楊清嶺,李寶花,榮光影,王志群,趙

(1.佳木斯大學(xué)附屬第二醫(yī)院,黑龍江 佳木斯 154002;2.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 佳木斯 154003;3.佳木斯大學(xué)醫(yī)院管理處,黑龍江佳木斯 154007)

羥基磷灰石(Hydroxylapatite,HAP)其化學(xué)成份與生物組織如牙齒的無(wú)機(jī)成份相似,具有好的生物相容性已被廣泛用于植骨和蓋髓研究[1～4]。但是在細(xì)菌感染存在時(shí),使用此材料蓋髓是無(wú)效的。甲硝唑 Metronidazole于1978年被 W HO確定為抗厭氧感染的首選藥。本實(shí)驗(yàn)以納米羥基磷灰石復(fù)合甲硝唑糊劑(nHM),納米羥基磷灰石 /聚酰胺66甲硝唑糊(nHPM)作為蓋髓劑,氫氧化鈣(CH)作為對(duì)照材料,對(duì)比兩種羥基磷灰石促牙本質(zhì)橋形成方面的差異,為臨床篩選理想的蓋髓劑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要材料

納米羥磷灰石 (nHA)和納米羥磷灰石 /聚酰胺66(nHA/PA66)購(gòu)自四川國(guó)納科技有限公司 。甲硝唑注射液(上海華源長(zhǎng)富藥業(yè)有限公司),氫氧化鈣和玻璃離子(上海齒科材料廠 )。nHA和 nHA/PA66均為粉未型 ,蓋髓時(shí)分別用甲硝唑注射液調(diào)濕呈糊狀 nHM和 nHPM。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組

雜種雄性犬 4只,隨機(jī)分兩組,體重15～ 18kg,牙齒完好無(wú)缺損,每組內(nèi)依次編號(hào)選取 75顆牙齒用作實(shí)驗(yàn)牙。將75顆實(shí)驗(yàn)牙隨機(jī)分為三組,分別用 nHAM,nHAPM和 CH蓋髓,各組25顆牙。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)狗用速眠新 0.1mL/kg肌注麻醉后,在實(shí)驗(yàn)牙的唇面或頰面?zhèn)?V類洞,穿髓孔直徑約 0.5～1mm。無(wú)菌生理鹽水沖洗止血,分別用 nHM,nHPM、CH蓋髓。玻璃離子充填。術(shù)后7d和70d時(shí)處死動(dòng)物,取出上下頜骨,拔出實(shí)驗(yàn)牙。固定,脫鈣,常規(guī)包埋切片,HE染色,光鏡下觀察各組蓋髓后穿髓處修復(fù)性牙本質(zhì)的形成[5]。

1.4 參照標(biāo)準(zhǔn)

分級(jí)參照 Josimeri Hebling[6]標(biāo)準(zhǔn):0:無(wú)硬組織形成;1:少量的硬組織沉積在露髓面;2:中等量的硬組織沉積在露髓面;3:大量的硬沉積或形成完整的牙本質(zhì)橋。

2 結(jié)果

術(shù)后7d,各組均未見(jiàn)修復(fù)性牙本質(zhì)橋的形成。術(shù)后70d nHM組25例其中無(wú)硬組織形成的有 9例,16例有少量或中等量的硬組織沉積在露髓面,術(shù)中無(wú)1例出現(xiàn)大量的硬沉積在露髓面或形成完整的牙本質(zhì)橋。穿髓處牙髓組織內(nèi)有或多或少的修復(fù)性牙本質(zhì)團(tuán)塊。蓋髓70d時(shí),nHPM組25例其中無(wú)硬組織形成的有5例,11例有少量或中等量的硬組織沉積在露髓面,9例出現(xiàn)大量的硬沉積在露髓面或形成完整的牙本質(zhì)橋,有一小部分牙有完整的牙本質(zhì)橋形成,其余實(shí)驗(yàn)牙能見(jiàn)到牙本質(zhì)橋從缺損側(cè)形成。

蓋髓后 70d時(shí),CH組25例中無(wú)硬組織形成的有3例,9例有少量或中等量的硬組織沉積在露髓面,13例出現(xiàn)大量的硬沉積在露髓面或形成完整的牙本質(zhì)橋,術(shù)后70d大部分牙齒有完整的牙本質(zhì)橋形成,但距牙本質(zhì)橋較遠(yuǎn)處的根部牙髓組織中可見(jiàn)少量的較小的修復(fù)性牙本質(zhì)團(tuán)塊。

表1 3種材料蓋髓后修復(fù)性牙本質(zhì)形成分級(jí)(n=25)

3 討論

Tziafas等[7]提出形成修復(fù)性牙本質(zhì)需要有適宜于牙髓細(xì)胞附著的平面。光鏡下觀察蓋髓7d時(shí),三組蓋髓材料均無(wú)明顯的礦化基質(zhì)出現(xiàn)。蓋髓70d時(shí),對(duì)照材料由于本身的強(qiáng)堿性和較強(qiáng)的細(xì)胞毒性在與牙髓組織接觸時(shí)出現(xiàn)鈣化,產(chǎn)生持續(xù)性炎癥,甚至牙髓壞死進(jìn)而導(dǎo)致術(shù)中蓋髓失敗。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析比較 nHM組與 CH組,nHM誘導(dǎo)修復(fù)性牙本質(zhì)形成的能力較 CH差 (P＜0.05),這可能與納米羥基磷灰石材料脆性大,耐沖擊強(qiáng)度低的缺點(diǎn)有關(guān)。在直接蓋髓術(shù)中用做蓋髓材料時(shí)臨床操作不便、無(wú)抗壓能力、松散易移位等各種因素導(dǎo)致與下方的牙髓組織脫離接觸或者是材料本身流失。

而經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 nHPM與 CH比較,nHPM誘導(dǎo)修復(fù)性牙本質(zhì)形成的能力與 CH無(wú)顯著差異 (P＞ 0.05),蘇勤等[8]報(bào)道的納米羥基磷灰石 /聚酰胺66雖然具備了蓋髓材料較好的生物相容性要求,但是促進(jìn)修復(fù)性牙本質(zhì)形成的能力不如氫氧化鈣有效。分析其與本實(shí)驗(yàn)的區(qū)別可能在于實(shí)驗(yàn)中加入了抗菌藥物甲硝唑,細(xì)菌感染被認(rèn)為是影響療效的主要因素,細(xì)菌感染性炎癥存在時(shí)明顯影響牙髓修復(fù)能力,所以本實(shí)驗(yàn)在羥基磷灰石中加人甲硝唑成份以增強(qiáng)療效。即使在細(xì)菌感染存在時(shí)并不影響納米羥基磷灰石 /聚酰胺66促修復(fù)性牙本質(zhì)形成的能力,且蓋髓劑中加入抗菌消炎藥物并不影響露髓處的創(chuàng)傷修復(fù)。納米羥基磷灰石 /聚酰胺66是由納米級(jí)羥基磷灰石微晶體與聚酰胺66復(fù)合而成,PA66與 nHA之間的氫鍵作用主要發(fā)生在 PA的仲氨基和 nHA的羥基之間,具有較好的機(jī)械力和穩(wěn)定的界面,該平面有利于牙髓細(xì)胞的分化附著。另一方面,其有機(jī)物和無(wú)機(jī)物的組成比例及力學(xué)性能與牙本質(zhì)相似,較好的機(jī)械力學(xué)性能使納米羥基磷灰石/聚酰胺具有一定的抗壓強(qiáng)度。而 CH抗壓強(qiáng)度不足,蓋髓材料與牙本質(zhì)間的裂隙成為細(xì)菌感染牙髓的通道,最終導(dǎo)致蓋髓的失敗。蘇勤等[9]證實(shí) nHA/PA 66作為蓋髓劑較 Dycal與牙髓界面的微滲漏更小。充填物的邊緣微滲漏有可能是遠(yuǎn)期失敗的原因之一。使得隨著時(shí)間的延長(zhǎng) nHPM誘導(dǎo)修復(fù)性牙本質(zhì)形成的能力與 CH無(wú)顯著差異。nHM與 nHPM,兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05),而實(shí)驗(yàn)組促修復(fù)性牙本質(zhì)形成的能力主要來(lái)自羥磷灰石,所以納米羥基磷灰石/聚酰胺66誘導(dǎo)修復(fù)性牙本質(zhì)形成的能力強(qiáng)于納米羥基磷灰石。

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