中央，然后將平板倒置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.4 測(cè)定方法

定期觀測(cè)菌絲體的生長(zhǎng)情況，記錄菌絲長(zhǎng)勢(shì)和生長(zhǎng)直徑，計(jì)算菌絲日生長(zhǎng)距離，通過(guò)對(duì)菌絲日生長(zhǎng)距離數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析來(lái)判斷其是否有顯著性差異。

鏡檢觀察菌絲形態(tài)和分枝情況。

2 結(jié)果與分析

觀測(cè)黑木耳菌絲在不同豆油油脂濃度的培養(yǎng)基上長(zhǎng)勢(shì)和生長(zhǎng)直徑以及由此計(jì)算所得的菌絲日生長(zhǎng)距離，見(jiàn)表1。

表1 黑木耳菌絲的長(zhǎng)勢(shì)、生長(zhǎng)直徑和日生長(zhǎng)距離Tab.1 Growth situation，growth diameter and the growth rate of Auricularia auricula mycelium

黑木耳菌絲在不同豆油油脂濃度的培養(yǎng)基上培養(yǎng)10 d生長(zhǎng)狀況如圖1所示，圖中所標(biāo)示的0號(hào)代表對(duì)照組，1～6號(hào)分別代表含豆油油脂濃度為 1.0%、1.5%、2.0%、3.0%、4.0%、5.0%的實(shí)驗(yàn)組。

根據(jù)在不同濃度豆油油脂乳化添加固化培養(yǎng)基試驗(yàn)處理中測(cè)量并計(jì)算所得25℃平板培養(yǎng)菌絲日生長(zhǎng)距離，比較各處理菌絲日生長(zhǎng)距離的差異顯著性，見(jiàn)表2。

表2 試驗(yàn)處理中黑木耳菌絲日生長(zhǎng)距離單因素方差分析結(jié)果Tab.2 The one-way ANOVA result of the growth rate of Auricularia auricular mycelium

*只選擇對(duì)照與各濃度之間的水平比較，而其他各濃度之間的水平比較結(jié)果皆為無(wú)顯著差異。

圖1 黑木耳菌絲在不同豆油油脂濃度的培養(yǎng)基上培養(yǎng)10d生長(zhǎng)狀況Fig.1 The growth situation of Auricularia auricular mycelium cultured in different concentrations of soybean oil medium for 10days

培養(yǎng)18 d鏡檢觀察菌絲形態(tài)和分枝情況如圖2所示。

由表1和圖1可知，黑木耳菌絲在1.5%、2.0%和3.0%豆油油脂濃度的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)速度較快，即豆油油脂濃度為1.5%、2.0%和3.0%時(shí)，對(duì)菌絲生長(zhǎng)的促進(jìn)作用較大。

由表2菌絲日生長(zhǎng)距離單因素方差分析結(jié)果F=5.14 ＞ F0.05=Fcrit=2.45可知，不同豆油油脂濃度處理間差異顯著，從水平比較結(jié)果中可知，菌絲日生長(zhǎng)距離在1.5%、2.0%和3.0%豆油油脂濃度培養(yǎng)基上與對(duì)照培養(yǎng)基上差異顯著，該試驗(yàn)濃度的油脂對(duì)黑木耳菌絲生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。而在1.0%、4.0%和5.0%豆油油脂濃度的培養(yǎng)基上與對(duì)照培養(yǎng)基上日生長(zhǎng)距離無(wú)顯著差異，菌絲在對(duì)照培養(yǎng)基上日生長(zhǎng)距離最慢。

圖2 培養(yǎng)18 d鏡檢菌絲形態(tài)與分枝情況Fig.2 The morphology and branch of Auricularia auricular mycelium cultured for 18 days

由圖2可以看出，添加了豆油油脂的培養(yǎng)基中的菌絲分枝較多。尤其是2號(hào)、3號(hào)和4號(hào)即1.5%、2.0%和3.0%豆油油脂濃度的培養(yǎng)基中的菌絲分枝較為致密。

3 討論

本試驗(yàn)采用平板培養(yǎng)法觀察豆油油脂乳化對(duì)黑木耳菌絲生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明，1.5%、2.0%和3.0%試驗(yàn)濃度的乳化豆油油脂對(duì)黑木耳菌絲生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。從生產(chǎn)成本和菌絲生長(zhǎng)速度等綜合因素考慮，本試驗(yàn)條件下1.5%豆油油脂濃度為最佳。

據(jù)報(bào)道，添加烏桕籽后香菇和平菇子實(shí)體的不飽和脂肪酸含量分別增加了3.32%和9.35%。添加大豆產(chǎn)品對(duì)兩種平菇的產(chǎn)量和化學(xué)成分都有影響，使其子實(shí)體蛋白質(zhì)含量提高，氨基酸含量和組分發(fā)生變化［4］。由此推測(cè):營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高、脂肪酸構(gòu)成較好的豆油中所富含的對(duì)人體有功效的亞油酸等不飽和脂肪酸能否會(huì)向黑木耳子實(shí)體中轉(zhuǎn)移而使黑木耳產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)成分發(fā)生變化，這有待于進(jìn)一步探討。

［1］黃孝新.油脂拌料栽培食用菌產(chǎn)量高［J］.中國(guó)食用菌，1999，18(3):41—42.

［2］趙明亮.油與香菇菌絲生長(zhǎng)的關(guān)系［J］.食用菌，1987，(06):26—27.

［3］邱水.油脂拌料栽培食用菌產(chǎn)量高［J］.北京農(nóng)業(yè)，1995，(11):17.

［4］羅信昌.第十二屆國(guó)際食用菌科學(xué)與栽培會(huì)議簡(jiǎn)介［J］.真菌學(xué)報(bào)，1988，7(2):125—128.