葛 曼 唐虹 傅金榮

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華臨床醫(yī)學(xué)院·200032)

子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，EMs）是育齡婦女常見的疑難病，發(fā)病率高達(dá)10%～15%[1]，其中痛經(jīng)及慢性盆腔發(fā)病率為20%～90%[2]，常表現(xiàn)為進(jìn)行性加重的下腹疼痛，或性交痛及肛門墜痛。目前可采用傳統(tǒng)藥物或手術(shù)治療以減輕內(nèi)異癥患者的疼痛癥狀，但存在手術(shù)費(fèi)用昂貴、藥物副作用大，且容易復(fù)發(fā)等問題，總療效不理想。導(dǎo)師付金榮主任醫(yī)師通過臨床觀察，認(rèn)為“濕、熱、瘀”是導(dǎo)致內(nèi)異癥疼痛纏綿難愈的主要病機(jī)[3]，采用“清熱利濕止痛”法，自擬“盆痛靈”，經(jīng)直腸給藥治療內(nèi)異癥盆腔痛，取得較好近期臨床療效[4]。遠(yuǎn)期療效尚難肯定，隨著臨床觀察，根據(jù)中醫(yī)理論“久病入絡(luò)”、“久痛入絡(luò)，唯風(fēng)藥可至”，故在原方基礎(chǔ)上加白芷等，可提高臨床遠(yuǎn)期療效。本研究比較觀察盆痛靈及加味盆痛靈方的鎮(zhèn)痛作用，為中藥治療EMs 疼痛提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動物

雌性昆明種小鼠，體重（18±2）g，清潔級，由上海中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證書編號：2007000537089。實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，普通飼料，自由飲水。

1.2 藥物

受試藥物：盆痛靈（由三棱、莪術(shù)、虎杖等組成，龍華醫(yī)院中藥房提供），加味盆痛靈（原方加白芷等，龍華醫(yī)院中藥房提供）；陽性對照西藥：孕三烯酮（北京紫竹藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，2.5mg/粒，批號：5311003552），消炎痛（上海信誼黃河制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：0.1g/粒，批號：120101）。

1.3 儀器和試劑

YLS-6B 智能熱板儀（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站制造，編號：上海中醫(yī)藥大學(xué)20060506）；冰醋酸（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：F20061101）；0.9%氯化鈉注射液（上海長征富民金山制藥有限公司，批號：11062003）；電子天平；恒溫水浴鍋；秒表。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 給藥方法

盆痛靈組：成人每日用量0.9g 生藥/kg，實(shí)驗(yàn)用量按成人每日用量20 倍擴(kuò)大后，直腸給藥濃度為1.8g/ml 的藥液，0.1ml/10g。加味盆痛靈：成人每日用量1.2g 生藥/kg，實(shí)驗(yàn)用量按成人每日用量20 倍擴(kuò)大后，直腸給藥濃度為1.8g/ml的藥液，0.1ml/10g。孕三烯酮：根據(jù)臨床用量的體重計算，按0.15mg/kg 配置成懸濁液每日灌腸0.1ml/10g,連續(xù)7d。消炎痛：根據(jù)臨床用量的體重計算，按0.5mg/kg 配置成懸濁液灌腸0.1ml/10g，連續(xù)7d。空白組：灌腸等容積生理鹽水。

2.2 熱板實(shí)驗(yàn)[5]

選用18±2g 雌性昆明種小鼠若干只，將小鼠置于YLS-6B智能熱板儀（55±2℃）上，記錄小鼠自接觸熱板至第一次舔后足的時間（痛閾值）。每只小鼠測兩次，間隔10min，計算平均痛閾值（剔除痛閾值大于5s、小于30s 的小鼠）。選出50 只合格的小鼠，以基礎(chǔ)痛閾值的大小排序隨機(jī)分為5 組：空白對照組、盆痛靈組、加味盆痛靈組、孕三烯酮組、消炎痛組，每組10 只并標(biāo)記號。各組每天按0.1ml/10g 體重容積灌腸給藥，連續(xù)7d，末次給藥后5、15、25、35、45、60、90min 再按熱板法測定各鼠的痛閾值（若小鼠60s 仍無痛覺反應(yīng)，則停止測試而按60s 計算）。

2.3 扭體實(shí)驗(yàn)[5]

選用18±2g 雌性昆明種小鼠50 只，隨機(jī)分為5 組：空白對照組、盆痛靈組、加味盆痛靈組、孕三烯酮組、消炎痛組。各組每天按0.1ml/10g 體重容積灌腸給藥，連續(xù)7d，末次給藥20min 后，給小鼠腹腔注射0.8%醋酸0.1ml/10g 致痛，并立即觀察記錄15min 內(nèi)小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，并計算藥物的疼痛抑制率：疼痛抑制率=[（空白組扭體均數(shù)-給藥組扭體均數(shù)）/空白組扭體均數(shù)]×100%

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 盆痛靈加味盆痛靈對小鼠熱板法致痛的影響

與給藥前的痛閾值相比，各給藥組均能顯著提高小鼠的痛閾值，其鎮(zhèn)痛作用時效分別為：加味盆痛靈組在給藥后45min，盆痛靈組在給藥后60min，消炎痛組和孕三烯酮組在給藥后90min。與空白對照組比較，加味盆痛靈組在給藥后15,25min 提高小鼠痛閾值（P ＜0.05），給藥后35,45,60,90min 能顯著提高小鼠痛閾值（P ＜0.01）；盆痛靈組在給藥后60min 提高小鼠痛閾值（P ＜0.05）。表明盆痛靈及加味盆痛靈均有一定的鎮(zhèn)痛作用，加味盆痛靈鎮(zhèn)痛效果略有優(yōu)勢。結(jié)果見表1。痛入絡(luò)，唯風(fēng)藥可至”學(xué)說，在原方基礎(chǔ)上加白芷可提高遠(yuǎn)期療效，中藥白芷具有祛風(fēng)止痛作用，聶氏等[7]從小鼠扭體法、熱板法、輻射熱刺激法、大鼠甩尾法觀察到白芷揮發(fā)油的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜作用。

本實(shí)驗(yàn)采用鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)常用的小鼠熱板法和扭體法比較觀察盆痛靈鎮(zhèn)痛效果。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，盆痛靈和加味盆痛靈能提高小鼠痛閾、減少醋酸所致小鼠15min 內(nèi)的扭體次數(shù)，但加味盆痛靈療效略有優(yōu)勢（P ＜0.01），表明加味盆痛靈有很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用，可能跟加味祛風(fēng)通絡(luò)之品確能增強(qiáng)其止痛功效有關(guān)。孕三烯酮組和消炎痛組在扭體實(shí)驗(yàn)中能顯著減少小鼠的扭體次數(shù)，而在熱板實(shí)驗(yàn)中與空白對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。由于熱板法反映藥物的中樞鎮(zhèn)痛作用，扭體法反映外周致痛程度[9]，西藥對照組的兩個實(shí)驗(yàn)結(jié)果不一致，推測可能孕三烯酮和消炎痛的外周鎮(zhèn)痛作用更好。

本研究是觀察盆痛靈及加味盆痛靈的鎮(zhèn)痛作用效果，為臨床治療子宮內(nèi)膜疼痛提供依據(jù)。至于盆痛靈及加味盆痛靈

表1 盆痛靈加味盆痛靈對小鼠熱板法致痛的影響（±S，n=10）

表1 盆痛靈加味盆痛靈對小鼠熱板法致痛的影響（±S，n=10）

注：與給藥前痛閾值比較，▲P ＜0.05；與空白對照組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01

HPPT(s)組別 基礎(chǔ)HPPT 5 15 25 35 45 60 90(min）空白組 11.43±1.65 13.89±4.18 13.40±4.34 11.55±6.35 10.28±4.51 10.62±5.10 9.15±2.79 15.72±6.34消炎痛組 11.60±1.86 18.66±14.93 18.26±15.77 18.10±15.79 19.29±15.72 17.47±16.24 21.39±20.95 33.86±20.72▲孕三烯酮組11.58±1.98 9.09±2.54 9.89±3.89 8.75±1.72 7.97±2.42 9.26±2.03 9.97±3.37 12.62±6.61▲盆痛靈組 11.79±1.73 14.57±8.85 15.63±10.65 14.68±7.03 15.37±5.89 23.53±22.64 25.58±19.50▲* 25.41±21.40加味組 11.36±1.98 17.17±16.57 25.34±19.23* 26.95±23.09* 24.88±18.86** 31.60±19.14▲** 31.79±21.33▲** 40.72±20.97▲**

3.2 盆痛靈加味盆痛靈對小鼠扭體反應(yīng)的影響

各給藥組與空白組比較可顯著減少醋酸致痛時小鼠扭體反應(yīng)的次數(shù)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.01）。加味盆痛靈組疼痛抑制率高于其余各組，提示加味盆痛靈的鎮(zhèn)痛作用略強(qiáng)于盆痛靈、消炎痛、孕三烯酮。結(jié)果見表2。

表2 盆痛靈加味盆痛靈對小鼠扭體反應(yīng)的影響（±S）

表2 盆痛靈加味盆痛靈對小鼠扭體反應(yīng)的影響（±S）

與空白對照組比較，**P ＜0.01

組別 N 15min 內(nèi)小鼠扭體次數(shù) 疼痛抑制率%空白組 10 18.00±10.07孕三烯酮組 10 8.10±3.03** 55.00消炎痛組 10 7.50±4.55** 58.33盆痛靈組 10 7.40±6.52** 58.89加味組 10 6.60±4.65** 63.66

4 討論

針對子宮內(nèi)膜異位癥（EMs）疼痛至今仍無藥物能徹底治愈，目前西藥治療副作用大，停藥后容易復(fù)發(fā)，口服中藥湯劑多選用苦寒破瘀攻伐之品，故灌腸方法尤為有利，既可減少對胃的刺激，又可通過腸壁滲透藥液至盆腔，使藥力直達(dá)病所。導(dǎo)師前期通過臨床觀察，自擬“盆痛靈方”水煎劑直腸給藥治療EMs 盆腔痛患者，取得較好近期療效[4]。本方主要由三棱、莪術(shù)、虎杖等組成?；⒄染哂徐铒L(fēng)利濕、散瘀定痛功效；三棱味苦性平，莪術(shù)味辛性溫，均具有破血行氣、消積止痛等作用，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明三棱有鎮(zhèn)痛、抗炎及抑制子宮平滑肌收縮、改善微循環(huán)作用，廣泛用于婦科疾病如痛經(jīng)[6]。EMs 患者病程長、纏綿難愈、易復(fù)發(fā)，根據(jù)中醫(yī)“久鎮(zhèn)痛作用機(jī)制有待進(jìn)一步的研究。

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