劉福青

(濱州職業(yè)學(xué)院，山東濱州 256603)

黨參合劑是由黨參、山茱萸、肉沙棘等補(bǔ)氣和活血化瘀中藥組成的復(fù)方制劑。現(xiàn)有研究已證實(shí)，其具有增強(qiáng)運(yùn)動耐力，提高運(yùn)動成績，促進(jìn)機(jī)體的代謝，抗運(yùn)動性疲勞等作用［1］。本研究重點(diǎn)觀察其體內(nèi)外抗血栓形成作用，對血液流變學(xué)以及急性心肌梗塞的影響。為心腦血管疾病患者提供有效地預(yù)防保健和康復(fù)治療藥物。

1 材料與方法

1.1 動物 健康SD大鼠，雄性，清潔級，血栓及血液流變學(xué)指標(biāo)研究選用體質(zhì)量240～260 g，急性心肌梗塞模型選用180～200 g。由濱州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。

1.2 儀器與藥物 BT87—3型實(shí)驗(yàn)性體內(nèi)血栓形成測定儀，包頭市昆侖生物化學(xué)技術(shù)應(yīng)用研究所;SDZ—A型體外血栓形成儀，江蘇無錫電子儀器二廠;血液黏度測定儀，LG—R—20型，北京世帝科學(xué)儀器公司產(chǎn)品;注射用賴氨匹林，海南國瑞堂制藥有限公司，批號:20101112;鹽酸地爾硫卓注射液，天津田邊制藥有限公司，批號:20105016;硝基四氮唑藍(lán) (N-BT)，購濱州藥材站，批號:981120。黨參合劑按口服合劑的制劑工藝，制備口服液，每1 mL含生藥3 g，為深褐色，置冰箱0℃保存。

1.3 對大鼠體內(nèi)血栓形成的影響 將60只健康大鼠隨機(jī)分為5組，每組12只。對照組 (0.9 g/10 g)、賴氨匹林組 (0.9 g/10 g)、黨參合劑高劑量組 (1.0 g/10 g)、 中劑量組 (0.6 g/10 g)、低劑量組 (0.3 g/10 g)，連續(xù)灌胃給藥7 d，每天分兩次灌胃。賴氨匹林組尾靜脈給藥，每天一次，連續(xù)7 d。末次給藥120 min后，戊巴比妥鈉麻醉，采用電刺激頸總動脈血栓形成法［2-3］，刺激時(shí)間為7 min。從刺激開始到報(bào)警的時(shí)間為血栓形成時(shí)間。并計(jì)算各給藥組血栓形成時(shí)間延長率 (%)為［(給藥組血栓形成時(shí)間－對照組血栓形成時(shí)間)/對照組血栓形成時(shí)間］×100%。

1.4 對正常大鼠體外血栓形成的影響 實(shí)驗(yàn)分組、給藥量與方法同1.3項(xiàng)下。末次給藥120 min，腹主動脈取血。按照Chandler體外法［2］，測量長度，稱濕質(zhì)量后，再將血栓條置入烘箱80℃恒溫烘烤3 h后，稱其血栓干質(zhì)量［4-5］。

1.5 對血液黏度和血漿黏度的影響 實(shí)驗(yàn)分組、給藥劑量與方法同1.3項(xiàng)下。末次給藥120 min，各鼠腹主動脈取血3 mL(1 250 U/mL肝素取50 μL抗凝)，取0.8 mL用于血液黏度測定，剩余血液離心10 min，取上清0.8 mL用于血漿黏度測定［5-6］。

1.6 對大鼠急性心肌梗塞造模方法 大鼠以3.5%水合氯醛8 mL/kg麻醉，與4、5肋間切口，撕開心包，輕壓胸廓，將心臟暴露于胸外，結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支根部，關(guān)閉切口，縫合皮膚，局部用青霉素G預(yù)防感染。結(jié)扎后大鼠的存活率約為 50%［7］。

1.7 對大鼠急性心肌梗塞的分組及觀測指標(biāo) 將大鼠分為模型對照組，地爾硫卓組，黨參合劑高、中、低劑量組，劑量同1.3項(xiàng)下。灌胃給藥，對照組用等容量生理鹽水，地爾硫卓尾靜脈注射給藥，于結(jié)扎冠狀動脈30 min后，一次性給藥。心肌梗塞范圍測定 (N-BT染色法)，大鼠造模后24 h處死，立即取出心臟，生理鹽水清洗，濾紙吸去水分，稱質(zhì)量。在結(jié)扎線以下至心尖切成厚薄一致的5片，分別稱定質(zhì)量，置0.1%硝基四氮唑藍(lán) (NBT)中常溫避光染色2 min，多媒體彩色病理圖像分析系統(tǒng)測量切片面積與心肌梗塞面積 (N-BT非染色區(qū))，計(jì)算心肌梗塞面積/心室面積百分比 (%)。

2 結(jié)果

2.1 對血栓形成的影響 與對照組相比，賴氨匹林組、高、中、低劑量組血栓形成時(shí)間延長率分別為59.58%、46.73%、35.35%、10.22%。見表1。

表1 黨參合劑對大鼠體內(nèi)血栓形成時(shí)間的影響 (n=12，±s)Tab.1 Dangshen Mixture on rats thrombus formation in vivo effect of time(n=12，±s)

表1 黨參合劑對大鼠體內(nèi)血栓形成時(shí)間的影響 (n=12，±s)Tab.1 Dangshen Mixture on rats thrombus formation in vivo effect of time(n=12，±s)

注:與對照組比較，＊＊P ＜0.01，*P ＜0.05。

組 別 血栓形成時(shí)間/s 延長率/%對照組643.10±210.35賴氨匹林組 1 026.30±234.16＊＊ 59.58黨參合劑高劑量組 943.58±127.05* 46.73黨參合劑中劑量組 870.46±230.06 35.35黨參合劑低劑量組708.87±197.43 10.22

2.2 對大鼠體外血栓形成的影響 與對照組相比，黨參合劑高、中劑量組可降低體外血栓長度、濕質(zhì)量和干質(zhì)量 (P＜0.05)，賴氨匹林可降低血栓濕質(zhì)量和干質(zhì)量 (P＜0.05)，見表2。

表2 黨參合劑對體外血栓形成的影響 (n=12，±s)Tab.2 Dangshen Mixture on thrombus formation in vitro effects(n=12，±s)

表2 黨參合劑對體外血栓形成的影響 (n=12，±s)Tab.2 Dangshen Mixture on thrombus formation in vitro effects(n=12，±s)

注:與對照組比較，*P＜0.05，＊＊P ＜0.01。

組 別 長度/mm 濕質(zhì)量/mg 干質(zhì)量/mg對照組26.40±3.11 124.38±19.96 27.63±4.03賴氨匹林組 23.31±4.30 102.01±26.73* 22.88±5.16*黨參合劑高劑量組 22.03±2.63＊＊ 92.70±23.11＊＊ 20.97±5.61＊＊黨參合劑中劑量組 25.22±3.61 117.03±27.06 24.99±6.53黨參合劑低劑量組26.10±3.89 119.88±23.54 26.45±3.88

2.3 對大鼠血液流變學(xué)的影響 各組與對照組相比，均可降低高、中、低切全血黏度和血漿黏度(P＜0.01)，見表3。

表3 黨參合劑對大鼠血液流變學(xué)的影響 (mPa·s，±s，n=12)Tab.3 Dangshen Mixture on rat blood rheology(mPa·s，±s，n=12)

表3 黨參合劑對大鼠血液流變學(xué)的影響 (mPa·s，±s，n=12)Tab.3 Dangshen Mixture on rat blood rheology(mPa·s，±s，n=12)

注:與對照組比較，＊＊P ＜0.01，*P ＜0.05。

血漿黏度對照組組 別全血黏度高切 中切 低切4.28±0.16 5.98±0.36 10.96±1.01 1.10±0.02賴氨匹林組 3.78±0.43* 4.72±0.51* 7.99±0.88* 1.06±0.01＊＊黨參合劑高劑量組 3.69±0.51* 4.58±0.55* 7.91±1.33* 1.06±0.02＊＊黨參合劑中劑量組 4.11±0.48 5.46±0.67 9.19±1.18* 1.07±0.03＊＊黨參合劑低劑量組 4.18±0.51 5.37±0.58 9.70±1.88 1.07±0.02＊＊

2.4 對大鼠心肌梗塞范圍的影響 模型對照組心肌梗塞范圍分別占全心和心室的 (48.33±5.06)%、(57.80±7.44)%，與模型對照組比較，地爾硫卓組和黨參合劑高劑量組有顯著性差異，P＜0.05，見表4。

表4 黨參合劑對大鼠心肌梗塞面積的影響 (%，x ± s，n=12)Tab.4 Dangshen Mixture on rats myocardial infarctionarea effect(%，±s，n=12)

表4 黨參合劑對大鼠心肌梗塞面積的影響 (%，x ± s，n=12)Tab.4 Dangshen Mixture on rats myocardial infarctionarea effect(%，±s，n=12)

注:與模型對照組比較，*P＜0.05。

組 別 (梗塞區(qū)/心臟) (梗塞區(qū)/心室)模型對照組48.33±5.06 57.80±7.44地爾硫卓組 40.35±5.87* 49.22±5.53*黨參合劑高劑量組 41.27±7.44* 50.01±9.86*黨參合劑中劑量組 46.81±8.06 56.71±7.03黨參合劑低劑量組47.88±7.92 56.97±6.89

3 討論

血小板聚集性增高可致血液流變學(xué)的異常，是心腦血管疾病發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ)，是缺血性心腦血管疾病發(fā)病機(jī)制中常發(fā)生的病理變化過程。抑制血小板聚集，以改變血液流變學(xué)狀態(tài)，是防治此類疾病的關(guān)鍵措施。已經(jīng)研究證明，黨參具有抑制血小板聚集，抑制血栓形成，對抗由羊水導(dǎo)致的微循環(huán)障礙，改善微循環(huán)，同時(shí)也可改善心肌缺血，對抗由垂體后葉素誘發(fā)的大鼠心肌缺血性心電圖改變，上調(diào)抗氧化酶表達(dá)，對抗氧自由基損傷，降低血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇，提高NO和高密度脂蛋白膽固醇水平。改善缺血再灌注腦細(xì)胞能量代謝，呈現(xiàn)腦保護(hù)等作用［8-10］;山茱萸具有抗血小板聚集，降低血液黏度，降血脂等作用［11］。沙棘也具有降低膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇，顯著抑制血栓形成及抗氧化作用［12］。本實(shí)驗(yàn)對黨參合劑的研究證明，可抑制體外血栓形成，降低血栓濕質(zhì)量和干質(zhì)量，延長體內(nèi)血栓形成時(shí)間，降低全血及血漿黏度，大劑量時(shí)顯著降低心肌梗塞的面積，為臨床缺血性心腦血管疾病的預(yù)防和治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，綜合研究的結(jié)果顯示，黨參合劑有希望成為一個(gè)理想的缺血性心腦血管疾病康復(fù)治療的藥物。

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